粉
70％甲醇提取
提取液
LH-20 葡聚糖凝胶柱色谱
70％甲醇洗脱
分段收集
二蒽酮苷
蒽醌二葡萄糖苷 蒽醌单糖苷
游离苷元
(sennoside A~D)
分子量由大至小依次洗脱
1
醌类化合物的结构测定
紫外光谱 红外光谱 1H-NMR 13C-NMR MS 衍生物的制备
1
一、紫外光谱
H 7.64 b Jb,c=8.48 Hz H 7.79 a
300 MHz
O OH H 7.28 c
H 7.66 b
OH O 12.01
H 7.82 a
Ja,b=7.51 Hz Ja,c=1.15 Hz Jb,c=8.48 Hz
1
取代基质子
• 甲氧基：3.8~4.2, s, 3H; • 芳香甲基： 2.1~2.5, s, 3H； -CH3: 2.7~2.8; • 羟甲基(-CH2OH)：4.4~4.7 (-CH2)；4.0~6.0 (-OH); • 乙氧甲基(-CH2-O-CH2-CH3)：4.4~5.0, s (-CH2-)；
1
分离方法
（三）蒽醌苷类的分离 常用色谱法。 这类成分水溶性强，分离及精制工
作都较为困难，色谱前用铅盐法或溶剂 法处理，除去大部分杂质，得较纯总苷 后，再进一步用色谱反复分离。
1
分离方法
预处理 ＊溶剂法是用极性较大的有机溶剂如正
丁醇等，从除去游离蒽醌衍生物的水溶液中， 将蒽醌苷萃取出来，再作进一步分离。
OH O 11.83
H 6.92 (s)
Ja,b=7.56 Hz Ja,c=1.19 Hz Jb,c=8.44 Hz
1
300 MHz
8.07 OH
7.67 H
AA'BB'
O
400 MHz
8.30 O 7.79
O
OH H 7.26
H OH 12.81
1
300 MHz
OH O O
11.98 OH
H 7.26 c Ja,b=7.51 Hz Ja,c=1.15 Hz
醌类化合物的提取分离及结构测定
四、醌类化合物的提取和分离
OH O
OMe OMe
萱草根乙醇提取浓缩液 乙醚
CH3 O
A
OH O OMe OH
CH3 O
B
OH O OH
残 渣 (蒽 苷 类 )
乙 醚 液 (游 离 蒽 醌 苷 元 )
乙醚层
5% NaHCO3 萃 取
水溶液
5 % N a 2C O 3 萃 取
O H 6.72 (s)
O H 6.95 (s)
O
O 3.89 (s) OCH3
H O 6.17(s)
O OH
H O 6.37(s)
O
OO OCCH3
H O 6.76(s)
O 2.13 (s) CH3
H O 6.79(s)
1
OO CCH3
H O 7.06(s)
芳环质子
AA'BB'
8.06 (m) O 7.73 (m)
HCl 酸 化
水溶液
乙醚液
橙红色沉淀
酸化
1% NaOH 萃 取
EtOH-Py 重 结 晶
黄色沉淀
浅黄色沉淀沉淀
（决明蒽醌）
CH3
OC
B 乙醚液
OH O OH
浓缩
（大黄酸）
NaOH 液
D
酸化
金黄色结晶
O
D
COOH
橙黄色结晶
乙醚液
（决明蒽醌甲醚）
1A
（ 含 β -谷 甾 醇 ）
(大 黄 酚 )
C
分离方法
O
O
1675-1647 cm-1
1645-1608cm-1
OH O
O OH
O OH
1
O OH
羰基
1626-1616 cm-1 OH O OH
O 1678-1661 cm-1
1616-1592 cm-1 OH O OH
1592-1572 cm-1 OH O OH
O OH
1
OH O OH
醌环质子
三、1H-NMR
2、羟基蒽醌的酸性差别不大时，采用色 谱方法，可得到彻底分离。
PH梯度萃取法对蒽衍生物进行初步 分离，对性质相似，酸性强弱相差不大 的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分 后再结合色谱法进一步分离。
多用硅胶为吸附剂，有时也用聚酰 胺，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝， 因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合 物，难以洗脱。
羟基蒽醌
羟基蒽醌有五个主要吸收带:
第Ⅰ峰：230 nm左右，与-OH有关，对推断母核上酚羟基的数目很有 意义，一般来说，酚-OH越多，红移越多。
第Ⅱ峰：240~260 nm, 由苯样结构引起。 第Ⅲ峰：262~295 nm, 由醌样结构引起，与-酚OH有关。 第Ⅳ峰：305~389 nm, 由苯样结构引起，与苯环上供电基取代有关。
醌类化合物由于存在较长的共轭体系，在紫外区域均 出现较强的紫外吸收；
苯醌
萘醌
O
O
257 nm
240 nm 强 285 nm 中强 400 nm 弱
O
1
O
245 nm 251 nm 335 nm
蒽醌
O
O
苯样结构： 第Ⅱ峰 252 nm 第Ⅳ峰 325 nm
1
O
O
醌样结构： 第Ⅲ峰 272 nm 第Ⅴ峰 405 nm
7.73 (m) 8.06 (m) O
6.95 (s) H
H 6.95 (s)
90 MHz 300 MHz
300 MHz
7.41 (d) O H3C
7.08 (d)
OH O 11.17
6.91 (s) H
H 6.91 (s)
a 7.58 (m) O b 7.60 (m)
6.92 (s) H
c 7.24 (m)
1
分离方法
（二）蒽醌苷类与蒽醌衍生物苷元的分离 根据其极性差别较大，在有机溶剂中的溶
解度不同进行分离。 ◆苷元—极性小，难溶于水，易溶于乙醚、氯 仿等有机溶剂。 ◆苷—极性大，溶于水，难溶于乙醚、氯仿等 有机溶剂。
注意点：一般羟基及羧基蒽醌类衍生物及其 相应的苷类在植物体内常以盐的形式存在， 为充分提取出蒽醌类衍生物，提取时应先将 其酸化成游离状态，再提取。
3.6~3.8, q (-CH2-)；1.3~1.4, t (-CH3); -酚OH位于较低场， 12.25；两个-OH与同一个羰基 成氢键时， 11.6~12.1； -酚OH在较高场，邻位无取代时， 11.1~11.4; 邻位 有取代时， <10.9;
1
四、13C NMR
1,4-萘醌类化合物
醌环上取代基的影响：羟基、烃基取代；
-位-CH3, -OCH3, -OH 取代，峰位红移，强度降低。-位-CH3, -OCH3, -OH取代，强度增加。 第Ⅴ峰：> 400 nm，由醌样结构中的羰基引起，与 -酚OH 有关， 酚OH 越多，红移越多。
1
羰基
二、红外光谱
1678-1653 cm-1 O
1637-1621 cm-1 OH O