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扫描电镜与透射电镜


2.特殊染色方法
银染:用硝酸银将神经细胞染为黑色。 醛品红染色:将弹性纤维染为紫色。 甲苯胺蓝:将肥大细胞的分泌颗粒染为紫 色。 活体染色:取动物组织材料之前活体注射 染料,观察巨噬细胞的吞噬情况。

3.其他制片方法
冰冻切片:组织液氮骤冷,恒冷箱切 片机切片(糖类、脂类、酶、核酸 等)。 涂片:将游离的细胞直接涂于切片上。 铺片:将疏松结缔组织或肠系膜等撕 成薄片铺在载玻片上。 磨片:骨和牙等硬组织可磨为薄片。
2.扫描电子显微镜技术
(scanning electron microscope)
扫描电子显微镜技术要观察的组织不需 制成切片。 固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧 光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结 构。 如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。
细菌L型 菌落类型 电镜照片
临床分离葡萄球菌L型
葡萄球菌L型回复后
功 能
异染颗粒
质粒
细菌核蛋白体
电镜照片形态与结构源自殊结构荚膜肺炎链球菌
Capsule
化学组成:
多糖或多肽 功能: 抗吞噬作用
产汽荚膜杆菌
粘附作用
抗有害物质损伤作用
肺炎链球菌
形态与结构
特殊结构
鞭 毛 Flagellum
化学组成:
鞭毛蛋白 功能: 运动器官
与致病有关
鉴定分类细菌
形态与结构
特殊结构
(二)电子显微镜技术
(electron microscopy)
光镜:分辨率为0.2μ m,放大倍数约为1000倍; 电镜:分辨率为0.2nm,比光镜高1000倍,可放 大几万倍到几十万倍,因此电镜能观察到细胞 的更微细结构。 在光镜与电镜下进行观察,常用的长度计量单 位为毫米(mm)、微米(μ m)和纳米(nm)。 这些单位间的关系如下: μ m( 微米 ) = 10-3mm( 毫 米);nm(纳米)=10-3μ m(微米)
细胞膜
为于细胞壁内紧包细胞质,结构与真核细胞基本相同。
功 能
细胞膜电镜照片
生物合成
物质转运
分泌呼吸
细胞膜 模式结构图 载体蛋白 脂质双层
形态与结构
中介体
Mesosome
部分细胞膜折叠形成的向内陷入细胞质中的囊状物
白喉杆菌 细胞膜与中介体
供线 大粒 类 量体 似 能, 真 量为 核 。细 细 菌胞 提
(一)一般光学显微镜术 • 镜下结构称光镜(light microscope LM)
结构; • 放大倍数1000倍; • 分辨率0.2μm; • 组织制成薄片,以利光线通过。
(1)取材(1.0cm) 固定(甲醛) 酒精脱水 (低-高) 透明(二甲苯) 浸蜡包埋 切 片(5-10 um) 展片;
(2)脱蜡(二甲苯) 酒精(高-低) 水 苏木精-伊红染色 酒精脱水(低-高) 透明 (二甲苯) 封片(树胶)
1.透射电子显微镜技术
(transmission electron microscope TEM)
透射电子显微镜技术的组织须用戍二醛或锇酸固定, 树脂包埋,超薄切片(厚50~80nm),再经铅盐等 重金属盐染色后,在透射电子显微镜下观察。 电镜下所见的结构称超微结构(ultrastructure), 被金属所染部位,荧光屏上显得暗,图象较黑,称 为电子密度高;反之则称为电子密度低。 被检结构和重金属盐相结合的称正染色;被检结构 本身不与重金属盐结合,而其周围染上重金属盐的 称负染色。一般染色都是正染色。
形态与结构
疟疾破坏的两个红细胞
1、透射电镜 :观察组 织、细胞内部超微结构。 分辨率0.2nm。
标本制备:1、固定 (戊二
醛与锇酸等) 2、包埋(树 脂) 3、切片(50-80nm) 4、 染色(醋酸铀和柠檬酸铅等 重金属) 标本在荧光屏上呈黑白反差 的结构影像。 电子密度高、 电子密度低:被重金属浸染 呈黑色的结构,称电子密度 高;反之,浅染的部分称电 子密度
PAS反应: (periodic acid Schiff reaction)
显示多糖和蛋白多糖的常用方法, 又称过碘酸一雪夫反应。过碘酸 先将糖分子的乙二醇基氧化为乙 二醛基,后者继而与Schiff试剂结 合,形成紫红色反应产物。
免疫组织化学术 (immunohistochemistry)
应用抗原与抗体结合的免疫学原理,用 标记的抗体检测组织细胞内抗原物质的技术。 常用的标记物(1)荧光色素 (2)酶 (3)胶体金
芽 胞 Spore
脱水而成,为细菌休眠形式
功能与医学上意义: 对外界的抵抗力增加 可发芽成繁殖体有致病性 有鉴别作用 应以杀死芽胞为灭菌效果的指标
形态与结构
组织化学术(histochemistry)
通过化学或物理反应原理,在切片上加 某种试剂,和组织中的待检物质发生化 学反应,其最终产物或为有色沉淀物, 以光镜观察;或为重金属沉淀,用电镜 观察。显示组织切片或细胞内糖类、脂 类、酶、核酸等化学成分。
制片过程
1.石蜡切片术 (paraffin sectioning)
(3)染色(staining): 是用染料使无色组织切片着色,增加对 比度, 便于镜下观察。染色方法很多,但没有 一种 能使细胞全部结构同时着色。 常用的染色方法:
H.E
苏木精(hematoxylin):细胞核和胞质内的嗜 碱性物质着蓝紫色 。 伊红(eosin):细胞质基质和间质内的胶 原纤维等着红色。
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