高效液相色谱法测定藿香正气片中陈皮的含量
【摘要】目的建立藿香正气片中陈皮的含量测定方法。
方法液相色谱法。
色谱柱：kromasil c18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈-0.05mol·l-1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节ph值为3.0）（20：80）；流速1.0ml l·min-1；柱温：30℃；检测波长：284nm。
结果陈皮中橙皮苷在0.2403～1.1214μg·ml-1 范围内呈线性关系（r=1.0000,n=6），平均加样回收率为98.08 % rsd为0.68 % （n=9）。
结论该方法操作简便，结果可靠，可用于藿香正气片的含量测定。
【关键词】高效液相色谱法；藿香正气片；陈皮；橙皮苷。
determination the contents of pericarpium citri reticulatae in huoxiangzhengqi pian by hplc
wang qunwang xiu-yue
(1.department of pharmacy, the first affiliated hospital of bengbu medical college, bengbu) anhui,233004 china；（2.fuyang institute for drug control ,fuyang ,anhui 236015, china )
【abstract】objective to establish a quality control methed of pericarpium citri reticulatae in huoxiangzhengqi
pian.methods the hplc was adopted ,the separation was performed on a kromasil c18 column
(4.6mm*250mm,5?m);acetonitrile and 0.05 mol·l-1乙腈sodium dihydrogen phosphate(adjust ph to 3.0 with phosphoric acid)
（20：80）；as the mobile phase was adopted .the flow rate was 1.0ml·min-1；the column temperature was 30℃；and the uv detection wavelength was284nm.results hesperidin in pericarpium citri reticulatae showed a good linearity at the range of0.2403～1.1214μg·ml-1（r=1.0000,n=6），the average recovery was 98.08 %, rsd=0.68 % （n=9）.conelusion the method is simple ,accurate and applicable .it can be used for the quality control of huoxiang zhengqi pian.
【key words】 hplc ; huoxiangzhengqi pian; pericarpium citri reticulatae;hesperdin
藿香正气片主要有苍术、陈皮、厚朴、白芷、茯苓等十味中药组成[1]，具有解表化湿，理气和中。
用于外感风寒，内伤湿滞，头痛昏重，脘腹胀痛，呕吐泄泻；胃肠型感冒。
收载于中药部颁标准第十五册，其中只有性状描述和厚朴酚和厚朴酚的薄层鉴别及通则检查，为了有效控制藿香正气片的质量，经过资料检索[2～8]以及反复实验探索，本文运用高效液相色谱法对其中陈皮的主要成分橙皮苷进行了定性定量的研究，建立了藿香正气片陈皮中橙皮苷的含量测定的高效液相色谱法。
样品处理简单，结果理想，可以作为藿香正气片质量控制方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器岛津lc-20at高效液相色谱仪，spd-m20a检测器，lcsolution色谱工作站， mettelerab265s（0.01mg）；sartorius
bs124s（0.1mg）
1.2试药橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110721-200512 ）；乙腈为色谱纯，甲醇、磷酸二氢钠、磷酸为分析纯，水为纯化水。
藿香正气片（长春经开药业有限公司，批号：20090604、吉林省跨海生化药业制造公司20090703、20090704 ，规格为0.3g）
2实验方法与结果
2.1色谱条件与图谱色谱柱: kromasil c18柱（4.6mmx250mm，5μm）；检测波长：284nm；流速：1.0ml.min-1；流动相：乙腈
-0.05mol·l-1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节ph值为3.0）（20：80）；柱温：30℃。
橙皮苷在16min左右出峰，阴性无干扰。
图谱如下：
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液精密称取橙皮苷对照品1
3.35mg，置于100ml
量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml置25ml
量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。
2.2.2供试品溶液取本品，研细混匀，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声60分钟使溶解，放冷，再称定重量，，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm
的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
2.3线性关系考察精密量取对照品储备液15、30、40、50、60、70 μl，按上述色谱条件，记录色谱图，测定峰面积。
以橙皮苷面
积为纵坐标，橙皮苷进样量为横坐标（ug），得回归方程：
y=1632499.0926x-2756.2330，相关系数 r=1.0000（n=6） ,结果表明橙皮苷在0.2403～1.1214μg·ml-1 范围内呈线性关系。
2.4精密度试验取供试品溶液5μl，连续进样5次，记录色谱图，计算峰面积。
峰面积分别为1546669、1559522、1568014、1566708、1563722，平均面积为1560927，rsd%=0.56%
2.5稳定性试验取供试品溶液，在0、0.5、1、2、4、6、8、12h 分别进样测试，记录色谱图。
结果供试品溶液在12小时内稳定性良好，峰面积的rsd为0.43%。
2.6回收试验取同一批藿香正气片（长春经开药业有限公司，批号：20090604）研细混匀后，取约0.5g9份，精密称定，置具塞锥形瓶中，按低、中、高三浓度分别精密加入对照品储备液 4.00、5.00、6.00ml 照含量测定项下的方法制备，加入甲醇，称定重量，超声60分钟使溶解，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
按上述色谱条件进样测定，用回归方程计算回收率。
表1 回收率试验结果
2.7样品含量测定取本品，研细混匀，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声60分钟使溶解，放冷，再称定重量，，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm
的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
表2 样品分析结果
3讨论
参考文献选择甲醇-醋酸-水[3]，乙腈-水—磷酸[4]，乙腈
-0.05mol/l磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节ph值为3.0）（20：80）[2]系统进行考察；通过对图谱峰型，保留时间，分离度，溶剂ph 等综合分析，最终以乙腈-0.05mol/l磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节ph值为3.0）（20：80）最优，作为流动相。
不同产地陈皮药材中橙皮苷含量各不相同，为了保证中药配方成品质量的均一性、稳定性及临床疗效，必须从源头控制药材质量，制定药材入选标准，根据测定结果，选择质优药材入药，才能保证成药的质量。
参考文献
[1] 中药部颁标准第十五册[s] ws3-b-3020-98 ：221
[2] 国家药典委员会.中国药典2005年版一部[s].北京：化学工业出版社，2005：458
[3]孙冬梅，毕晓黎，胥爱丽等hplc测定不同产地陈皮药材中橙皮苷的含量[j]. 中国实验方剂学杂志，2009，15（11）：1-3 [4] 华捷 hplc法测定小儿百部止咳糖浆中橙皮苷和黄芩苷的含量 [j] . 海峡药学?2009，21（6）：83-84
[5] 唐晓如，王小平?.陈皮口腔崩解片中橙皮苷的含量测定[j]. 中国现代中药 2008，10（11）：20-21
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[8]姚庆，陆兔林，毛春琴，等.通关腾药材腾茎皮部和木部中总皂苷及苷b的含量测定[j].安徽医药，2010,14（1）:36-38.
作者简介：王群，主管药师，本科，研究方向：临床药学。