④实验结果表示：脲酶活性＝ｐＨ试验管一ｐＨ空白ｆ。
万方数据
１．３．２滴定法（国标：标准编号Ｇ１３ｆＩ＇１３５６７８７—１９９７）嗍 ①实验原理：将粉碎的大豆样品与中性尿素缓
冲液混合，在（３０±０．５）ｏＣ下保持３０ ｒａｉｎ，样品中的脲 酶催化尿素分解产生氨，用过量的盐酸中和吸收氨。 再用氢氧化钠标准溶液回滴到溶液ｐＨ值为４．７０。
摘 要 将大豆粉在１４０℃温度下热处理不同时间，用滴定法和ｐＨ增值法测定了其中脲酶活 性。结果表明，同一样品用滴定法和ｐＨ增值法测得的脲酶活性在数值上不相等，不能直接互用，但在 一定条件下可以进行数值的相互代换。
关键词大豆；脲酶活性；滴定法；ｐＨ增值法 中图分类号￥８１６．４２
大豆是优质的植物性蛋白质饲料．它含有３５％。 ４０％的蛋白质、１５％。２０％的脂肪和２０％。３０％的碳 水化合物，并含有丰富的矿物质与维生素，因此素有 “植物肉”、“绿色的牛乳”之美誉，是目前世界范围内 动物饲料原料中最常用的植物性蛋白质类饲料【ｌ】。但 同时．大豆中也含有影响动物对饲料中营养物质的消 化、吸收和利用的抗营养因子，如脲酶、胰蛋白酶抑制 因子等。并且当抗营养因子的含量超过动物的耐受范 围时还会影响到动物的健康和生产性能。为此，我国 制定了专门的国家标准，如我国《饲料用大豆》标准 （ＧＢｌ０３８４—８９）规定：“饲料用大豆需加热后使用，脲 酶活性不得超过０．４ ＮＨ３ｍｇ／（ｇ·ｍｉｎ）”；我国《饲料用 大豆饼》标准（ＧＢｌ０３７９－－８９）和《饲料用大豆粕》标准 （ＧＢｌ０３８０－－８９）规定：“大豆饼和大豆粕的脲酶活性都 不得超过０．４ ＮＨｃｎｇ／（ｇ·ｍｉｎ）”。目前，在我国较广泛 使用的脲酶活性的测定方法主要有滴定法和ｐＨ增 值法，其中，滴定法是国家标准方法（标准编号ＧＢ／Ｔ １３５６７８７－－１９９７），具有仲裁性。但是由于滴定法要求 精度高，所用试剂品种较多，且配制复杂，测定过程中 操作时间较长，操作步骤较严格，给检测人员的批次 测定带来不便，难以迅速地指导生产。所以在实际生 产中，一般多用ｐＨ增值法测定脲酶活性。ｐＨ增值法 由于测定结果的准确度和精确度都不高，因此，不具 有仲裁性。为了更好的了解两种方法的利与弊．本文
虽然用滴定法和ｐＨ增值法测得的大豆中脲酶活 性的数据有较大差别，不能直接通用，但是可以根据 它们之间的联系，建立一定条件．找到一种简便易行 的方法进行数值间的相互代换．从而实现实验过程的 以简代繁，以达到迅速、高效地指导实际生产的目的。
我国是个饲料资源比较缺乏的国家．应当重视有 关抗营养因子的研究，这应当是今后动物营养及饲料 学研究发展的一个主要方向。
滴定法和ｐＨ增值法虽然存在很多差别，但也存 在一定联系。在Ｅｘｃｅｌ中用ＣＯＲＲＥＬ函数计算图ｌ中 的两组测定结果数据，相关度达到０．９９６。同样由图１ 可知。这两种方法的测定结果的变化规律基本相同， 可以通过计算对两者进行数值上的代换。以达到用简 易的检测方法进行测定。就可推知用较复杂检测方法 测定出的较精确的测定结果的目的。 ４结论
卢晓凌，东北林业大学野生动物资源学院，１５００４０，黑龙 江省哈尔滨市东北林业大学７０２信箱。
王忠艳，单位及通讯地址同第一作者。 收稿日期：２００７—１２—１０
