第五章黄酮类化合物[ 学习要求 ]掌握 1 、黄酮类化合物的主要结构类型2、黄酮类化合物的理化性质和显色反应3、黄酮类化合物常用的提取和分离方法4、色谱法和紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用熟悉 1 、黄酮类化合物苷中常见的单糖、二糖和三糖2、一些有代表性的黄酮类化合物的生物活性了解 1 、氢核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用2、碳核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用[ 重点内容 ]1、黄酮类化合物的基本结构类型：黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、查耳酮类、二氢查耳酮类、橙酮类、黄烷 -3- 醇、黄烷 -3 ，4- 二醇、花色素类、双苯吡酮类和高异黄酮类。
2、黄酮类化合物的理化性质：①黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定形粉末，具有交叉共轭体系的黄酮类化合物多具有颜色；②黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态不同而有很大差异，黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，难溶于水，而二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，溶解度稍大；③黄酮类化合物分子中多具有酚羟基，故显酸性；④ ?- 吡喃环上的 1- 氧原子具有未共用的电子对，故表现微弱的碱性。
3、黄酮类化合物的显色反应：①还原反应：盐酸- 镁粉（或锌粉）反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。
四氢硼钠（NaBH4）反应是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂；②金属盐类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中常具有 3- 羟基 4- 羰基、5-羟基 4- 羰基和邻二酚羟基的结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物；③硼酸显色反应：黄酮类化合物分子中当具有3- 羟基 4- 羰基和 5- 羟基 4- 羰基结构时，在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应生成亮黄色；④碱性试剂显色反应：用碱性试剂处理，观察颜色变化，对于鉴别黄酮类化合物有一定意义。
4、黄酮类化合物的提取：①黄酮苷类以及极性稍大的苷元一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取，一些多糖苷类则可以用沸水提取；②对得到的粗提取物可进行精制处理的常用方法有：溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法和炭粉吸附法。
5、黄酮类化合物的分离：①柱色谱法：硅胶柱色谱主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化或乙醚化的黄酮及黄酮醇类。
聚酰胺柱色谱是分离黄酮类化合物较为理想的吸附剂，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物的分子结构类型、羟基的数目与位置。
葡聚糖凝胶柱色谱对黄酮类化合物有很好的分离效果，分离游离黄酮时，主要靠吸附作用，其吸附程度取决于游离酚羟基的数目，但分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用；②梯度PH值萃取法：根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，依次用 5%NaHCO3、5%Na2CO3、%NaOH及 4%NaOH 溶液萃取，来达到分离的目的；③根据分子中某些特定官能团进行分离：黄酮类化合物分子中常具有 3- 羟基 4- 羰基、 5- 羟基 4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故可以用一些沉淀试剂使之沉淀，来达到分离的目的。
6、黄酮类化合物的结构鉴定：①色谱法：纸色谱（PPC）适用于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物，根据其分离原理的不同，展开剂的种类也不相同。
硅胶薄层色谱：此色谱法用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物，效果较好。
聚酰胺薄层色谱：此色谱法特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类，由于聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力较强，因而展开剂需要较强的极性；②紫外及可见光谱法：此法是鉴定黄酮类化合物结构的一种重要手段，一般程序为：首先测定样品在甲醇溶液中的UV光谱，其次，测定样品在甲醇溶液中加入各种诊断试剂后得到的UV 及可见光谱，常用的诊断试剂有甲醇钠（NaOMe）、醋酸钠（ NaOAc）、醋酸钠／硼酸（ NaOAc／H3BO3）、三氯化铝（ AlCl 3）及三氯化铝／盐酸（AlCl 3／HCl）等，此法对于确定黄酮及黄酮醇类化合物、异黄酮类化合物、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物、查耳酮和橙酮查类化合物有无羟基取代及羟基取代的位置，有重要的意义。
[ 习题 ]一、名词解释1、黄酮类化合物2、碳苷3、四氢硼钠反应4、盐酸 - 镁粉反应5、锆 - 枸橼酸反应6、RDA裂解7、Wessely-Moser 重排8、pH梯度萃取法9、插烯酸二、填空题1、黄酮类化合物是指含有（）骨架的一类成分。
2、确定黄酮化合物结构具有 5-OH的方法有（）、（）、（）。
3、黄酮类化合物因其结构的不同而在水中的溶解度不同。
