（一）、温度、PH对酶活性的影响
一、实验目的
了解温度对酶活性的影响。

了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。

二、实验原理
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响
取3支试管，编号后按下表加入试剂
试剂
试管编号
1 2 3
0.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5
稀释唾液/ml 1 1 无
煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1
摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。

10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。

将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。

注意事项：
1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min
后，使其流入量筒，并稀释到50ml。

2、PH对酶活性的影响
取4个标有号码的20ml试管。

用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和
0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。

试剂
试管编号
1 2 3 4
0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.72
0.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28
PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。

向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。

将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。

第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。

待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。

添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。

观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。

注意事项：
1、从第三管中取混合液，是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。

2、间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各
试管反应时间相同。

四、实验结果
1、温度
1 2 3
浅蓝一半暗
褐
一半浅
蓝深蓝
2、PH
1 2 3 4
深蓝浅蓝浅紫深紫
分析：
酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。

唾液淀粉酶的最适温度为37摄氏度。

低温抑制酶的活性，高温使酶失活。

淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。

所以可用碘来检验其水解程度。

PH也能影响酶的活性，在最适PH下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾液淀粉酶的最适PH为6.8。

（二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。

二、实验原理
三、实验步骤
取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。

试剂
试管编号
1 2 3 4
0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5
1%CuSO4溶液/ml 0.5 无无无
1%Nacl溶液/ml 无0.5 无无
1%Na2SO4溶液/ml 无无0.5 无
蒸馏水/ml 无无无0.5
稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5
37摄氏度恒温水浴5min
碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2
四、实验结果
1 2 3 4
深蓝浅蓝中蓝中蓝
分析：
酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。

氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。

激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。

加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。