临床微生物检验标本 的采集
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在临床微生物检验工作中，标本的正确选择、 采集和运送是保证实验室质量的重要环节，是实 验室工作准确和有效的前提。
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第一节 标本的采集和处理原则
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一、标本采集的一般原则
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1.早期采集 2.无菌采集 3.根据目的菌的特性用不同的方法采集 4.采集适量标本 5.安全采集
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肠球菌菌血症 近年来明显增多，约占菌血症的10%。常见泌
尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并发心内 膜炎。此菌可对多种抗生素耐药，病情较重。
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革兰阴性杆菌菌血症 主要侵犯危及机体免疫功能低下的患者。常可引
起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。
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厌氧菌菌血症 厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道，
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真菌性脑膜炎：最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真 菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎日渐 增多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发， 如AIDS、恶性肿瘤，严重糖尿病、SLE等患者易 发生。
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流行性乙型脑炎：是一种人兽共患的自然疫源性疾 病。传染源为患者和家禽、家畜及野生动物，蚊虫 为传播媒介，经蚊虫叮咬、吸血而传播，人群对本 病普遍易感，感染后多数人无症状而成为隐性感染。 但可获得持久免疫力，再次发病者极少见。少数患 者病情严重，病死率高，可留有后遗症。
真菌
念球菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌
厌氧菌
拟杆菌、产气荚膜梭菌
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三、临床意义
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血液感染是一种危重的全身感染，对其进行病原菌的检验， 提供病原学的诊断极为重要。
当少量细菌侵入血液循环，为一过性，不繁殖或很少繁殖， 不引起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症,若有全身性 炎症反应的表现称为脓毒症。
并引起相应部位的感染。 真菌血症
常由条件致病性真菌引起，有假丝酵母菌、 曲霉菌和毛霉菌等，以白假丝酵母菌最多见，多 数伴有细菌感染。
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第三节 脑脊液
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一、标本采集
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采集脑脊液一般用腰椎穿剌术获得，特殊情况可采用小 脑延髓池或脑室穿刺术。
标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过1小时。 腰穿法无菌取脑脊液3～5ml，置无菌管内立即送检。培
患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送距离远近， 都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁， 容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。
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临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、 尿液、伤口的脓液、胸水、腹水、粪便、痰液及泌 尿生殖系统的分泌物等，下面分别介绍各种标本的 采集方法及检测出不同病原体的临床意义。
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2.采血部位
通常采血部位为肘静脉。 疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或者髂前（后）
上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。
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3. 静脉穿刺和培养瓶接种程序
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(1) 在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手 套固定静脉，不可接触穿刺点。
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二、标本的处理
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一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病 奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检
厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送， 有时可直接用抽取标本的注射器运送。
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其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能 及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、 心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中，脑脊液等则 要在25℃保存。
(2) 用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养 瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。
(3) 血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。 立即送检，切勿冷藏。
4.采血量
自动化仪器要求成人采血量是8～10 ml/瓶，儿童1～5 ml/ 瓶。
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5.血培养次数和采血时间 只要怀疑血液细菌感染，应即刻13 采集。 采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在1h内采集2～3
血液标本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法， 若从患者血液中检出细菌，一般视为病原菌感染，提示有 菌血症。
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常见的菌血症或脓毒症有： 葡萄球菌菌血症
由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及凝 固酶阴性葡萄球菌引起的菌血症和脓毒症逐年增多， 占菌血症的10%~15%，临床表现明显，发病急，中 毒症状重。
真菌及其他 新生隐球菌 白假丝酵母菌 钩端螺旋体
结核分枝杆菌
拟杆菌
新肠道病毒68～71
产单核细胞李斯特菌 不动杆菌
炭疽芽胞杆菌 葡萄球菌
肺炎克雷白杆菌 流感嗜血杆菌
狂犬病毒
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三、临床意义
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细菌性脑膜炎：是中枢神经系统感染的常见类型， 其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，有的呈暴发型， 病情严重，病死率较高；多发年龄在5～29岁， 冬春季多发，可用青霉素类、磺胺类、头孢霉素 类抗生素治疗。结核性脑膜炎最常见，近几年呈 回升趋势，为防治重点。
养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应将标本 置于35℃条件下保温送检，不可置冰箱保存。但做病毒 检查的脑脊液标本应放置冰块，可在4℃保存72h。
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肺炎链球菌 B群链球菌 A群链球菌 消化链球菌
二、脑脊液中常见病原体
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革兰阴性菌 脑膜炎奈瑟菌 大肠埃希菌 铜绿假单胞菌 卡他布兰汉菌
病毒 乙型脑炎病毒 柯萨奇病毒A 柯萨奇病毒B 脊髓灰质炎病毒
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿 色链球菌、肠球菌
革兰阳性杆菌 结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌
革兰阴性球菌 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌
革兰阴性杆菌 大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、 沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌
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第二节 血液
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一、 标本采集 10
1.皮肤消毒程序 严格执行以下三步法: (1) 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。 (2) 1%～2%碘酊作用60秒或10 %碘氟60～90秒， 从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。 (3) 70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精 消 毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。
次做血培养。 对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h 采
集血液，或于寒战或发烧后1h进行。 入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3d，每天采2 份。 6.标本运送 采血后应该立即送检,如不能立即送检，可室温保存，切勿冷藏。
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二、血液中常见的病原体
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种类
病原菌
革兰阳性球菌