尿病、精神疾病、神经系统疾病、恶性肿 瘤、哮喘、近视眼等进行分子诊断。
五、疾病分子诊断所带来的问题
准确性 稳定性 复杂性 基因歧视
夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或 者夫妇染色体正常，但出生过染色体异常的患儿的夫 妇；
35岁以上的高龄孕妇； 夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患
儿的夫妇； 夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫
妇； X连锁遗传病基因携带者孕妇； 原因不明的习惯性流产的孕妇； 羊水过多的孕妇； 夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇； 具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。
虽然具备了上述条件，但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者， 则不宜做产前诊断，另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别的检查。
取胎儿细胞方法有： 羊膜穿刺法（15-17w）
绒毛取样法（10-11w）
脐带穿刺（>18w） 胎儿镜检查 B超 孕妇外周血胎儿细胞富集
PGD
第三节 基因诊断
PCR-SSCP
三、分子诊断技术的应用
基因诊断在遗传病中的应用
例如：镰状细胞贫血的基因诊断 酶解正常人DNA和患者DNA，用标记的珠蛋
白基因为探针作Southern杂交
镰状细胞贫血的基因诊断 限制性内切酶MstⅡ切割的序列是CCTNAGG （其中N是任何一种核苷酸）， 切割正常DNA产生1.1kb 珠蛋白的DNA片段；若切割患者DNA时， 由于AT破坏了MstⅡ的位点，便形成1.3kb 珠蛋白的DNA片段。
遗传病的诊断
前言 遗传病的常规诊断 产前诊断 基因诊断
第一节 遗传病的常规诊断
一、遗传疾病诊断的主要内容 病史采集 症状与体征 家系分析 细胞遗传学检查 生化检查 基因诊断
染色体检查的指征
①有明显的智力发育不全、生长迟缓或 伴有其他先天畸形者;②夫妇之一有染色 体异常，如平衡结构重排、嵌合体等;③ 家族中已有染色体或先天畸形的个体;④ 多发性流产妇女及其丈夫;⑤原发性闭经 和女性不育症;⑥无精子症男子和男性不 育症;⑦两性内外生殖畸形者;⑧疑为先天 愚型的患儿及其父母;⑨原因不明的智力 低下伴有大耳、大睾丸和(或)多动症者; ⑩30岁以上的高龄孕妇。
基因诊断在肿瘤中的作用
肺癌 乳腺癌 结肠癌
四、疾病分子诊断的展望
未来的分子诊断主要发展方向
胚胎着床前诊断—在囊胚8个细胞期，通过 对其中一个细胞的染色体核型分折和原位 杂交，从而将人类的遗传缺陷控制在最早 期阶段。
母体外周血中胎儿细胞分析技术。 对常见病、多发病如心血管系统疾病、糖
一、分子诊断学的发展 从第一代遗传标志（RFLP） 第二代遗传标志（STR） 第三代遗传标志（SNP）
二、分子诊断的策略和常用技术
基因诊断的策略 基因突变的检测 mRNA检测 基因连锁检测
基因诊断的基本技术 核酸杂交 聚合酶链反应 DNA测序 基因芯片技术
其它常用的技术
PCR-RFLP
不能稳定形成，因此该方法的灵敏度非常 高，特异性也非常好。
PCR-ASO
PCR-SSCP
当双链DNA变性为两条单链后，各自 会在中性条件下形成各自特定的空间构象， 因而在电泳时将在不同的位置上出现各自 电泳条带。如果DNA序列发生变化，甚至 只有一个碱基变化，空间构象也有可能发 生变化，电泳条带也随之变化。
FISH for SRY
Normal Male
Red = XRY Green = centromere of X
XX SRY+
第二节 产前诊断
遗传学检查
细胞培养、染色体检查、分子诊断等；
生化检查
特殊蛋白质、酶、代谢底物、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ间产 物和终产物等；
物理诊断
B超、X线、胎儿镜、电子监护等。
需产前诊断的对象：
➢ PCR 利用一对或数对特异性引物，将目标 DNA扩增；
➢ 酶切 利用某些限制性内切酶消化PCR产 物，如PCR产物中含有相应的酶切位点序 列，DNA链则被切开；
➢ 电泳 利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 分离酶切后的PCR产物，根据电泳图谱判
PCR-ASO：使用只有几十个核苷酸的探针，
检测被检DNA中的同源序列。由于探针比 较短，当被检DNA序列与探针不完全互补， 甚至只要有一个碱基的差异，杂交分子就