第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
2.对苯二酚-亚硫酸钠还原法
（1）原理 食品中有机物经酸破坏后，使磷在酸性条件下与钼酸铵 作用生成磷钼酸铵。用对苯二酚-亚硫酸钠还原磷钼酸铵得到蓝色化 合物——钼蓝。其蓝色强度与磷含量成正比，在660nm处测定钼蓝的 吸光度，可以定量分析磷的含量。本方法的最低检出极限为2μg。 （2）仪器与试剂 1)仪器：实验室常规仪器、可见分光光度计。 2)试剂：硫酸（分析纯）、高氯酸-硝酸消化液、硫酸溶液 （3+17）、钼酸铵溶液、对苯二酚溶液、亚硫酸钠溶液、磷标准 储备液、磷标准使用液。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
（4）计算结果测定 样品中镍的含量按下式计算：
( A A0 ) 1000 X V2 m 1000 V1
式中 X——样品中镍的含量（mg/kg）； A——测定用样品消化液中镍的含量（μg）； A0——试剂空白液中镍的含量（μg）； m——样品质量（g）； V1——样品消化液的总体积（mL）； V2——测定用样品消化液体积（mL）。
第二章 粮油及其制品检验
1.氯化亚锡-硫酸肼还原法
（1）原理 食品中有机物经酸破坏后，磷在酸性条件下与钼酸铵作 用生成磷钼酸铵。用氯化亚锡-硫酸肼还原磷钼酸铵得到蓝色化合 物——钼蓝。其蓝色强度与磷含量成正比，可以进行比色定量。 （2）仪器与试剂 1)仪器：实验室常规仪器、可见分光光度计。 2)试剂：硝酸（分析纯）、硫酸（分析纯）、高氯酸（分析纯）、 硫酸溶液（3+17）、硫酸溶液（1+19）、硫酸溶液（3+97）、钼 酸铵溶液、氯化亚锡-硫酸肼混合液、磷标准储备液、磷标准使 用液。
4．干扰离子的消除 一种螯合剂往往同时和几种金属离子形成螯合 物，控制条件可有选择地只萃取一种离子或连续 萃取几种离子，使之相互分离。 ⑴控制酸度 控制溶液的pH值 ⑵使用掩蔽剂 例.KCN 可掩蔽 Zn2+ 、Cu2+ 柠檬酸铵可掩蔽 Ca2+、Mg2+、AL3+、Fe3+ EDTA 可以掩蔽除 Hg2+ 、 Au2+ 以外许多金属离子 。
出，待测组分转化为无机物状态存在于消化液
中。

常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、 高锰酸钾、过氧化氢等。
湿法灰化方法优点
①有机物分解速度快，所 需时间短。
优
点
②由于加热温度低，可减少 金属挥发逸散的损失。
湿法灰化方法缺点
①产生有害气体。
缺
点
②初期易产生大量泡沫外溢
③试剂用量大，空白值偏高
常用的螯合剂
双硫腙（HDZ）
丁二酮肟
二乙基二硫代甲酸钠 （NaDDTC）
与 金属 离子生 成金属螯 合物，相当稳 定，难溶于水， 易溶于有机溶剂， 有时可直接比色
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
一、磷的测定
由于磷元素的原子吸收在真空紫外区 ,且极易形成氧化物 ,所以目 前用原子吸收法测定磷存在很多困难。但磷形成络合物后对可见 光有分子吸收 ,因此 ,若在原子吸收分光光度计燃烧室中装上比色 杯 ,则可利用原子吸收分光光度计优良的光路系统测定磷络合物的 分子吸收 ,并进行定量。 测定粮食中总磷的含量主要用比色法，常用的有氯化亚锡-硫酸肼 还原法和对苯二酚-亚硫酸钠还原法。
螯合萃取原理
金属离子
螯合剂 有机相
+ 螯合剂 =
金属螯合物
水相
金属离子
Cu2+
Fe3+
Ca2+
观察其溶解性的变化
3、影响分配比值的几个因素：
（1）螯合剂的影响：螯合剂与金属离子生成 的螯合物越稳定，萃取效率就越高。
（2）pH的影响：pH 越高，有利于萃取，但金 属离子可能发生水解反应。
∴要正确控制溶液的酸度 , 对萃取有利，还可 提高螯合剂对金属离子的选择性。 例：Zn2+的最适宜pH为6.5-10。
( A A0 ) 1000 m 1000
式中 X——样品中汞的含量（mg/kg）； A——测定用样品消化液中汞的质量（μg）； A0——试剂空白液中汞的质量（μg）； m——样品质量（g）。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
2.冷原子吸收法
（1）原理 汞原子蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作 用。样品经硝酸-硫酸或硝酸-硫酸-五氧化二钒消化，使汞转为离子 状态，在强酸性中以氯化亚锡还原成元素汞，然后以氮气或干燥清 洁空气作为载气，将汞吹出，进行冷原子吸收测定，与标准系列比 较定量。 （2）仪器与试剂
1)仪器：消化装置、测汞仪、汞蒸气发生器、抽气装置。 2)试剂：硝酸、硫酸、300g/L氯化亚锡溶液、无水氯化钙（干燥 用）、 5mol/L混合酸溶液、五氧化二钒、 50g/L高锰酸钾溶液、 200g/L盐酸羟胺溶液、汞标准溶液、汞标准使用液。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
