血浆纤维蛋白原（Fbg）测定
1. 实验原理
将试剂加入稀释的抗凝血浆中，试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，此反应过程的速率即反映了纤维蛋白原的浓度和功能。

通过660nm光照射血浆，测定其凝固反应的散射浊度变化。

2. 标本采集
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。

2.2
3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。

3. 标本存放全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血浆在室温22～24oC 下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。

冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测试。

冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。

4. 标本运输：低温条件下运输。

5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。

6. 实验材料：
6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。

1）FIB-C测定试剂盒（代号P/N:8469110）
冻干牛凝血酶（>35uNIH/ml）8瓶
异常质控血浆2瓶
2）定标血浆Calibration Plasma（代号P/N: 20003700）3）正常质控血浆Normal control plasma（代号P/N: 20003110）
4）低纤维蛋白原质控血浆 Low fibrinogen control（代号P/N:20004200）
5）因子稀释液（代号P/N:9757600）
6）清洗液A Cleaning solution（代号P/N:9831700）
7）清洗液B Cleaning agent（代号P/N:9832700）
6.2试剂准备
牛凝血酶：用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶牛凝血酶，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC 30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。

异常质控血浆：用1mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶血浆，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC 30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。

6.3试剂保存
未开封的试剂可保存在2～8 oC至试剂盒上标明的有效期。

试剂溶解后，
凝血酶：于原瓶中2～8 oC，3天内有效；于原瓶中-20 oC，
1个月有效；ACL（15oC），3小时有效。

异常质控血浆：于原瓶中，15～25oC，4小时有效；-20 oC，7天有效。

建议试剂不使用时，最好将其倒回原瓶中，保存于2～8 oC。

7. 仪器设备：
7.1 仪器名称：syxmex CA7000全自动血凝仪
7.2 仪器厂家：日本希森美康公司
7.3 仪器型号：CA7000
7.4 仪器技术参数：
7.4.1 试剂位：18个，具冷藏功能。

7.4.2 样本位：40个，可通过换盘连续添加。

7.5 仪器校准程序：
7.5.1 校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。

7.5.2 校准操作：设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。

8. 操作步骤：
8.1 开机：CA7000的开关在仪器的右侧。

开机后仪器自检，当屏幕上边显示Ready时可进行试检
8.2洗针：在主屏幕上选Rinse Probe键，然后按Execute进行洗针
8.3 检查消耗品：
1.准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。

2.准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把每一项的试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。

如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选Reagent Setting，按屏幕显示位置放置试剂。

注意：共三个位置放清洗液。

3.查看仪器的洗液瓶和废液瓶
8.4 准备标本：将样本离心好，放入样本架，再将样本架放到仪器进样器上。

8.5 输入检测项目：
主菜单上的按下Work list键，进入工作菜单。

输入项目，直接点击相应的实验项目键
重复：按屏幕下菜单的REPEAT键，在屏幕弹出的键盘上输入相应测试数，仪器会自动重复与光标所在位置相同的测试信息。

输入样本号：按屏幕下菜单的ID NO.Entry按顺序输入样本的序号或病人的病历号。

开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角START 键，开始检测
查看结果：返回到主屏幕，检测的项目如果由○变成●表明此试验已经完成。

按下Stored Date键，出现已存储结果界面，屏幕显示已完成的测试的信息。

如果查看反应曲线，按
下边菜单第一项Gragph查看凝集趋势、吸光度、错误信息等。

8.6 洗针：当做完一批标本后，需要洗针，按下Rinse Probe 然后按下Execute进行洗针
8.7 关机：回到主屏幕下，在洗完针后方可关机，切断电源，同时关闭压力泵和总电源。

9. 检验结果的判断与分析：
9.1 仪器测定Fbg线性范围在0.25g/L-10g/L，测定完成仪器将显示每个参数的计算结果（包括凝固时间与Fbg含量g/L），若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息：
﹡﹡﹡，﹡出现错误，不能得到分析数据
ˉˉˉ，ˉ不能计算参数
＋＋＋，＋数值超出线性范围.
9.2 仪器设定Fbg参考范围在2-4g/L，如果得到一个不正常数值，在数据的左侧将出现下列标记：
﹡出现错误信息
< 数据低于可报告的低限
> 数据高于可报告的高限
10. 质量控制：每批样本同时测定三个浓度水平(正常值低值和高值)的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

每个实验室均应建立自己的质控均值和SD值以检测实验质量。

至少每8小时做一次质控分析。

用
Westgard等方法进行质控数据的分析和处理，评定质量情况。

请参考CA7000全自动血凝仪操作手册。

11. 临床意义：Fbg是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目.
11.1 参考范围：2-4g/L
11.2 Fbg含量增高：高凝状态(如糖尿病伴血管病变，急性心肌梗塞，脑血管病变，口服避孕药，妊娠及其中毒症，深静脉血栓形成，动脉粥样硬化，高血脂症等);亦见于急性传染病，急性感染，肾小球疾病活动期，放射治疗后，烧伤，休克，外科手术后，恶性肿瘤，多发性骨髓瘤等.
11.3 Fbg含量减少：肝脏疾病(重症肝炎，慢性肝炎，肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纤溶期，溶栓治疗的监测，原发性纤维蛋白原缺乏症，原发性纤溶活性亢进，恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等.
11.4 纤维蛋白原异常：纤维蛋白原异常是一种遗传疾病，是常染色体显性遗传.患者Fbg含量可能在正常范围，但纤维蛋白原有质的异常.主要是Fbg分子的一个多态上出现一个异常氨基酸，临床上可无症状或有轻度出血倾向.
12. 变异的潜在来源
12.1 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不能用于Fbg测定项目，抗凝比例不当也将
影响结果的准确性。

12.2 样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块；混匀时过分用力，使红细胞破坏出现溶血，均会造成结果变异。

12.3 纤溶药物的影响：如双香豆素、链激酶、尿酶等
12.4 妊娠与急性炎症的影响
13. 操作注意事项：干粉试剂及质控血浆溶解
13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。

13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。

14. 仪器维护与保养
14.1 每日保养：
14.1.1开机前观察样品参比液液面，看是否够做测定。

14.1.2 注意检查液面水平并倒空废液瓶，确保废液能顺利流入废液瓶。

14.1.3让开关机尽量减少到最少。

14.1.4 检查废反应盘杯，必要时倒空废反应盘杯。

14.1.5在每天工作前和工作后，执行冲洗程序：按“PROG”，显示应用菜单，选择“PRIMING”，按“ENTER”确认。

14.2每周保养
14.2.1清洁仪器表面，标本区域内壁和分析腔。

14.2.2进入清洁程序清洁吸样针。

14.2.3清洁冲洗/废液池。

14.3每月保养
清洁空气过滤网
14.4根据需要
14.4.1清洁废液管路
14.4.2清洁溢出的样本
14.4.3更换吸样针组件
14.4.4调整吸样针位置
14.4.5对吸样针/试剂针排污处理
15. 参考文献。