拟对两种方法进行比较研究．以明确两种方法测定结 果区别与联系。同时也希望通过对大豆中脲酶快速的 测定，可及时修订配合饲料生产过程中对大豆及其制 品的正确加工及使用方法，经济、有效地消除抗营养 因子的抗营养作用。 １材料与方法 １．１大豆粉样品
将普通市售生大豆粉碎（非强热）过４０目标准分 析筛。在１４００Ｃ下分别处理０、３、６，９、１２、１５、１８、２１、
２４、２７、３０、３３、３６、３９、４２、４５、４８、５ｌ、５４、５７、６０、６３、６６、
６９、７２、７５、７８、８１、８４、８７ ｍｉｎ，冷却后装入封口袋备用。 １．２化学试剂
本实验所用试剂均为分析纯（ＡＲ），水为蒸馏水。 １．３脲酶活性测定方法 １．３．１ ｐＨ增值法（ＡｐＨ值法）ｆ２．．．９１
３６５珈．０１７ ０．００７ １７４ＸＪ＋３．１４２ ６７９；ｐＨ增值法ｙ２－－０．０００ ０１０Ｘ于一
０．００１
８３５Ｘ２＋２．３７９ ４９８。根据此方程，通
过在Ｅｘｃｅｌ中用Ｅｘｃｅｌ ＶＢＡ语言进行程序编辑与计
算，可建立一种方便直观的对话窗口（如图２），通过此 窗口即可方便直观地进行这两种测定方法间的数据
3.石彦国 大豆制品工艺学 2005 4.中国标准出版社第一编辑室 中国农业标准汇编一饲料卷 2002 5.王成春;萧雅云 实战Excel 2002VBA程序设计实务 2003
本文读者也读过(6条) 1. 杨奇慧.舒璐.钟剑锋.Yang Qihui.Shu Lu.Zhong Jianfeng 不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究[期刊论文]饲料广角2008(21) 2. 张祥.程秀花.赵国琦.王丽.马亮.吴千茂.刘雄伟 挤压膨化工艺对大豆脲酶活性的影响[期刊论文]-粮食与饲料 工业2005(9) 3. 余云雷.齐德生.张妮娅 大豆脲酶活性测定方法比较研究[期刊论文]-养殖与饲料2005(6) 4. 周坚成.Zhou Jiancheng 豆粕脲酶活性的快速测定及其对肉用仔鸡生长的影响[期刊论文]-饲料工业2000,21(5) 5. 周兵.李树文.张宏玲.简丽.程宗佳 不同膨化温度下膨化大豆中脲酶活性和蛋白质溶解度变化趋势浅析[期刊论 文]-饲料广角2006(6) 6. 张祥.程秀花.赵国琦 不同挤压条件对大豆中脲酶活性的影响[期刊论文]-江西饲料2005(1)
图ｌ
热处理时Ｊ司（ｍｉｎ） １４０℃下大豆粉不同处理时间的脲酶活性
由图１可以看出．１４０℃加热条件下．０～８７ ｍｉｎ内
大豆粉脲酶活性随加热时间延长而降低，并呈规律性 变化。而且滴定法的测定值大于ｐＨ增值法的测定值。
由图１可知，用ｐＨ增值法和滴定法两种方法，测定同 一种大豆粉中脲酶活性随加热时间延长而降低这种
参考文献
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【３】石彦国．大豆制品工艺学【Ｍ】．北京：中国轻工业出版社，２００５．８１— ８７．
图２数据处理界面
图３数据记录界面
达到测定方法简便易行．可快速指导生产的目的。对 大豆及其副产品中脲酶活性的测定却普遍采用ｐＨ增 值法。如上文所述，这两种方法在测定过程中实验原 理、实验步骤、结果数值、数值单位等方面都不相同。 其中。虽然两者的测定结果在数值上比较接近，但仍 有一定差异，滴定法的测定结果数值较大。因而，在生 产实际中．两种测定方法的测定结果不能直接相互替 代使用，在对大豆脲酶活性进行表述或提出具体限量 要求时，应明确使用何种测定方法。 ３．２两种脲酶酶活性测定方法的联系