2.原子吸收分光光度法
（1）原理 样品经消化处理后，导入原子吸收分光光度计的石墨炉 中，电热原子化后，吸收232.0nm共振线，其吸光度与镍含量成正比， 与标准系列比较定量。 （2）仪器与试剂 1)仪器： ①原子吸收分光光度计。 ②压力消化罐（100mL容量）。 ③实验室常用设备。 2)试剂：硝酸（优级纯）、硝酸（1+1） 、 0.5mol/L硝酸溶液、 过氧化氢、镍标准储备液、镍标准使用液。 （3）操作步骤 1)样品处理 ①湿法消化。 ②高压消化。
溶液配制
元素的提取与分离
以上这些元素都以金属有机化合物的形式存 在于食品中，要测定这些元素先要做两件事： 1.用灰化法和湿化法先将有机物质破坏掉，释放 出被测元素。以不丢失待测成分为原则。 2.破坏掉有机物后的样液中，多数情况下待测元 素浓度很低，且为多种元素共存的状态，有其它 元素的干扰，所以要浓缩和除去干扰。
浓缩、分离处理方法与后边测定方法有关。
例： • 比色法测定， 用合适的金属螯合剂在一定条件下与被测 金属离子生成金属螯合物，然后用有机溶剂进 行液液萃取，使金属螯合物进入有机相从而达 到分离与浓缩。
• 原子吸收分光光度法，
一般可不用特殊处理。测痕量元素则用离 子交换法分离、提纯金பைடு நூலகம்离子或除去干扰离子。
电炉
干法灰化方法优点
①此法基本不加或加入很 少的试剂，故空白值低。
优
点
②灰分体积小，可处理较多 的样品，可富集被测组分。
③有机物分解彻底，操作简 单。
干法灰化方法缺点
①所需时间长。
缺
点
②因温度高易造成易挥发
元素的损失。
③坩埚有吸留作用，使测定
结果和回收率降低。
2. 湿法消化

原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使 样品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸
需要程度：常量元素、微量元素
性质：金属元素、非金属元素
食物中各种元素对人体需要来说，分为：
常量元素
微量元素
微量元素：
地球化学角度：占地球组成0.01%的60余种元素
医学角度：占人体总重量万分之一以下的元素
人体必需的有铁、锌、铜、锡、锰、硒、碘、氟等14种
微量元素
必需 元素
+
有毒 元素
自然条件 决定的
(3)萃取溶剂的选择： 溶剂是否有利于萃取的分离主要取决于它们的物 理性质和化学性质。 ①一般尽量采用惰性溶剂，避免产生副反应。 ②根据螯合物的结构，由相似相溶原理来选： 含烷基螯合物选卤代烃（CCl4、CHCl3等）， 含芳香基螯合物选芳香烃（苯、甲苯等） ③溶剂的相对密度与溶液差别要大、粘度小。 ④无毒。无特殊气体、挥发性较小。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
2)测定 ①标准系列的制备。 ②仪器条件。 ③样品测定。 （4）计算结果测定 样品中镍的含量按下式计算： X
( A A0 ) V 1000 m 1000
式中 X——样品中镍的含量（mg/kg）； A——测定用样品消化液中镍的含量（μg）； A0——试剂空白液中镍的含量（μg）； m——样品质量（g）； V——样品定容体积（mL）。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
三、汞的测定
测定粮油及制品中汞的方法有双硫腙比色法和原子吸收分光光 度法。
1.双硫腙比色法
（1）原理 样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与双硫腙生成橙 色络合物，溶于三氯甲烷，与标准系列比较定量。 （2）仪器与试剂 1)仪器：消化装置、可见分光光度计。 2)试剂：硫酸、 1mol/L硫酸、硫酸（1+19）、氨水、溴麝香草 酚蓝指示液、 200g/L盐酸羟胺溶液、三氯甲烷、双硫腙溶液 、 双硫腙使用液、汞标准溶液、汞标准使用液。
第二章 粮油及其制品检验
第四节 粮油及其制品中微量元素的测定
二、镍的测定
测定粮油及制品中镍含量的方法有丁二肟比色法和原子吸收分 光光度法。
1.丁二肟比色法
（1）原理 在碱性介质中，在氧化剂的存在下，镍与丁二肟生成酒 红色络合物，其颜色的深浅与溶液中镍的含量成正比。 （2）仪器与试剂 1)仪器：可见分光光度计。 2)试剂： 500g/L酒石酸钠溶液、 100g/L氢氧化钠溶液、 50g/L 过硫酸铵溶液、 10g/L丁二肟乙醇溶液、盐酸溶液（1+1） 、镍 标准储备液、镍标准使用液。 （3）操作步骤 1)样品处理。 2)标准曲线绘制。 3)样品测定。
第二章 粮油及其制品检验
二硫棕比色法测金属元素的条件：
元素 pH值 掩蔽剂 呈色 有机溶剂
铅