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14.实验十四 从蛋黄中提取卵磷脂
实验14 从蛋黄中提取卵磷脂
一、实验目的
1. 掌握抽滤等基本操作 2.了解从蛋黄中提取卵磷脂的实验方 法
二、实验原理
结构
卵磷脂是磷脂酸的衍生物、别名为磷脂酰胆碱。它 由磷酸、甘油、高级脂肪酸和胆碱组成,其结构式 为:
二、实验原理
性质
1、卵磷脂分子中同时具有亲水基团和亲油基 团、具有良好的乳化性能。
5、加热时,会促使胆碱分解,产生三甲胺的臭味。
6、加硝酸酸化,脂肪酸析出,溶液变浑浊,加酸铅 有脂肪酸铅盐生成,浑浊进一步增强。
7、生成的氢氧化铜沉淀,因水解液中的甘油与之反 应,生成甘油配合物,沉淀溶解。
思考题
1、蛋黄中分离卵磷根据什么原理? 2、卵磷脂可以化,从结构上分析应做何 解释?
注解和实验指导
1、第一次减压过滤,因刚析出的醇中不溶物很细以 及有少许水分,滤出物浑浊,放置后继续有沉淀析出, 需合并液后,以原布氏漏斗(不换滤纸)反复滤清。
2、蒸去乙醇时,可能最后有少许水分,需搅动加速 蒸发。
3、黄色油状物蒸干后,蒸发皿上的油状物一定要使 其溶于氯仿中,否则会带入杂质。
4、搅动时,析出的卵磷脂可附于玻璃棒上,成团状。
2、可溶于乙醇、乙醚、氯仿,不溶于丙酮。
3、卵磷脂在碱性溶液中加热水解:甘油、脂 肪酸盐、磷酸盐、胆碱
二、实验原理
提取流程
蛋 乙醇提取
残渣
黄
(蛋白、脑磷脂等)
(
含 蛋 白 、
提取液 去乙醇 油状物 (脂肪、卵磷脂等)
脂 肪
氯仿
氯仿-丙酮溶液
、 卵 磷
氯仿溶液 丙酮(脂肪)Fra bibliotek脂 、
沉淀
脑 磷
(卵磷脂)
四、实验步骤
二、卵磷脂水解及鉴定
1.水解:取一支干燥大试管,加入提取的一 半量的卵磷脂,并加入5mL200g/L氢氧化钠溶 液,放入沸水浴中加热10min,并用玻璃棒加 以搅拌,使卵磷脂水解,冷却后,在玻璃斗 中用棉花过滤。滤液供下面检查用。
四、实验步骤
2.鉴定:
脂肪酸的检查:取棉花上沉淀少许,加1滴氢氧化钠溶 液与5mL水,用玻璃棒搅使其溶解,在玻璃漏斗中用棉 花过滤得澄清液,以硝酸酸化后加入醋酸铅2滴,观察 溶液的变化。 甘油的检查:取试管一支,加入1mL硫酸铜溶液,2滴 氢氧化钠溶液,振摇;有氢氧化铜沉淀生成,加入1mL 水解液振摇,观察所得结果。
脂
等
)
三、仪器及试剂
仪器:
研钵,布氏漏斗、抽滤瓶、蒸发皿,棉花,大试管 玻璃棒、玻璃漏斗
试剂:
乙醇(95%),氯仿,熟鸡蛋黄,丙酮,硝酸,硫酸 铜( 100g/L ),氢氧化钠(200g/L),醋酸铅 ( 100g/L )
四、实验步骤
一、卵磷脂提取
1、取熟鸡蛋黄一只于研钵中研细,加入10mL95%乙醇研磨, 再加入10mL95%乙醇充分研磨,减压过滤。(充分滤干) 2、滤渣移入研钵、加入10mL95%乙醇,减压过滤,合并两 次滤液于蒸发皿。(如浑浊,再过滤一次) 3、滤液水浴除去乙醇得黄色油状物后冷却至室温。 4、黄色油状物加入5mL氯仿搅拌使其完全溶解,然后搅拌 下慢慢加入10mL丙酮,搅动使卵磷脂尽量析出,抽滤,得 固体物质卵磷脂,待检。