红细胞血型系统
合,经低速离心,凝集的红细胞悬浮在凝胶中,而未和抗
体结合的红细胞则沉于凝胶底部。
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1. 玻片法: (正定型)
A B A、B
2
A B A、B A B A、B
2
2
Anti-A
Anti-B
Anti-A、B
室温15-30min
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【结果判断(result)】
A型血
B型血
AB型血
O型血
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2. 试管法:
[试剂]
1 A 1 B
1.
1 AB
标准抗血清
1 B
2. 2%洗涤RBC悬液
1 AB
加RBC
1 A
室温5min后 (1000-2000)rpm ×( 1-2)min
1 A
1 B
1 AB
1 A
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1 B
1 AB
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(六)ABO血型鉴定(ABO
typing)
blood
【原理(principle)】
正定型:用已知抗体特异性的血清检查红细胞的抗原
反定型:用已知血型的红细胞检查血清中的抗体
基础:ABO抗体是规则抗体。
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【试剂(reagent)】
1.标准抗A、抗B、抗AB血清制备 从正常人血液中分离血清:采血—分离血清—灭活补体— 效价滴定—亲和力实验—特异性测定—抗血清的防腐和染 色—分装保存
无可查觉
IgM 4~25℃ 能 不能 IgG
有
37℃ 不能 能
在盐水中与相应RBC产生凝集
能
不能
3.抗A、B抗体:O型人血清中;与A型或B型RBC都能凝集。
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(五)ABO系统的亚型 亚型:是指属于同一血型Ag,但Ag结构和性能或Ag位点 数 有一定差异所引起的变化。 A亚型:最多见有A1 、A2等,我国人中A2和A2B型在A与AB 型中所占比例<1%。A2的抗原性弱,正定型时很可能误 认为O型。正反定型不一致时,首先怀疑是不是亚型, 那么怎样区别亚型呢?用抗A血清测定A型红细胞时,A1 和A2亚型均与之凝集,如用抗A1血清,则A1红细胞可以 与之反应,而A2红细胞则不能与之反应。
生后几个月才开始形成自已的Ab, 5-6岁时达高峰,
产生Ab的功能一直延续到生命的晚期, 但成人后,效价随年龄增长而逐渐↓。 问:新生儿血型怎样来定? 免疫抗体:通过输注异型抗原刺激机体产生的抗体。
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2.天然Ab与免疫Ab的区别
天然Ab 免疫Ab
抗原刺激
免疫球蛋白类别 与RBC反应的最适温度 被血型物质中和 通过胎盘
第二节
血型(blood group)
红细胞血型系统
是指血液系统的一种遗传多态性, 是产生抗原抗体的遗传性状。 血型系统: 能产生用血清学或免疫学方法检出的
O
化学上相关抗原的一系列等位基因及
其修饰基因。
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一.ABO血型系统
(一) ABO血型的遗传基础
基因型:从双亲染色体上所遗传下来的基因。 表型:即血型本身,所观察到的遗传基因。 由ABO、Hh、Sese三个分离位点的基因所控制 ABO基因: ①ABO基因位于9q34,基因座上有A、B、O, A、B基因对于O基因是显性基因。
②父母各遗传给子代一个基因。
③有6个基因型,4种表现型
AB O
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ABO血型的遗传 父
表现型: 基因型:
母
AB O B A
BO OO AB BB BB 或BO AO AA
O AB B A A
BO OO AB BB AA 或AO AO AA
O AB、A( AO )、 B(BO) A 、 B 或 AB 子女表型(基因型): B或OA( BO 、 BB 或 OO ) 或O(AO 或 AA ) 或O ( ( OO ( ) OO ) AB、AA 或BB)
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(三) ABO抗原的生化合成
h基因 糖的低聚糖链
第一课件网 Oh型(孟买型) H物质
A抗原
RBC膜上含4个
O基因
RBC膜上含4个 糖的低聚糖链
H基因
转移酶
A基因
H物质
基转移酶
B基因
Base Structure(e.g Glycoprotein)
基转移酶
B抗原
N-乙酰半乳糖胺 D-半乳糖
①辅助鉴定血型
②有助于查“免疫性Ab” ③预测胎儿ABO血型:羊水
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(四) ABO系统抗体:
1.抗A 、抗B抗体:主要是IgM 天然抗体:机体没有经过可察觉的Ag刺激就在体 内存在的Ab.人血清中存在的Ab能天然地与 其自身RBC所缺乏的A、B抗原相对应→血型定型的依据。 产生:人在出生前尚未产生Ab ,
③亲和力:血清0.05ml + 10%RBC0.1ml→15S内 出现凝集,3min凝块≥1mm2 。
④冷凝集素:冷凝集素效价<1:4 。
2.标准RBC、洗涤RBC:
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【方法(method)】
现在一般用盐水凝集法检测 盐水凝集法(玻片法、试管法) 微柱凝胶试验:在微柱凝胶介质中,红细胞与相应抗体结
N-acetyl Glucosamine
D-Galactose N-acetyl Galactosamine L-Fucose
B A
N-乙酰葡萄糖胺 L-岩藻糖
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1.ABO抗原的发生:
(1)5~6周胎儿RBC可测出ABH抗原,妊娠期间浓度增长不快。 →出生时还未发育完全。 (2)新生儿A、B抗原位点较成人少(25%-50%)。 (3)一般出生后18个月时才充分表现出抗原性。
(monoclonal antibody, mAb):应用淋巴细胞杂交瘤技术, 即可得到ABO血型特异性单克隆血清。优点:①只含所 需的特异性抗体;②可以进行大规模生产;③节约大量人 血液材料。
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ABO标准血清的要求 ①特异性:不含意外Ab,没有非特异性凝集。
②效 价:抗A:1:128以上; 抗B:1:64以上。
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2.分 泌 型:
血型物质:组织细胞也能合成分泌可溶性的ABH抗原
→存在于许多体液中。
以唾液中含量最丰富,CSF中无。 ⑴分 泌 型:体液中含有这种血型物质者为分泌型→80%人 受控基因是Sese、SeSe ⑵非分泌型:无血型物质者→约20%人 受控基因是sese、se是无效基因。
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⑶血型物质的作用:
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基因型
表型
RBC上抗原
血清中抗体
血型
AO、AA BO、BB AB OO
A B AB O
A B AB —
抗B 抗A — 抗A、抗B、抗 AB
A B AB O
O RBC
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(二) ABO血型表型的频率
不同人种,不同区域ABO血型表型的 频率有差异 问: B基因在亚洲频率最高,是不是就意 味着亚洲人当中B型血的人在亚洲最多?