HISCL检测原理和误差分析
学术二课 宋庆波
主要内容
一、HISCL检测原理 二、常见误差分析 三、常见结果报告问题
主要内容
一、HISCL检测原理 二、常见误差分析 三、常见结果报告问题
HISCL® 系列仪器
检测原理 检测时间
通量 试剂位 试剂识别
吸样区 系统
HISCL-5000
HISCL-2000i
HISCL-800
化学发光酶免疫测定法（ CLEIA ）：ChemiLuminescence Enzyme ImmunoAssay）
200 测试/小时 24
射频识别技术（RFID）
17 分钟 180 测试/小时
12 条码（Barcode）
100测试/小时 24
射频识别技术（RFID）
一次性加样头；过滤薄膜
HISCL-5000采用碱性磷酸酶作为催化剂，并采用显示出很强发光强 度的CDP-Star作为化学发光基质，来获得高敏感度。
通过已知浓度的校准品进行校准绘制曲线，可以得出样本的浓度数 值。
HISCL®-5000 的反应原理
化学发光酶免疫测定方法如下
测性方法
测定项目
2STEP法
HBsAg
特征 进行1次B/F分离和2次B/F分离。
为减少第一种原因的报警 所以要求我们在客户的培 训中，要强调试剂混匀的 重要性。
6、室间质评问题
某客户反馈我司HISCL检测省临检中心室间质评HIV结果漏检，该
如何给客户解释？
检测结果
1
9.7
2
0.0
3பைடு நூலகம்
3.5
4
0.0
5
0.7
分析：
回报结果 阳性 阴性 阳性 阴性 阳性
1、HISCL的HIV试剂是四代试剂，所检测的是P24抗原、HIV-1型的gp41、
怀疑由于R4/5的更换，曲线自动补正，出现了偏差，要求用户重新 使用校准品定标后，最后确认问题解决。 R4/5更换批号一般会自动补正，但是当结果异常时后，则需要重新校准
5、R4/5试剂未排除
日常工作中，经常会有客户反应项目报警R4/5未排出，针对这个问题 有两方面的情况： 1、单个项目报警R4/5未排出，多源于R2试剂的混匀问题，针对此问题 可以重新的摇匀试剂后，都可以解决。 2、如果是多个项目报警，可能原因是R4/5试剂问题或者是仪器R4/5的 排液阀出现了问题，需要工程师排查管路维修。
确认仪器状态
根据报警信息提示处理？ 样本针移动的轨迹下盖板上是否有血迹？
硬件故障 OK
确认标准曲线状态
确认定标品状态
是否过效期 开瓶时间是否过长？ 是否合理储存
异常
确认试剂状态
是否操作规范
单个
确认样本状态
确认仪器状态
批量
确认仪器或试剂状态
3、排除操作的因素
人为因素 样本状态
操作不当、保存不当、运输不当 量少、离心不充分、存在干扰
1STEP法
HBsAb
不分注R3试剂。 不进行1次B/F分离，只进行2次B/F分离。
D-1STEP法 FT3, FT4, TSH 不进行1次B/F分离，只进行2次B/F分离。
HISCL®-5000 的测定方法
R1试剂
样本 R2试剂
孵育
孵育 1次脱磁清洗
R3试剂 孵育
孵育 2次脱磁清洗
R4试剂 R5试剂 孵育
10min
发光强度 测试
15min
结果的计算
校准曲线表示浓度和光子数之间的关系，通过测定已知浓度的样本，从获得 的光量子数值近似做成，通过曲线的建立，测定样本的光量子数值可由曲线 计算得出其浓度。
TP项目的反应原理
主要内容
一、HISCL检测原理 二、常见误差分析 三、常见结果报告问题
1、分析思路
2、规范离心的重要性
规范的离心，对于结 果的准确性有着重要 的意义。
3、定标CV值过大问题
一家新用户的装机培训中，定标发现某些项目的定标的CV值偏大， 重新校准后依然有的问题存在，不固定的存在于某一点。
后经过查找原因，客户装机后一个月的时间没有使用机器，长时间放置， 管路产生了结晶，后经过多次的管路冲洗，灌注后，重新进行了校准，问 题解决。当然还有可能B/F抓手问题造成重复性不好。
R1:Biotin結合抗HBs Monoclonal抗体(老鼠)
标本 HBs抗原 反应之外的杂质
R2: Streptavidin 結合磁性颗粒
清洗液 脱磁分离
0min
5min
R3: ALP标记抗HBs Monoclonal抗体(老鼠)
清洗液 脱磁分离
R4: 缓冲液
R5: 化学发光基质液 CDP-Star ®
HIV-2型的gp36片段，以及HIV-O型，HISCL早期的敏感性主要来源于
p24抗原。
2、室间质评的阳性标本全部来源于阳性物质的稀释配比得出，因为不
同厂家的试剂生产过程中包被的抗体片段存在这差异，所以会出现结
果不同的情况。
6、室间质评问题
3、正常的人体血清当中含有不同的抗体片段，而稀释血清的样本由 于稀释，会出现gp41抗体稀释过度无法检测的问题。 4、李金明主任也明确表示过，室间质评的样本只适合于抗体试剂， 第四代的抗原抗体联合试剂不适合参加室间质评，可以通过实验室 间的比对来保证准确性,并传递告知涵。
4、HBsAg检测结果0.01数据增多
接客户电话，告知近期的HBsAg的项目检测数值多出现0.01的结果， 后经过远程连线，进行问题的处理。
4、HBsAg检测结果0.01数据增多
查看定标曲线，没发现数值明显的异常，但是发现这是一个Correct 的曲线，证明这个期间可能更换过了不同批号的R4/5试剂。
OK 1.质控结果
有问题
2、单个出现还是批量出现
排除仪器或试剂的问题
观察报警信息提示与样本状态
是否过效期?
确认质控品状态
是否分装使用？ 是否合理储存？
是否规范操作？
确认试剂状态
是否过期? 是否存在质量问题？（观察外观、包装、储存等） 是否更换试剂？ 试剂更换时操作是否规范？（R2是否混匀充分）
仪器重复性是否好?（B/F清洗分离的抓手是否有问题）
检测
2STEP法
HISCL®-5000 的测定方法
R1试剂
样本
R2试剂
孵育
孵育
孵育 脱磁清洗
R4试剂 R5试剂 孵育
检测
1STEP法
HISCL®-5000 的测定方法
R1试剂 样本
R2试剂
孵育
孵育
R3试剂 孵育
孵育 脱磁清洗
R4试剂 R5试剂 孵育
检测
D-1STEP法
HBsAg反应原理
下面以HBsAg 为例介绍一下检测原理
连续加载系统 ；标配SNCS
共通的检测原理、检测试剂，确保结果的一致性
HISCL®-5000 的反应原理
HISCL-5000使用化学发光酶免疫测定法来定量测定或定性测定样本 中的微量蛋白质和激素等。
将样本和试剂混匀并加温，使其发生免疫反应，然后发生酶反应。
通过计数酶反应中发出的光子 （光子计数），测定或检出样本中的 微量蛋白质和激素等。