病力有较 大差 异 ］ 。龚龙 英等研究 指出 ， 不 同接种方 法对烟 草黑胫病 菌致病力测定有一定 的影响 ， 甚至会 产生较大差异 ， 但未作系统研 究 ］ 。本试 验就 影 响烟草 黑胫病 菌致 病力 的 主要 因子及其互作效应进 行研究 ， 以期 为今后致 病力 分化测
定方法的选择 、 寄主植物抗病 性的鉴定 以及烟 草黑胫病 的综
江苏农业科学
２ ０ １ ３年第 ４ １卷第 １ ２期
马国胜 ， 高智谋． 烟 草黑胫病菌致病力 的影响 因子及其互作效应［ Ｊ ］ ．江苏农 业科 学， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ １ ２ ） ： ｌ ｌ １ —１ １ ３
烟草黑胫病 菌致病 力 的影 响 因子及其互作效应
马 国胜 ，高智谋
Ｂ ｒ ｅ ｄ ａ ｄ ｅ Ｈ ａ ａ ｎ ） 引起 的烟草主要病害之一 ， 可 以危害所有栽培 烟草 ， 烟株一旦发病 ， 往往都是整株死亡 ， 严重影响烟草生产 ， 是烟草病害 的攻 克难题 之 一 ， 在 中国各 烟 区广 泛发 生 。 我国过去在进 行抗 黑胫 病品种鉴 定 中， 发现不 同地 区菌株致
１ ． ３ 培 养基 （ 液） 的配制
１ ． ３ ．１ Ｌ Ｂ Ａ 培 养 基 取 ６ ０ ｇ利 马 豆 粉 加 入 去 离 子 水 １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ， ６ ０ ｏ Ｃ恒温水浴加热 １ ｈ ， 用 ４层纱布过滤 ， 取滤液 ， 用去离子水定容至 １ ０ ０ ０ ｍＬ ， 加入琼脂 ２ ０ ｇ ， 在微波炉 内加热
得到有大量孢子的孢子悬 浮液 。取样镜 检测定其浓 度 ， 并将
密度 ２ １万 一 ２ ２ ． ５万￣． ／ ｈ ｍ 。条播时行距 ４ ０ ｃ ｍ 为宜 。
态环境 与植物保护 。Ｅ—ｍａ ｉ ｌ ： ｇ ｏ ｓ ｈ ｉ ｎ ｅ ｍ ａ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ。 ｒ
１ ． ４ ． １ 游动孢子悬浮液灌根接种
供试 菌株 在 Ｌ Ｂ Ａ平板 上
２ ５℃暗培养 ３ ｄ ， 从菌落边 缘切取 １ ０块大小 约 ２ ｍｍ ｘ ２ ａ ｒ ｉ ｎ
１ ． ２ 供 试 寄 主、 Ｎ Ｃ ８ ９ 、 红大 ， 均 由安徽 省农 业科 学 院烟草科学研究所提供 。将种子装在布袋内， 催芽至露 白 ， 然 后播入盛有灭菌土壤的盆钵 中进行培 养 ， 待 烟苗长至 ３张真 叶时移栽到底部打孔的塑料杯内 （ ２孑 Ｌ ／ 杯） ， 每天早 晚各浇水 １次 ， 每周用 Ｈ ｏ ａ ｇ ｌ ａ ｎ ｄ完全营养液喷 １ 次 。待 烟苗长至 ７～ ８ 张叶时 ， 供接种用 。
合防治等相关研究提供参考 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 供 试 菌 株
至琼脂完全熔化 ， 趁热分装 ， １ ２ １℃灭菌 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 。
１ ． ３ ． ２ １ ０ ％Ｖ Ｃ培养液 灭菌 ２ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 待用 。
１ ． ４ 接 种 方 法
参照 马国胜等方法 配制 ， １ ２ １℃
（ １ ． 安徽农业大学植物保护学院 ， 安徽合肥 ２ ３ ０ ０ ３ ６ ； ２ ． 苏州农 业职业技术 学院生态环境 系， 江苏苏州 ２ １ ５ ０ ０ ８ ）
摘要 ： 采用 ３因素随机 区组 设计方法研究接种方法 、 烟草 品种 、 菌种 ３种 因子对烟 草黑胫病 菌致病力 的影 响。结 果表明 ： 各 因子对 烟草 黑胫 病菌致病力 的影响依次 为接 种方法 ＞烟草 品种 ＞菌种 ， 不 同接种方法接种后 的病斑长度依 次为菌丝块茎基部创伤接种 ＞ 游 动孢子悬浮液灌根接种 ＞ 菌 丝块茎基 部不创 伤接种 ， 不 同烟草品种接种后 的病斑 长 度依次为红大 ＞Ｇ １ ４ ０＞Ｎ Ｃ ８ ９ ， 接种不 同菌株后 的病斑 长度依次为 Ｂ Ｚ一 ８＞Ｆ Ｙ一１ ０＞Ｓ Ｘ一 ３ ； 接种方法 与烟草 品种 间的 互 作效应达到 了显著水平 ， 其他因子互作效应均未 达到显著水平 。 关键词 ： 烟草 黑胫 病菌 ； 致病力 ； 接种方法 ； 烟草品种 ； 菌株
供试 烟草疫霉 菌菌株 为 Ｂ Ｚ一８ 、 Ｆ Ｙ一１ ０ 、 Ｓ Ｘ一３ ， 保存 于
安徽农业 大学植物病原真 菌研究室 ， 均分 离 自烟 草新鲜病 组
织， 分别来 自皖北烟区的安徽省亳州市 、 江淮烟区的安徽省风 阳县 、 皖南烟区的安徽 省歙县。
收稿 日 期： ２ ０ １ ３ — ０ ９一 ｏ ３ 基金项 目： 国家公益性行 业 （ 农业 ） 科 研专项 （ 编号 ： ３—２ ０） ； 江苏 省 高校哲学社会科学研究基金 （ 编号 ： ２ ０ １ １ Ｓ Ｊ Ｂ ７ ９ ０ ０ ２ ３ ） 。 作者简介 ： 马国胜 （ １ ９ ７ ４ 一） ， 男， 安徽 定远人 ， 副教授 ， 研究 方 向为生
的菌丝块 ， 移人盛有 ２ ０ ｍＬ １ ０ ％ Ｖ Ｃ培养液 、 直径 ９ ｏ ｍ 的培
养皿 中， ２ ５℃暗培养 ３ ｄ ， 用灭菌镊子把菌丝丛转移到另一 无 菌培养皿 中 ， 加入 灭 菌 水 ２ ０ ｍＬ ， 并 加 入 ４滴 土 壤 浸 出液 ， ２ ５℃ 光 照培养 ， 每１ ２ ｈ 换１ 次灭菌水 ， 并同时加入 ４滴土壤 浸出液 ， 直 至孢子囊大量形成 。待大量孢子囊产生后 ， 将培养 皿置于 ４℃冰箱 中 １ ５ ｍ ｉ ｎ ， 取出置于 ２ ５℃温度下 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 即
中图分类号 ： ￥ ４ ３ ５ ． ７ ２ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） １ ２一 Ｏ １ １ １— ０ ３
烟 草 黑 胫病 是 由烟 草 疫霉 菌 （ Ｐ ｈ ｏ ｐ ｈ ｔ ｈ ｏ ｒ ａ ｎ ｉ ｃ ｏ ｔ ｉ ａ ｎ ａ ｅ