三、试剂和仪器
1、试剂
KI、H3BO3、MnSO4﹒4H2O、Na2MoO4﹒2H2O、ZnSO4﹒7H2O、CuSO4﹒5H2O、CoCl2﹒6H2O
2、仪器设备
电子天平、磁力搅拌器、烧杯、容量瓶（100ML）、玻璃棒、试剂瓶
四、实验步骤
1、清洗仪器（容量瓶、烧杯、试剂瓶、玻璃棒等）
2、打开电子天平，去皮。
5.待琼脂充分溶解后，将溶液均匀倒入已经事先准备好的20个组培瓶中。
6.将无菌水瓶和倒培养基的瓶子和培养皿一起放入高压灭菌锅中，盖上锅盖。在98 kPa、121.3℃下，灭菌20 min。
实验愈伤组织的转接步骤
1.查看超净工作台上的镊子，剪刀，酒精灯，升汞等是否齐全，若都齐全，将培养基，无菌水，培养皿和菊花的愈伤组织放入超净工作台上，用75%擦拭超净工作台，并紫外线灭菌30min。
（15）每个培养瓶接入3—5个嫩芽，接种时注意将培养瓶斜上45°，这样可以减少染菌的几率。
（16）将已接种好的培养瓶放入光照培养箱内培养。
四、实验现象
4月25日观察。。。。。。。
实验阶段八配制菊花愈伤组织诱导芽的培养基4月25日
一、实验目的
配制接种菊花愈伤组织诱导芽需要的培养基
二、试剂及仪器设备
1、试剂
（5）取1个培养皿，打开放在酒精灯旁
（6）用镊子夹取20粒左右种子放在滤纸上
（7）打开一个培养基在酒精灯附近，用镊子将种子夹取在培养基内，每个培养基斜上45°接种，每个培养基内放入4~5粒种子，均匀放置。
（8）将培养瓶口在酒精灯上烧一圈，盖上瓶盖。
（9）重复（5）~（8）步骤.
（10）将接好种的培养基放在生化培养箱内，25℃无光照培养一周。
（4）将剪刀，镊子放入95%酒精中，拿出在酒精灯上灼烧，冷却后，用镊子取菊花叶片修剪。剪成大小0.5*0.5cm左右。
（5）将修剪好的菊花放在垫有滤纸的培养皿中，待接种。
（6）每个培养瓶接入3—5个叶片，接种时注意将培养瓶斜上45°，这样可以减少染菌的几率。
（7）将已接种好的培养瓶放入光照培养箱内培养。
植物组织培养实验报告
实验时间：2月28号—6月6号
指导老师：…
姓名：…
班级：园艺1001
学号：181001..
实验阶段一母液配置（贮备液2）3月14日
一、实验目的
学习如何清洗仪器、校准天平、以及配置母液
二、实验原理
配置培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配置，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。
（3）倒入试剂瓶中，贴好标签，放入冰箱冷藏保存。
实验阶段二培养基配制与灭菌3月21号
一、实验目的
学习母液法配制培养基以及掌握培养基灭菌的方法
二、实验原理
组织培养所用的培养基含有植物生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。
三、试剂及仪器设备
2.30min后，关闭紫外灯，将风力开至最小。
3.接种人员消毒，进入工作台进行接种工作。
电子天平，高压灭菌锅、烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药勺，称量纸，PH计，25个培养瓶等
三、实验步骤
1、准备25个培养瓶、洗净后用蒸馏水冲洗干净。
2、准备镊子、剪刀、刀、刀片、用报纸包好（分开包扎再合包），等待灭菌
3、准备5个加盖的干净培养皿，并在底部加上滤纸，并用报纸包扎好有待灭菌。
4.培养基配制
（1）用粗天平秤4g琼脂放入500ml烧杯中，加入250ml左右的蒸馏水进行加热溶化。
配置菊花愈伤组织转接的培养基
一所用药品：
二配置步骤：1.将所需药品依次加入500ml的瓷缸中，加入少量水，混合，溶解。
2.称取15g的蔗糖，4g的琼脂溶解于瓷缸中。
3.将溶液定容至500ml，并用pH剂测量溶液的pH，用HCL和NAOH将溶液的pH调至5.8至6.0之间，最佳值为5.8。
4.将瓷缸放到电炉上加热，并用玻璃棒搅拌，使琼脂充分溶解。
二、试剂及仪器设备
1、试剂
琼脂、蔗糖、混合培养液（贮备液1~4）、NaOH、HCL。生长素。。。。。。
2、仪器设备
电子天平，高压灭菌锅、烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药勺，称量纸，PH计，25个培养瓶等
三、实验步骤
1、准备25个培养瓶、洗净后用蒸馏水冲洗干净。
2、准备镊子、剪刀、刀、刀片、用报纸包好（分开包扎再合包），等待灭菌
3、配置贮备液2
（1）秤取KI 8.3mg、H3BO362mg、MnSO4﹒4H2O 223mg、Na2MoO4﹒2H2O 2.5mg、ZnSO4﹒7H2O 86mg分别溶解于约10ml蒸馏水中。
（2）秤取CuSO4﹒5H2O 25mg、CoCl2﹒6H2O 25mg分别溶解于100ml蒸馏水中，分别量取1ml与其它试剂混合，搅拌均匀，再加水定容至100ml。
