间接凝集反应
将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当 大小颗粒性载体的表面，然后与相应抗 体（或抗原）作用，在适宜的电解质存 在的条件下，出现特异性凝集的现象称 间接凝集反应（indirectagglutination） 或被动凝集反应（assiveagglutination） 。
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ELISA—双抗体夹心法
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ELISA—双抗体夹心法
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ELISA—双抗原夹心法
用特异性抗原进行包被和制备酶结 合物，以检测相应的抗体。 抗HBs的检测 抗HCV的检测 抗HIV的检测
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酶联免疫吸附剂试验
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酶联免疫吸附试验
双抗体夹心法 双抗原夹心法 间接法 竞争法 捕获法测 IgM 抗体
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ELISA—双抗体夹心法
用特异性抗体进行包被和制备酶标 抗体，以检测相应的抗原。
乙肝标志物中HBsAg、 HBeAg的检 测常采用本法
所用载体为人工合成的惰性明胶颗 粒 梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA） 肺炎支原体抗体检测（MP-Ab）
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正向间接凝集反应 —TPPA试验
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正向间接凝集反应 —TPPA试验
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正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
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凝集反应(agglutination)
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的 抗体，或可溶性抗原(亦可用抗体)吸 附于与免疫无关的载体形成致敏颗 粒与相应的抗体(或抗原)，在有适量 电解质存在下，形成肉眼可见的凝 集小块。
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凝集反应的分类
间接凝集反应
常用的载体微球有人O型血红细胞、绵羊 或家兔红细胞、聚苯乙烯乳胶、活性炭/ 甲苯胺红、明胶颗粒等
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间接凝集反应
正向间接凝集反应 反向间接凝集反应
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正向间接凝集反应
用抗原致敏载体以检测标本中的相 应抗体
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直接凝集反应 间接凝集反应 抗人球蛋白试验（Coombs试验）
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直接凝集反应
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的 抗体在有适量电解质存在下，形成 肉眼可见的凝集小块。 常见的应用是血型的鉴定
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血型鉴定示意图
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血浆反应素试验(RPR) 所用载体颗粒为活性炭颗粒
甲苯胺红不加热血清反应素试验 （TRUST）
所用载体颗粒为甲苯胺红颗粒
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正向间接凝集反应 —RPR试验
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正向间接凝集反应 —TRUST试验
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正向间接凝集反应 —明胶颗粒凝集试验
正向间接凝集反应 —胶凝集试验
所用载体颗粒为羧化的聚苯乙烯胶乳， 是一种直径约为0.8μm大小的圆形颗粒， 带有负电荷，可物理性吸附蛋白分子。
将溶血素O 吸附在羧化的聚苯乙烯胶乳 颗粒上检测抗”O”。 将变性IgG包被于羧化的聚苯乙烯胶乳颗 粒上检测RF。
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正向间接凝集反应 —RPR/TRUST试验
直接Coombs试验
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间接Coombs试验
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凝集反应总结
一、直接凝集反应 血型鉴定 二、间接凝集反应
胶乳凝集试验 ASO/RF 1正向间接凝集反应 RPP/TRUST
明胶颗粒凝集 TPPA/MP 2反向间接凝集反应 三、抗人球蛋白试验 直接/间接Coombs试验
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酶联免疫吸附试验 （ELISA）
① 使抗原或抗体结合到某种固相载体表 面，并保持其免疫活性。
② 使抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或 抗体，且既保留其免疫活性又保留酶的 活性。
③ 标本中的抗原或抗体、酶标抗原或抗 体按一定的次序与固相载体表面的抗体 或抗原反应，并通过底物与酶的反应来 反映标本中的抗原或抗体的量。
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正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
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正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
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正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
检测肺炎支原体的总抗体（IgM, IgA IgG) 以滴度的方式报告检测结果（<1:80 1:80、1：160、1:320 ……)
ELISA—双抗原夹心法
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ELISA—竞争法
标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争 与固相抗原结合。如受检标本中无抗体 ，则酶标抗体能顺利地与固相抗原结合 。加入酶标抗原后就显色深。如受检标 本中含有抗体，则与酶标抗体以同样的 机会与固相抗原结合，竞争性地占去了 酶标抗体与固相抗原结合的机会，使酶 标抗原与固相载体的结合量减少。加入 酶标抗原后就显色浅或不显色。
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反向间接凝集反应
用已知特异性抗体致敏载体以检测 标本中的相应抗原。
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抗人球蛋白试验 （Coombs试验）
抗人球蛋白抗体参与的间接血凝试 验，用于检测抗红细胞不完全抗体 分类：
直接Coombs试验 间接Coombs试验
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免疫学检测方法是应用免疫学理论 设计的一系列测定抗原、抗体、补 体、细胞因子等免疫相关物质及微 量物质如激素、酶、血浆微量蛋白 、血液药物浓度、微量元素、毒品 等试验方法。
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这些方法所具有的特异性好、敏感 性高、简单、快速和稳定的特点为 临床上确定诊断、分析病情、调整 治疗方案和判断预后等提供有效的 实验依据，使它们在临床的应用进 一步普及和推广。