菊花组培快繁技术在实际生产中的应用
陈喜林陈晓彬陈琦磊
（广东省汕头市海滨华侨公园管理处 汕头 515041）
摘要：为了去除病害复壮菊花，采用侧芽和花序轴两种外植体，分别在MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基上经过一段时间的培养均可诱导产生不定芽，不定芽继续培养长大切成茎段微插于MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基，再经过30 天左右培养增殖4.6倍。
1/2MS+2%蔗糖培养14 天后100%生根。
移栽基质采用泥炭与椰糖各半的混合基质，28 天后成活率98%以上。
上盆后长势旺盛，翠绿健壮。
花朵直径略大，且花色更加洁白，观赏价值更高。
关键词：菊花侧芽培养花序轴培养组培快繁
中图分类号：Q943.1;S682.1+1 文献标识码：A 文章编号：1006—2327—（2009）04—0029—02
菊花Dendranthema morifolium是菊科菊属的多年生宿根草本植物，原产于中国。
菊花栽培历史悠久，现栽培的为高度杂交种，已成为世界广泛栽培的名花之一。
生产上主要采用扦插方法繁殖，一般名贵品种扦插不仅成活率低，满足不了生产上的需要，而且栽培过程中病害（如黑斑病、褐斑病、炭疽病等）有逐年加重趋势，长势渐弱。
为复壮几年前开展了针对菊花十几个品种的组织培养工作，现以“汉白吐玉”品种为例，探讨组培快繁及规模化育苗方法，以解决生产上实际问题。
1材料与方法
1.1外植体及处理
10月下旬从汕头市海滨路尾华侨公园苗圃内选择“汉白吐玉”优良单株（几天前喷杀菌剂），轻取带1～2片叶的侧芽和绿豆大小的花蕾，带回实验室，先用洗洁精饱和溶液浸泡4－5min后，流水冲洗20min后置于洁净工作台上，用1%硝酸银消毒10min，然后用无菌水漂洗并不断搅动5～6次，每次3min ，滤纸吸干水分后，用手术刀切取长0.3～0.5cm侧芽（A）。
剥离花蕾得到直径0.2～0.3cm花序轴（B）。
这样就获得A、B两种外植体。
1.2培养基
a.MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖；
b.MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖；
c.1/2MS+2%蔗糖。
以上培养基是经过预备性试验，逐步添加逐步排除的方法并参考前人的研究成果筛选出来的，均以MS为基本培养基，加入0.7%琼脂，pH值5.8；121℃条件下蒸汽高压灭菌20min，培养过程中温度保持在25℃±1℃，光照12 h·d-1，光照度3000 lx。
2结果与分析
2.1诱导产生不定芽
将A、B分别接种于培养基a，5 天后观察外植体明显长大，9天后在外植体周围产生黄白色致密的愈伤组织，转瓶一次（相同培养基）到18天后，A的愈伤组织开始分化出绿色芽点，B的愈伤组织20天转瓶一次（相同培养基），到第55天才开始分化出浅绿色不定芽。
不定芽再经过15天左右培养长成高1～2cm，粗0.1～0.2cm 的芽苗。
2.2 继代增殖培养
将分化出芽苗茎段切成1cm左右且带有2～3片叶作为插穗转接培养基b，4天后见0.1cm左右腋芽产生，21天后腋芽长至0.5～1.0cm，28 天后腋芽长至1.0～1.5 cm，35天后长至1.5～2.5cm，这样每30 天左右转瓶一次，其增殖达4.6倍，即可获得大量苗。
2.3生根培养
将经过大量繁殖的芽苗切成1～1.5cm茎段转瓶接培养基c，经15 天左右培养，生根率达100%，根长0.5～
3.0cm，白色不定根3～7条，到28天时平均根数8.5条，
平均根长5.0cm。
2.4试管苗的移栽和基质的选择
经14天生根培养，根长至1.0～2.0cm，叶片舒展，叶色浓绿时即出室炼苗，洗苗移栽。
采用四种移栽基质做对比试验，结果表明泥炭与椰糠各半混合基质优于纯泥炭土、珍珠岩与河沙各半混合基质，更优于纯河沙基质[1]。
在泥炭与椰糠各半混合基质经28天精心养护移栽成活率在98%以上，萌出新叶生出新根，就可以上盆,按菊花生产要求进行正常的田间管理了。
