雷公藤和昆明山海棠化学成分相似性分析黄耀峰,沈雪松,顾生玖,朱开梅,李芳耀 (桂林医学院,广西桂林541004)摘要 [目的]研究雷公藤和昆明山海棠化学成分的相似性。
[方法]采用乙醚、氯仿和乙酸乙酯等有机溶剂对雷公藤和昆明山海棠植物根茎进行顺序热提取。
其提取液经浓缩后对相对应部位进行薄层层析检查、化学成分的预测和熔点的测定来判别2种植物的差异。
[结果]结果表明,2种植物含有很多相似的化学成分。
其薄层层析法的检查结果可作为雷公藤和昆明山海棠植物的生药鉴定,以及判断质量的指标。
[结论]该研究结果对进一步分离、提纯雷公藤及昆明山海棠所含的化学成分及研究各化学成分的结构有一定的参考作用。
关键词 雷公藤;昆明山海棠;化学成分鉴别;薄层层析法中图分类号 S661.4 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)13-05961-03A nalysis on Similarity of Chemical Compositions of betw een T ripterygium wilfordii H ook.f.and T ripterygium hypoglaucum (L évl.)H utchinsHUANG Yao 2feng et al (G uilin M edical University ,G uilin ,G uangxi 541004)Abstract [Objective]T he purpose of this research was to study the sim ilarity of chem ical com position of T ripterygium wilfordii H ook.f.and T riptery 2gium hypoglaucum (L évl.)Hutchins.[M eth od]T he chloroform ,ethyl acetate and other organic s olvents were used for root extraction under heat sequence in this essay.A fter concerntration of the extract ,T LC exam ination ,prediction of chem ical com position and m elting point determ ination were applied for judgem ent between the tw o plants ’differences.[Result ]T he results sh owed that the tw o species contained a lot of sim ilar chem ical com position.T he ex 2perim ental results of T LC exam ination could be regarded as pharm acogn ostic identification ,quality standard of tripterygium and THH.[C onclusion]T his research w ill give s om e references in the further separation ,purification ,com positions and chem ical structure study of T ripterygium wilfordii H ook.f.and T ripterygium hypoglaucum (L évl.)Hutchins.K ey w ords T ripterygium wilfordii H ook.f.;T ripterygium hypoglaucum (L évl.)Hutchins ;Identification of chem ical com position ;T hin layer chrom atog 2raphy基金项目 广西教育厅课题(200809MS179)。
作者简介 黄耀峰(1954-),男,广西百色人,副教授,从事天然药物的研究。
收稿日期 2009202216 雷公藤[T riptergium wilfordii H ook.f.]和昆明山海棠[T.hypoglaucum (Levi.)Hutchins.]属于卫茅科、雷公藤属植物,在植物分类学上定为2个品种[1]。
其药用部位为根,临床作用有:清热解毒、活血化瘀、祛风通络和消坚消肿,原是民间治疗“风湿”的草药。
据文献报道,雷公藤根中含有生物碱、卫茅醇、二萜内酯和三萜类化合物等[2]。
从昆明山海棠中可以测得生物碱、萜甾类、卫茅醇、鞣质、不饱和化合物、醛酮化合物、酚类和糖类等,两者从植物的种源、临床的用途以及副作用等方面有许多相似点[3-9]。
针对雷公藤和昆明山海棠植物在临床疗效上具有相似性的特性,笔者采用乙醚、氯仿和乙酸乙酯等有机溶剂对雷公藤和昆明山海棠植物根茎进行顺序热提取,其提取液经浓缩后对相对应部位进行薄层层析检查、化学成分的预测和熔点的测定来判别两种植物的差异,为雷公藤及昆明山海棠在临床上的合理应用提供科学依据。
1 材料与方法1.1 材料 雷公藤根由桂林市药材站提供,昆明山海棠根由桂林市药检所提供。
2种药品均按照文献方法做生药学鉴定。
乙醚为广州化学试剂二厂生产,批号081014;氯仿由上海试剂一厂生产,规格G B 2682265,批号081216;乙酸乙酯由上海试剂一厂生产,批号080916。
