游泳水中尿素测定方法
二乙酰一肟分光光度法
1、原理
尿素与二乙酰一肟及安替比林反应呈黄色，在波长460nm处有最大吸收峰。

2、仪器
2.1 25ml棕色具塞比色管
2.2水浴
2.3分光光度计
3、试剂
3.1 0.2%二乙酰一肟溶液：称取0.2g二乙酰一肟[CH3COC：（NOH）CH3]溶于10%乙酸中，并稀释至100ml，保存于棕色瓶备用。

3.2 0.2%安替比林溶液：称取0.2g安替比林（1，5-二甲基-2-苯-3-吡唑酮C6H5NN（CH3）C（CH3）：CHC：O），溶于1+1硫酸中并用混酸稀释至100ml，棕色瓶中保存。

（注：硫酸浓度大于1+1时，显色缓慢且操作不便。

）
3.3尿素标准溶液：准确称取0.1000g尿素于小烧杯中，加少量纯水溶解后转入1000ml容量瓶中，加0.1ml氯仿并用纯水定容，此液每ml含0.1mg尿素。

冷藏保存。

3.4尿素标准使用溶液，准确吸取尿素标准储备溶液10.00ml于100ml容量瓶中，用纯水定容，此液每ml含0.01mg尿素。

4、分析步骤
4.1吸取水样10ml（尿素含量在0.001～0.015mg范围内）于25ml棕色具塞度管中，另取棕色具塞度管加入尿素标准使用液0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5ml，并用纯水稀释至25ml。

（注：显色后溶液遇光退色，帮需用标色法）。

4.2于上述各管加入1.0ml二乙酰一肟溶液，混均。

再加安替比林溶液2.0ml，混匀。

4.3将上述试管在沸水浴中加热50min。

取出并在流动的自来水中冷却2min。

立即以纯水为对照，在460nm处，用1cm比色皿，测定各管吸光值（加热45～55min，呈最深色，若再延长时间吸光值下降）。

4.4以浓度对照吸光值，制备标准曲线。

以水样吸光值从曲线上查出尿素含量。

5、计算
C=M/V1000
C――水样中尿素浓度mg/L；
M――从曲线上查得的尿素含量，g；
V――水样体积，ml。

作者：管理员
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