尿素的测定方法可分为两大类：一类直接法，尿素直接和某试剂作用，测定其产
物，最常见的为二乙酰一肟法；另一类是尿素酶法，用尿 素酶将尿素变成氨，
然后用不同的方法测定氨。 1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利用尿素酶催
化尿素水解生成铵盐，铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联
反 应显色。 尿素测定目前多采用尿素酶偶联法：用尿素酶分解尿素产生氨，
氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时，通过34 0nm吸光度的降
低值可计算出尿素含量。 此反应是目前自动生化分析仪上常用的测定原理。
此外，尿素酶水解尿素产生氨的速率，也可用电导的方法进行测定，其电导的增
加 与氨离子浓度有关，反应只需要很短的时间，适用于自动分析仪。 2）酚
-
次氯酸盐显色法：尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸盐，在碱性环境中作用

形成对-醌氯亚胺，亚硝基铁氰化钠催化此反 应： 对-醌氯亚胺同另一分子
的酚作用，形成吲哚酚，它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚： 此反应
敏感，血清用量少（10μl），无需蛋白沉淀，一般用于手工操作测定中。
3)
纳氏试剂显色法：尿素经尿素酶作用后生成氨，氨可与纳氏试剂（HgI2.2KI的
强碱溶液）作用，生成棕黄色的碘化双汞铵。 尿素酶法的优点是反应专一，
特异性强，不受尿素类似物的影响，缺点是操作费时，且受体液中氨的影响。
⑵
二乙酰一肟法（直接法）：尿素可与二乙酰作用，在强酸加热的条件下，生成

粉红色的二嗪化合物（Fearom反应），在54 0nm比色，其颜色强度与尿素含量
成正比。二乙酰不稳定，用二乙酰一肟代替，后者遇酸水解成二乙酰。 试
剂中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲，可提高灵敏度，增加显色稳定性，其中
Fe3+
和Cd2+有氧化作用，还能消除羟胺的 干扰作用。提高酸的浓度可增加灵敏度。
二乙酰一肟与尿素的反应不是专一的，与瓜氨酸也有显色。本法灵敏、简单，产
生的颜色稳定， 缺点是加热时有异味释放，一般临床已很少使用此方法。 尿
素测定用血清或血浆，体液中尿素的浓度常用尿素中含有的氮来表示，称为尿素
氮。如欲换算成尿素，可根据60g 尿素含有28g氮计算，即1g尿素相当于
0.467g
尿素氮，或是1g尿素氮相当于2.14g尿素。 正常参考值：血清尿素氮为
2.8-7.1mmol/L，相当于尿素1.8-6.8mmol/L。