2.5试管苗与同期扦插苗比较
通过田间观测比对株高、茎粗、叶片数、叶片完整度，试管苗均明显好于扦插苗，且叶片翠绿，不易感染病害，花朵直径略大，花色更加洁白。
观赏期相应更长，达到了预期目的。
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播种后施入沼液500 kg/666.7m2左右。
2.2追肥
根据玉米的需肥规律，分两期追肥。
2.2.1苗期施肥
在玉米拨节前7～8叶时，条施沼液1000～1500 kg/666.7m2。
2.2.2穗期施肥
在玉米抽穗前10天左右，再施沼液500～1000 kg/666.7m2。
2.3施肥注意事项
2.3.1沼肥出池后的处理
沼肥还原性强，出池后要先在贮粪池中存放5－7天后再施用。
如果立即施用，会与玉米争夺土壤中的氧气，影响种子发芽和根系发育，导致叶片发黄、枯萎。
2.3.2沼肥施用方法
玉米栽培进行沼肥追施时，忌表土撒施，应采用穴施或沟施。
2.3.3控制沼肥的施用量
施用沼肥的量不要太大，一般要比施用普通猪粪肥少；如果盲目大量施用，会导致作物徒长，行间荫蔽，造成减产[3]。
2.3.4施用沼肥应注意事项
不得与草木灰、石灰等碱性肥料混合施用，否则会造成氮肥的损失，降低沼肥的肥效。
3叶面喷施
3.1沼液喷施促生长
分别于玉米苗期、大喇叭口期和吐丝期各喷施一次50%的沼液。
有试验表明，沼液喷施能够促进玉米生长发育，玉米茎杆粗壮，叶色浓绿，叶片变厚，光合作用好，有机养分积累多，能提高玉米产量[4]。
3.2沼液喷施防治玉米螟幼虫
沼液中含有多种生物活性物质，某些抗菌素对作物的病虫害有着直接作用。
沼液无污染、无残毒、无抗药性，是一种“生物农药”。
有试验表明，在螟虫孵化盛期，用沼液50kg+2.5％敢杀死乳油l0ml，配成药液进行叶面喷施[5]，可以强化防治效果。
3.3叶面喷施注意事项
3.3.1沼液的选取
选取沼液时，应从正常产气一个月以上的沼气池水压间中层取用，沼液要澄清或用纱面过滤好，以免堵塞喷雾器。
3.3.2沼液的浓度
沼液喷施前要先兑水，一般兑水量为沼液的一半。
如果不先兑水直接施用在叶面上，尤其用于幼苗期，会使作物出现灼伤现象。
3.3.3沼液的使用方法
喷施时，重点应以叶片背面为主，以利吸收，因为叶片正面的角质层厚，不易于吸收利用，而叶片背面布满微气孔，易于吸收利用。
参考文献
[1]毛跃进,江伟,等.鲜食玉米应用沼液效果初探[J].上海农业科技,2009,1:60
[2]赵利晖,毛伟.沼液浸种对玉米种子发芽的影响[J].贵州农业科学,2006,34(增刊): 84-85
[3]熊玲.沼肥在玉米生产上的应用[J].现代农业科技,2007,(16):142、144
[4]韩小平.玉米喷施不同浓度沼液效果试验报告[J].中国沼气,2009,27(3):50-51
[5]胡方才,沈继华,张一锦.沼液对玉米防虫及增产效果试验[J].中国沼气1993,11(2):42-44
（上接第29页）
3小结与讨论
不同品种的菊花诱导不定芽对6-BA、NAA浓度要求有所不同，一般6-BA浓度在1.0～3.0mg·L-1，NAA浓度在0.02～0.2mg·L-1。
采用花序轴和侧芽两种外植体，侧芽诱导不定芽比较容易，而花序轴需要较长时间培养才可以，中间每隔20天要进行一次转瓶，否则时间一长，材料就会发生褐变，影响分化。
花序轴因外面有一层薄膜包裹着，所以花蕾表面便于消毒处理，合适大小更便于剥离。
因此从具有该品种
典型特征的植株上选取饱满、大小合适的花蕾十分必要。
利用组培只能去除病害，要得到完全无病毒植株，就必须要进行脱毒处理，而且一定要用茎尖作为外植体进行培养才行[2]。
参考文献
[1]李放娟,陈喜林,陈琦磊,等.龙翅悬垂秋海棠组培苗的出瓶及栽
培管理技术[J].广东园林,2005增刊:28-29
[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版
社,1991.171-181
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