高速粉碎机:上海中药机械厂,型号SF 21703;烘箱:上海市实验仪器厂,型号10122型;干燥器:上海玻璃仪器一厂生产。
1.2 方法1.2.1 薄层层析板的制备。
取E.meick 硅胶27.5g ,加0.5%(W/V )羧甲基纤维素钠的上清液80m l ,充分拌匀,加数滴乙醇,倒入清洁的2块3mm 厚的玻璃中间,另取一块边缘光滑的玻片,从一端刮向另一端而成,室温空气干燥后,置105℃烘箱活化30m in ,然后放入干燥器中备用。
1.2.2 试验样品的制备。
取雷公藤根粉(或昆明山海棠根粉)分别置于连续提取器中,顺次以乙醚、氯仿、乙酸乙酯连续提取,每种溶剂在更换之前,使提取液呈无色透明为止。
提取液过滤浓缩,浸膏干燥除去溶剂,分别得到相应的乙醚、氯仿、乙酸乙酯等3个提取部分,供分离、鉴别。
2 结果与分析2.1 乙醚提取液的薄层对照 雷公藤根(或昆明山海棠根)粉经乙醚连续提取后,乙醚液过滤,浓缩至浆状物,分别称取0.1g 加入乙醚至10m l ,用血色素管点样30μl ,薄层对照,点好样的薄层板①置于盛有石油醚∶乙酸乙酯=8∶2的展开缸内饱和1h ,然后展开,展距14cm ,展毕除去展开剂,于紫外灯下观察萤光(图1)。
由图1可知,采用乙醚提取液,石油醚和乙酸乙酯为展开剂的薄层对照,雷公藤有8个斑点,昆明山海棠有10个斑点,表明雷公藤从1～8的斑点与昆明山海棠的1～8斑点相同,这说明含有相同的化学成分。
②置于盛有环己烷∶乙酸乙酯∶冰醋酸=20.0∶2.5∶0.7的展开缸内直接展开,展距14cm ,展毕除去展开剂后于紫外灯下观察萤光,(图2)。
由图2可知,采用乙醚为提取液,环己烷、乙酸乙酯及冰醋酸为展开剂的薄层对照,雷公藤及昆明山海棠均有11个斑点,说明化学成分相同。
2.2 氯仿提取液的薄层对照 雷公藤根(或昆明山海棠根)经乙醚提取后的根粉继续用氯仿连续提取,提取液过滤,浓缩呈浆状物,分别称取0.1g 加入氯仿至10m l ,用血色素管点样20μl ,薄层对照,点好样的薄层板①置于盛石油醚∶乙酸乙酯=8∶2的展开缸内饱和1h ,然后展开,展距14cm ,展毕除去展开剂后于紫外灯光下观察萤光(图3)。
由图3可知,采用氯仿提取液,石油醚和乙酸乙酯为展开剂的薄层对照,雷公藤含有8个斑点,昆明山海棠含有6个斑点,表明雷公藤1～6的斑点与昆明山海棠1～6的斑点相同,这说明含化学安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2009,37(13):5961-5963 责任编辑 李玮 责任校对 况玲玲成分相同。
②置于盛环己烷∶乙酸乙酯∶冰醋酸=20.0∶2.5∶0.7的展开缸内直接展开,展距14cm ,展毕除去展开剂后于紫外灯下观察萤光(图4)。
由图4可知,采用氯仿为提取液,环己烷、乙酸乙酯及冰醋酸为展开剂的薄层对照,雷公藤和昆明山海棠均含有8个斑点,说明化学成分相同。
氯仿浓缩的浆状物加入石油醚(60～90℃),反复洗涤分得石油醚部分和不溶的黄色固体物。
黄色固体物的熔点为92～112℃。
对三氯化铁、铁氰化钾、重氮化试剂、42氨基安替匹林-铁氰化钾,酸酐-浓硫酸,氯仿-浓硫酸呈阳性反应,表明雷公藤根(昆明山海棠根)内含酚性化合物和萜甾类。
图1 雷公藤和昆明山海棠乙醚提取液的薄层对照(展开剂∶石油醚和乙酸乙酯)Fig.1 The thin layer chrom atography comp arison o f aether extractfrom T ripterygium wilfordii and T ripterygium hypoglaucum hutch(developer :petroleum ether and ethylacetate)图2 雷公藤和昆明山海棠乙醚提取液的薄层对照(展开剂∶环己烷、乙酸乙酯及冰醋酸)Fig.2 The thin layer chrom atography comp arison o f aether extractfrom T.wilfordii and T.hypoglaucum (developer :cyclohex 2ane ,ethyl acetate and glacial acetic acid)2.3 乙酸乙酯提取液的薄层鉴别和薄层对照 雷公藤根图3 雷公藤和昆明山海棠氯仿提取液的薄层对照(展开剂∶石油醚和乙酸乙酯)Fig.3 The thin layer chrom atography comp arison o f ch loro form ex 2tract from T.wilfordii and T.hypoglaucum (developer :petroleum ether and ethylacetate)图4 雷公藤和昆明山海棠氯仿提取液的薄层对照(展开剂∶环己烷、乙酸乙酯及冰醋酸)Fig.4 The thin layer chrom atography comp arison o f ch loro form ex 2tract from T.wilfordii and T.hypoglaucum (developer :cy 2clohexane ,ethyl acetate and glacial acetic acid)(或昆明山海棠根)经乙醚、氯仿连续提取后,继以乙酸乙酯连续提取,过滤浓缩至小体积,放置析出沉淀物,过滤,滤饼洗涤干燥得(A )样品,母液连续浓缩至干呈浆状物,加入乙醚可得乙醚可溶部分(B )和乙醚不溶部分(C )。