实验 葡萄球菌属和链球
(一)菌落特点、菌体形态及染色性
1.葡萄球菌
金黄色葡萄球菌
2.链球菌
肺炎链球菌
3.肠球菌
三步骤和方法
革兰氏阳 性球菌鉴 定流程
1 触酶 2 O/F 3胆盐溶菌
4凝固酶
5新生霉素
6杆菌肽
7CAMP 四
(二)鉴定相关试验
1.触酶试验
2.凝固酶试验
3.甘露醇发酵试验
原理:致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸, 使培养基由紫色变为黄色。
4.新生霉素敏感性
5. Optochin敏感试验
原理: Optochin可抑制肺炎链球菌的生长。 结果判定:抑菌圈直径≥14mm为阳性。反 之阴性。
6. 胆汁七叶苷实验
方法:待测菌接种胆汁-七叶苷琼脂培养基, 35度孵育18-24h。 结果:细菌生长,培养基变黑色为阳性,不变 色为阴性。
实验 葡萄球菌属、链球菌属 和肠球菌属的培养和鉴定
临床病原生物学教研室
一目的要求
1. 熟悉葡萄球菌、链球菌和肠球菌的菌落 特点、菌体形态及染色性。 2. 掌握葡萄球菌、链球菌和肠球菌的分离 培养、鉴定方法和常用鉴定实验。
二器材和试剂
1.菌种 金葡、表葡、腐生,甲、乙、丙链 、肺链和肠球菌等。 2.培养基 普通培养基、血平板等。 3.试剂 3%过氧化氢、去氧胆酸钠、新鲜血 浆和细菌微量生化培养管等。 4.其他 新生霉素、杆菌肽 、Optochin纸片、 生理盐水、载玻片等。
7. 65g/LNaCL生长试验
方法:将肠球菌接种于高盐肉汤培养基中, 孵育18-24h。 结果:有细菌生长为阳性,不生长为阴性。
四注意事项
1.触酶试验不宜用血平板上的菌落,会出现 假阳性,陈旧培养物会丢失触酶活性而又出 现假阴性。因此每次试验应做阴(链球菌)阳 (金葡)对照。 2.凝固酶试验玻片法应注意控制好时间, 10S内观察结果,且必须制备浓厚的菌悬液。