实验方法与步骤
➢ 1.平板的制作： 将已灭菌的培养基融化，冷却到40-50℃， 倒平板。
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
2. 连续稀释法分离土壤中的微生物
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计算每克土样中微生物的数量 ➢ 选择刚好能把菌分开，而稀释倍数最低的
平板（含菌落数30～300个）计数。
微生物的细胞个数（个/g）＝平均菌落土数壤×克稀数释倍数
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微生物分离基本方法及原则
分离微生物时一般是根据该微生物对营养，pH， 氧气，温度等要求的不同，供给它们合适的条 件或加入某种抑制剂，形成只利于该菌种生长， 不利于其他菌种生长的环境，从而淘汰不需要 的菌种。
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(1) 分离细菌：取10-7、10-8两个稀释度各0.2ml加入 培养皿中，涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃倒置培 养，24小时。
(2) 分离霉菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml，涂 布土豆平板（倒平板前在土豆培养基中加入80% 的乳酸5滴），28℃倒置培养，3～4天。
产抗菌素的放线菌
A：卡特利链霉菌 B：弗氏链霉菌 C：吸水链霉菌金泪亚种 D：卡那霉素链霉菌 E：除虫链霉菌 F：生磺酸链霉菌
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实验材料
➢ 1 土壤样品 ➢ 2 培养基 （1）牛肉膏蛋白胨培养基 （2）高氏1号培养基 （3）马铃薯培养基（PDA培养基）
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教学内容
➢ 制备固体平板培养基。 ➢ 从土样中分离细菌、霉菌、放线菌，并观
察其菌落特征。 ➢ 在平板上划线分离混合菌悬液中金黄色葡
萄球菌和大肠杆菌。
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实验报告及思考题
➢ 计算每克土样中微生物的数量。 ➢ 为什么在分离霉菌时要加几滴80％的乳
➢ 为了获得单个菌体，要把待分离的材料进行适 当的稀释，按其生长所需要的条件，使其在平 板上，单个菌体繁殖成单个菌落。
• 由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不 同，将样品在不同培养基制成的平板上进行分 离，依据菌落形态的差异，可以区分细菌、放 线菌和霉菌三大类群，并计算出其数量。
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微生物的纯种分离培养
（实验11）
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➢目的要求
1．学会将混杂的微生物分离成纯种，掌握 统计分析样品中微生物的种类和数量的 方法。
2．学会从菌落及培养形态特征区分细菌、 放线菌和霉菌。
3．掌握几种纯化微生物的基本操作技术 （制作平板、连续稀释、平板划线）
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（P6 图 2-3）
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大肠杆菌菌落
伊红美蓝培养基
曲霉
酵母菌落
霉菌菌落
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青霉
放线菌菌落
A：诺尔斯氏链霉菌 B：皮疽诺卡氏菌 C：酒红指孢囊菌 D：游动放线菌 E：小单胞菌 F：马杜拉放线菌
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(3) 分离放线菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml， （制备菌悬液时，应先加入10%酚10滴）涂布淀 粉平板，28℃倒置培养，7～10天。
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3.平板划线分离法
➢ 操作要点 (1)接种环与平板表面约成20~30度角。 (2)用力适当，不要划破培养基. (3)方法A中，每次划线都要灼烧接种环。
酸？加在何处？ ➢ 为什么在分离放线菌时要加入10％的酚？
加在何处？ ➢ 培养微生物时应考虑哪些原则？培养时，
为什么要把已接种的培养皿倒置保温？
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Байду номын сангаас
实验原理
➢ 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于纯培养状态 这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯 化。
纯种：是微生物的某一个种或株，培养中的所 有细胞有着共同的来源或仅是同一细胞的后代。
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菌落特征
➢ 大小、形状（圆形，假根状，不规则状） ➢ 表面特征（光滑，皱缩，颗粒状，龟裂状，同心圆状） ➢ 隆起形状（扩展，台状，凹面，凸面，乳头状） ➢ 边缘情况（整齐，波状，裂叶状，锯齿状） ➢ 表面光泽（无光泽，金属光泽，闪光） ➢ 质地（油脂状，膜状，粘脆） ➢ 颜色、透明度
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