实验二温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
温度、p H对酶活性的影响
一、实验目的
了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法。
二、实验原理(请同学们自已补充)
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响
取3支试管,编号后按下表加入试剂
试管编号
试剂
1 2 3
0.2%淀粉溶液(d) 1.5 1.5 1.5
稀释唾液/ml 1 1 无
煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1
摇匀后,将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中,2号试管放入冰水中。
10min后取出,将2号试管内的液体分为两半,用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3
号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后,再用碘液检验,结果如何?记录并解释结果。
注意事项:
唾液制备时,先用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一小口蒸馏水,0.5~1min后,使其流入量筒,并稀释到50ml。
2、pH对酶活性的影响
取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂
试管编号
1 2 3 4
0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.1
5
6.0
5
7.7
2
9.7
2
0.1mol/L柠檬酸/ml 4.8
5
3.9
5
2.2
8
0.2
8
pH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml,分别注入到4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀,并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第4管加入唾液2min后,每隔1min由第2管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时,向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第1管起,均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色,分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。
注意事项:
1)从第三管中取混合液,是因为它的pH接近唾液淀粉酶的最适pH。
2)间隔1min,是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色,保证各试管反应时间相同。
四、实验结果
1、温度
管号1 2 3
2、pH
1 2 3 4
原因分析:
激活剂和抑制剂对酶活性的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、实验原理
三、实验步骤
取4支试管按下表加入试剂,观察现象并记录。
试剂
试管编号
1 2 3 4 0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5
1%CuSO
4
溶液/ml 0.5 无无无1%NaCl溶液/ml 无0.5 无无
1%Na
2SO
4
溶液/ml 无无0.5 无
蒸馏水/ml 无无无0.5 稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5
37摄氏度恒温水浴5min
碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2
四、实验结果
1 2 3 4
原因分析:。