实验阶段七接种石楠4月25号
一、实验内容
观察荷兰马齿苋及番茄的生长、菊花诱导愈伤组织的生长情况、准备好下周接种菊花愈伤组织诱导芽用的培养基、清洗石楠、接种石楠。
二、试剂与仪器
1、试剂
70%~95%酒精、0.1%HgCl2、石楠嫩芽
2、仪器
烧杯、移液管、量筒、长镊子、解剖刀、超净工作台、剪刀
三、实验步骤
（4）用pH计调酸碱度，pH在5.8左右（5.8~6.0）
（5）加蒸馏水定容至1000ml,搅拌均匀。
（6）将溶液倒入20个培养瓶中，每个瓶约50ml。另外，备5瓶无菌水。
5．将步骤2、3中的仪器，配好的培养基、5瓶蒸馏水一起放入高压灭菌锅内，在121℃下高温灭菌。
6.取出培养基置于实验台上，将其他用具放在烘箱内烘干并取出置于实验台上。
琼脂、蔗糖、混合培养液（贮备液1~4）、NaOH、HCL。生长素。。。。。。
2、仪器设备
电子天平，高压灭菌锅、烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药勺，称量纸，PH计，25个培养瓶等
三、实验步骤
1、准备25个培养瓶、洗净后用蒸馏水冲洗干净。
2、准备镊子、剪刀、刀、刀片、用报纸包好（分开包扎再合包），等待灭菌
3、准备5个加盖的干净培养皿，并在底部加上滤纸，并用报纸包扎好有待灭菌。
4.培养基配制
（1）用粗天平秤8g琼脂放入1000ml烧杯中，加入750ml左右的蒸馏水进行加热溶化。
（2）再加入30g蔗糖，直至液体呈透明状。
（3）在溶好的液体中加入配好的混合培养液（贮备液1 --25ml贮备液2--5ml贮备液3—5ml贮备液4—5ml），生长素。。。。。。搅拌均匀后冷却到室温。
（10）开始接种，用酒精棉球擦拭双手。点燃酒精灯。
（11）将石楠用75%酒精洗30秒，立即加入无菌水冲洗3次左右。
（12）将石楠用0.1% HgCl2浸泡10Min，立即加入无菌水冲洗3次左右。
（13）将剪刀，镊子放入95%酒精中，拿出在酒精灯上灼烧，冷却后，用镊子取石楠修剪。
（14）将修剪好的石楠放在垫有滤纸的培养皿中，待接种。
（2）再加入15g蔗糖，直至液体呈透明状。
（3）在溶好的液体中加入配好的混合培养液（贮备液1 --25ml贮备液2--5ml贮备液3—5ml贮备液4—5ml），生长素。。。。。。搅拌均匀后冷却到室温。
（4）用pH计调酸碱度，pH在5.8左右（5.8~6.0）
（5）加蒸馏水定容至500ml,搅拌均匀。
实验阶段六菊花愈伤组织的诱导4月18日
一、实验目的
利用菊花叶片诱导愈伤组织，为下次实验，愈伤组织诱导芽的实验做准备。
二、试剂与仪器
1、试剂
菊花、。。。。。。
2、仪器
电子天平、烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药芍，称量纸，PH计，22个培养瓶
三、实验步骤
1.观察石楠：一周后，石楠基本没有生根，但是其他组接种的荷兰马齿苋生根。
（4）用pH计调酸碱度，pH在5.8左右（5.8~6.0）
（5）加蒸馏水定容至500ml,搅拌均匀。
（6）将溶液倒入20个培养瓶中，每个瓶约25ml。另外，备5瓶无菌水。
5．将步骤2、3中的仪器，配好的培养基、5瓶蒸馏水一起放入高压灭菌锅内，在121℃下高温灭菌。
6.取出培养基置于实验台上，将其他用具放在烘箱内烘干并取出置于实验台上。
（6）将溶液倒入20个培养瓶中，每个瓶约25ml。另外，备5瓶无菌水。
5．将步骤2、3中的仪器，配好的培养基、5瓶蒸馏水一起放入高压灭菌锅内，在121℃下高温灭菌。
6.取出培养基置于实验台上，将其他用具放在烘箱内烘干并取出置于实验台上。
实验阶段五石楠生根培养基配制4月18号
一、实验目的
配制接种石楠生根需要的培养基
1、试剂
琼脂、蔗糖、混合培养液（贮备液1~4）、NaOH、稀HCl
2、仪器设备
电子天平，高压灭菌锅、烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药匙，称量纸，PH计，电炉，培养瓶等
四、实验步骤
1、准备50个培养瓶、洗净后用蒸馏水冲洗干净。
2、准备5个加盖的干净பைடு நூலகம்养皿，并在底部加上滤纸，并用报纸包扎好有待灭菌。
3、培养基配制
3、掌握无菌操作技术
二、试剂及仪器
试剂：75%酒精、95%酒精、0.1%HgCl2、圣女果种子、荷兰马齿苋种子
仪器：烧杯、移液管、量筒、长镊子、解剖刀、超净工作台、剪刀
三、实验步骤
1．准备两个干净的小烧杯：配置（1）70%~75%酒精100ml（2）0.1%HgCl2100ml
2.在无菌操作室内，超净工作台上放入：（1）用报纸包扎好的灭菌过的镊子、剪刀、（2）培养皿（已灭菌）（3）酒精灯（4）打火机（5）无菌水（6）酒精棉球（7）试管架（8）废液缸（9）95%酒精（10）75%酒精（11）0.1% HgCl2。用酒精棉球擦拭台面，打开紫外灯灭菌30Min。