【４】 中国标准出版社第一编辑室．中１１１农业标准汇编一饲料卷【＾Ｉ】．北 京：中国标准出版社，２００２：１２６—１２８．
ｆ５】王成春，萧雅云．实战Ｅｘｃｅｌ ２００２ＶＢＡ程序设计实务ｆ坶北京：中 国铁道出版社。２００３：２３—７５．
３讨论 ３．１两种脲酶活性测定方法的差别
在我国，国家标准规定大豆及大豆饼、粕中脲酶
ｏ 活性的测定方法为滴定法。但在实际生产中，人们为
（编辑：洗桂宇，ｇｕｉｙｕｓｈ＠１２６．ｃｏｒｎ）
万方数据
大豆脲酶活性的两种不同测定方法的研究
作者： 作者单位： 刊名：
英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数：
卢晓凌， Wang Zhongyan， Lu Xiaoling， Wang Zhongyan 东北林业大学野生动物资源学院,150040,黑龙江省哈尔滨市东北林业大学702信箱
在“试样序号”和“ｐＨ增值法测定值（ｐＨ）”标签所对应 的文本框中用键盘输入相应的实验所得的测定结果
万方数据
数据，然后单击“数据转换”按钮。在对话窗口中即可 算出“滴定法估算值［ＮＨ３ｒｎｇ／（ｇ·ｍｉｎ）］”标签所对应的 值，并显示在相应的文本框中，再单击“将数据导人工 作表”按钮，即可把“试样序号”、“ｐＨ增值法测定值 （ｐＨ）”和“滴定法估算值ＩＮＨ３ｍｇ／（ｇ·ＩＩｌｉｎ）１，’标签所对应 的值导人到丁作表ｓｈｅｅｔｌ（如图３）中。如果需对工作 表进行中数据清理，可点击窗体中“清除工作表中数 据”按钮，即可将工作表中数据依行进行删除。
规律性变化时，测定出的变化规律基本相同。这表明
两种方法测得的脲酶活性大小在数值上虽然有所不
同。但数据问存在一定的关系。可通过一定的方法进 行两者间的数据代换。 ２．２实验数据处理
在Ｅｘｃｅｌ程序中对图１中的数据点添加其变化
趋势线，并运用程序拟合趋势线方程，可以得到图中２条
曲线的方程式：滴定法ｙ，＝０．０００ ＯＩＯＸ／３－－０．００１ ３１１ＸＪ２＋
③实验方法：准确称取０．４００ ｇ样品２份，分别 置于２支２５ ｍｌ比色管中，其中１支加入２０ ｍＪ磷酸 盐缓冲液。作为空白试验管，另１支加入２０ ｍｌ尿素 磷酸盐缓冲液。作为试验管，立即盖好比色管塞并剧 烈摇动，置于（３０±０．５０）ｏＣ恒温水浴中，每隔５ ｍｉｎ振摇 １次，准确计时，保持３０ ｍｉｎ。立即分别测定其ｐＨ值。
代换，即用简单常用的ｐＨ增值法的测定结果可以估 算出国标滴定法的测定结果［５１。
该对话窗口的使用方法为：首先打开Ｅｘｃｅｌ软
件，选择“文件”菜单中的“打开”选项，从显示出的对
话框中选择将要打开的文件。单击，即可打开相应的 工作表。然后点击如图３的Ｅｘｃｅｌ工作表ｓｈｅｅｔｌ中的
“数据处理”按钮，进入Ｅｘｃｅｌ对话窗口界面（如图２）。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
理时间的大豆粉试样（共３０个）的脲酶活性，其中每种 方法对每个样品均进行２次平行测定，分别将平行测 定得到的数据求平均值．最后得到实验结果数据６０ 个，依据上述两种不同测定方法可将数据分为两组， 并用Ｅｘｃｅｌ程序进行数据分析和处理．见图１。