拟南芥种植方法
一.拟南芥生长条件
拟南芥生长的适宜温度白天为22-24℃左右,夜温最好比日温低2℃。
拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳,土壤湿度70%—80%,营养土:蛭石=1:1,3—4天浇一次营养液,从底盘浸入。
二.种子处理
1.取适量种子置于标记好的1.5ml离心管中,加入1 ml 70%乙醇轻微振1 min;
2.去乙醇,加入1 ml体积分数为10%的NaClO (次氯酸钠), 消毒5~10 min;
3.吸去NaClO, 用无菌水冲洗种子5次后, 加入600μl无菌水;
4.取适量拟南芥种子至10 ml 离心管中,加入0.05%的琼脂悬浮,置于4℃冰箱低温春化处理2-3 天。
三.土壤培养
将已春化处理的拟南芥种子,用消过毒的牙签或者移液枪将种子,点播在土壤中,一盆2—3颗即可,将花盆放入有水的底盘中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可点播。
用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜,如果苗很弱,则在此基础上还需多覆盖1天。
当到4叶期时,要适当移苗,每盆一株。
小心轻轻用镊子拨开周围土壤,连根取出小苗(注意不要伤害根部)。
苗期不使用营养液,移栽后3-4天使用一次营养液,期间视情况浇水,但不要在底盘中始终保持水层。
在开始收籽期,不再需要过多的水分,可保持底盘干燥,此时每隔7-10天加一次水即可。
在种荚变黄,变干时可以收籽。
将种子抖落在纸上,用金属滤网过一下以除去杂质,将种子装入写了标记的小纸袋中,放于干燥的环境中让种子进一步干燥后,封存于1.5ml试管中,切记越干越好,长期保存的种子必需要干燥保存到4℃。