其中（）和（）等系非平面性分子，水中溶解度较大； ( ) 和 ( ) 等系平面性分子，在水中溶解度较小； ( ) 虽也具有平面性结构，但因以离子形式存在，亲水性最强，水溶度最大。
4、对黄酮醇类化合物和二氢黄酮醇类化合物来说，可用（）显色反应进行区分。
5、下列化合物混合在一起，现用Sephadex-LH20柱色谱进行分离，请写明它们的流出顺序为： ( ) ＞ ( ) ＞( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )OH OHHO O HO OOH OHO OHOHOHgal rha O OA BOH OHHO O HO OOH OHOHOHOHO OH OC DHOglcO OOOH OHOOH O OHgalrhaOE F6、花青素类化合物的颜色随pH 不同而不同，一般呈在pH＜ 7 的条件下呈现（）色，在 pH 为的条件下呈现（）色，在 pH＞的条件下呈现（）色。
7、有下面一组化合物，请写明其酸性强弱的先后顺序为( ) ＞( ) ＞( ) ＞ ( )。
OH HO OH 3CO OOCH 3OCH 3OH OHOH O OH OA BHOOH3CO OOHOCH 3OH OOHOOHOGlcC D8、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱， ()＞()＞() ＞ ()。
HO O HO OOH OHO OA BOHHO O HO OOH OHOHO OC D9、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱， ()＞()＞() ＞ ()。
OHOHHO OHOHOHOH O OH OA BOHHO OH OHOH OHOH O OH OC D10、用硅胶柱色谱分离下列一组化合物，用CHCl3 -MeOH进行洗脱，这四个化合物保留时间的大小顺序为：()＞()＞()＞()。
OHOH HO OOGlc OOHOHOH O OA BOH OHHO O Glc O OOCH 3 OHOCH 3O OHOC D11、用葡聚糖凝胶Sephadex-LH20 分离黄酮苷化合物时，分离主要原理是()，当用此凝胶分离黄酮苷元时，则主要是依靠()作用，这种作用强度大小取决于 ()。
12、纸色谱法是分离和鉴定黄酮苷类化合物的一种常用的方法，常采用双向展开方式，第一向展开剂常采用 ()性溶剂，分离原理为()，第二向展开剂常选用 ()溶液，主要分离原理为()。
13、有下列四种黄酮类化合物A、 B、 C、 D，OH OH HO O Rham-O OOH OHOHOOH OA BOHOHHO O Rham-O OO-Glc O-GlcOH OOH OC D请比较其酸性和极性的大小：酸性（）＞（）＞（）＞（）极性（）＞（）＞（）＞（）14、有下列四种黄酮类化合物A、B、C、D，请比较这四种化合物在如下三种色谱中 Rf 值大小顺序：OH OH Rham-O O HO OO-Glc-Rham O-Glc-Rham OH O OH OA BOHOH HO O HO OO-Glc OHOH OOH OC D①硅胶薄层色谱，用 CHCl-MeOH4:1 展开，Rf 值（）＞（）＞（）3＞（）；②聚酰胺层色谱，用 60%甲醇水展开， Rf 值（）＞（）＞（）＞（）；③纸色谱，用 8%醋酸水展开， Rf 值（）＞（）＞（）＞（）；15、用聚酰胺柱色谱分离下列化合物，以不同浓度的乙醇－水进行梯度洗脱，流出柱外的先后顺序为：（）＞（）＞（）＞（）。
OHOHOH HO ORham- Glc-O OOHOHOH OOH O A BOHHO Glc-O OOHOH OOHO OH OC D三、判断题1、黄酮类化合物都是平面结构。
2、多数黄酮苷元具有旋光性，而黄酮苷则无。
3、黄酮分子中引入7， 4’ - 位羟基，促进电子位移和重排，使其颜色加深。
4、硅胶、聚酰胺和Sephadex G 是分离黄酮类化合物常用的柱色谱填料。
5、用 Sephadex-LH20分离黄酮苷时，主要靠分子筛作用。
6、聚酰胺对黄酮类化合物通常在水溶液中表现出最强的吸附能力。
7、黄酮碳苷在常规酸水条件下可以被水解。
8、硼氢化钠显色反应可以用来区分黄酮和二氢黄酮类化合物。
9、黄酮与二氢黄酮相比，黄酮在水溶液中的溶解性更大。
10、碱性氧化铝可以用来分离黄酮类化合物。
四、选择题（一） A型题（单项选择题）1、pH?梯度法适合于下列 ______类化合物的分离。
A．黄酮B．强心苷 C ．挥发油 D ．香豆素2、下列化合物 _______的醇溶液与 NaBH4反应，生成紫 ~紫红色。
A．黄酮醇B．黄酮C．二氢黄酮类D．异黄酮类3、在 5%NaHCO3水溶液中溶解度最大的化合物是______。
A．3，5，7- 三羟基黄酮B．7，4′-二羟基黄酮C．3，6，- 二羟基花色素D．2′–OH查耳酮4、下列黄酮类化合物中的不同位置的取代羟基，酸性最强的是_______。
A． 6-OH B．3-OH C．5-OH D．7-OH5、某黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂NaOAc（未熔融）后，带Ⅱ红移 10nm，说明该化合物存在 _______基团。
A．5-OH B．7-OH C．4′- OH D ． 7-OH和 4′ - OH6、黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂AlCl3 后的谱图与AlCl 3/HCl 谱图完全一致，则示 B 环结构为______。
A．存在间二酚羟基 B ．只存在4′ - OHC．不存在邻二酚羟基 D ．存在邻二酚羟基7、应用 Sephadex-LH20分离下列化合物，最先洗脱出来的化合物为______。
A．黄酮二糖苷B．黄酮单糖苷C．黄酮苷元D．黄酮三糖苷8、下列苷类化合物，不能被常规酸催化水解的是______。
A．黄酮碳苷 B ．香豆素酚苷C．蒽醌酚苷 D ．人参皂苷9、下列化合物，在紫外光谱中，350nm以上没有吸收峰的化合物是 ______。
OHHO OHO OHOHOHOHOH OOHOA BOHHOO HO OCH OHOH OOHOHOH OC D10、用活性炭对黄酮类化合物进行纯化，在下列______溶剂中的吸附力最强。
A ． 8%的酚水B ．8%的醇水C ．醇D ．水11、黄酮结构中，三氯化铝与下列______基团与形成的络合物最稳定。