嗜酸性粒细胞直接计数
一、实验目的:
掌握嗜酸性粒细胞直接计数的方法。
二、实验原理:
采用嗜酸性粒细胞稀释液,将血液稀释一定倍数,使大部分的红细胞和其他白细胞破坏,并使嗜酸性粒细胞着色,将稀释的细胞悬液滴入血细胞计数板,计数一定体积内的嗜酸性粒细胞说数量,经过换算得出每升血液中的嗜酸性粒细胞数。
三、实验材料:
显微镜、一次性采血针、试管、试管架、20uL的吸管、胶吸头、干脱脂棉、计数板、盖玻片、显微镜、一次性采血针、嗜酸性粒细胞稀释液。
四、实验步骤:
1、加稀释液:吸取嗜酸性粒细胞稀释液0.38ml于小试管中。
2、采血及加血:用微量吸管采血20uL,擦去管尖外部余血。
将吸管插入小试管稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层稀释液清洗吸管2~3次。
3、混匀:将试管中的血液与稀释液混匀,待红细胞完全溶解。
4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混匀。
用玻璃棒蘸取细胞悬液1滴,注入改良Neubauer计数板的2个计数池中,室温静置3~5min。
5、计数:低倍镜下计数2个计数池,共计10个大方格内的嗜酸性粒细胞数。
五、实验结果:
10个大方格内的嗜酸性粒细胞数为8个。
嗜酸性粒细胞/L=8÷10×10×20×106=0.16×109/L。
六、讨论:
1、计数应在60min内完成,因时间太长,嗜酸性粒细胞会被逐渐溶解,造成结果偏低。
2、血液加入稀释液后应立即摇匀,否则易导致血液凝固和细胞聚集,因嗜酸性粒细胞易
破碎,震荡不易太猛烈。
3、嗜酸性粒细胞变化的临床意义
1)嗜酸性粒细胞增多指成人外周血嗜酸性粒细胞绝对值大于0.5×109/L。
临床上常见于过敏性疾病及寄生虫感染,为T淋巴细胞介导的反应性嗜酸性粒细胞增多;亦常见于某些恶性肿瘤、骨髓增殖性疾病。
2)嗜酸性粒细胞减少指成人外周血嗜酸性粒细胞绝对值小于0.05×109/L。
临床上主要见于传染病急性期、严重组织损伤以及判断垂体或肾上腺皮质功能。
年级:2009 专业:医学检验班级:1班姓名:赵富海学号:2009221792
血液分析仪使用及结果分析
一、实验目的:
掌握血液分析仪的原理、操作方法、结果分析、及参数的临床应用。
二、实验原理:
(电阻抗型仪器为例)悬液在电解质溶液中细胞相对于电解质溶液为非导电颗粒,当体积不同的血细胞通过小孔时,可引起小孔内、外电流或电压的变化,形成与血细胞数相当、体积大小相应的脉冲电压,从而间接区分血细胞群,并分别进行计数。
三、实验步骤:
1、仪器准备:
1)开机前准备:按仪器说明,检查稀释液、溶血液等的装置连接。
2)开启电源:仪器开始自检过程。
3)检测空白本低,自检通过后,仪器充液记性空白本底测试,符合仪器说明后进行下一步。
2、测定控制物。
3、用仪器取定量稀释液于试管中,并取20uL末梢血注入其中,混匀,成为预稀释液样品
4、测定血液标本:手扶预稀释液,按进样键,仪器吸样后自动完成各项测试,屏幕显示并打印出各项参数、直方图。
四、实验结果:如右图所示:
五、讨论:
血液标本加入到稀释液中后要混匀,以免影响实验数据等的准确性,且稀释液要和仪器配套使用,严格按照其仪器说明操作。
姓名:张三性别:男年龄:22 科室:消化内科标本号:12345
临床诊断:肝硬化送检标本:末梢血送检目的:血常规
送检医生:李四送检时间:2012年8月22日
结果:
WBC 7.7×109/L HCT 48.0%
Lymph# 2.7×109/L MCV 83.2fL
Mid# 0.4×109/L MCH 27.8pg
Gran# 4.6×109/L MCHC 335g/L Lymph% 35.5% RDW-CV 14.2%
Mid% 5.2% RDW-SD 42.0fL
Gran% 59.3% PLT 221×109/L
HGB 161g/L H MPV 8.5fL
RBC 5.78×1012/L H PDW 15.2
PCT 0.187%
检验医师:王二检验时间:2012年8月22日。