普通法：Cs的透射比Ts=10%；Cx的透射比Tx=4% 示差法：Cs做参比，调Ts=100% 标尺扩展为10倍 则：Cx的Tx=40%
要求：
示差法要求仪器光源强度要足够 大，仪器检测要足够灵敏。因为只 有这样的仪器才能将标准参比溶液 调到T%为100%，否则调不到。
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设待测溶液的浓度为Cx，标准溶液为Cs（Cs〈 Cx）， 则有： △A=Ax-As=Ɛb(Cx-Cs)=Ɛb△c 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的 吸光度之差。示差法测得的吸光度与△c呈线性关系。由 标准曲线上查的相应的值，则待测溶液的Cx： Cx=Cs+△C
示差法标尺扩展原理：
示差法
722型可见分光光度计
——高含量组分的测定
微生物11301班 七组
了解：
普通分光光度计一般只适于测定微量组 分。然而，当待测组分含量较高时，其将产 生较大的误差。
思考：采用什么方法才适合于高含量组 分的测量计算？
示差法
示差法又称为示差分光光度法。它与一般 分光光度法区别仅仅在于它采用一个已知浓度 作参比溶液，才大大提高了测定的准确度，使 其用于测定过高含量的组分，所以将这种吸光 度测量方法来扩大测量范围并提高灵敏度和准 确度的方法称之为示差法。
为什么示差分光光度法可以提高测 定的准确度?
吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待 测定组分浓度过高或过低，亦即吸光度测量值过大或 过小时，即使没有偏离朗伯--比尔定律现象。也会有很 大的测量误差，导致准确度大为降低，采用示差法可 克服这一缺点。 示差法和一般的光度法不同之处在 于，示差法不是以空白溶液（不含待测组分的溶液） 作为参比溶液，而是采用比待测溶液浓度稍低的标准 溶液作为参比溶液，然后测量待测溶液的吸光度，从 而测出待测液的浓度，从而大大提高测定结果的准确 度。