艾滋病实验室检查优秀课件
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鉴别诊断
原发性CD4+淋巴细胞减少症
无HIV感染流行病学资料,HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。
继发性CD4+淋巴细胞减少
肿瘤和自生免疫性疾病(autoimmune disease)化疗或免 疫抑制治疗后。
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预后
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影响预后的因素
➢ 感染的HIV型别及亚型:
HIV-1较HIV-2临床进展快
症;9.深部真菌感染,马尔尼非青霉菌;10.肺孢子
虫肺炎;11.活动性巨细胞病毒感染;12.弓形虫脑病。
13.反复发生、难治性肺部感染或占位性病变或中、
青年痴呆症;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。
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诊断标准
★HIV抗体阳性
CD4+T淋巴细胞数<200/mm3 无上述表现或症状
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分子生物学检测(3)
HIV变异株检测——Sanger测序法
原理:核酸扩增时,核苷酸在 某一固定点开始,随机在某一 特定的碱基处终止,产生A、T、 C、G四组不同长度的一系列核 苷酸,通过在尿素变性的PAGE 胶上电泳,获得DNA序列
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病毒检测
血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂,主要用于科研
试验)
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血清学检测(3)
HIV抗原检测——ELISA夹心法
测定p24抗原 敏感性很高(7~10 pg/ml) 特异性稍差(可有假阳性)
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分子生物学检测(1)
HIV RNA检测—RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)
核酸定量技术原理
PCR:高温变性(94℃)→低温退火 (55℃)→适温延伸(72℃);经25~30 个循环,成倍数扩增
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诊
断
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诊断原则
➢ 流行病学史:有静脉注射毒品史;多个性伴和不洁性生活
史;输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史;HIV抗体阳 性所生的子女;其它(如职业暴露或医源性感染史)。
➢ 临床表现:
高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现, 颈、腋及 枕部淋巴结肿大,肝脾肿大,可考虑急性HIV感染。
无症状期、艾滋病期临床表现。
➢ 实 验 室 检 查 : ① HIV 抗 体 阳 性 , 并 经 确 证 试 验 确 认 。 ②
CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIV RNA和P24抗原的检测 有助于早期诊断新生儿的HIV感染。
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诊断标准
急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳 性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性
艾滋病实验室检查优秀课件
实验室检查
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免疫学检测
AIDS患者
正常 (×109/L)
R2
CD4
<0.2 1(0.8~1.2)
CD4/CD8
<1
1.2~2.1
M1
淋巴细胞总 数
<1
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流式细胞仪测定
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血清学检测(1)
HIV抗体的初筛试验——ELISA(酶联免
疫试验)
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血清学检测(2)
HIV抗体的确证试验——Western blot (免疫印迹
无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 13
诊断标准
艾滋病期
★ 流行病学史,HIV抗体阳性,临床表现有下列
一项或以上:
1.短期(6个月内)体重下降10%以上;2.咳嗽或腹泻 超过4周;3.持续或间歇发 热超过4周;4.全身淋巴结
肿大;5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染;6.口
咽念珠菌病;7.全身搔痒性皮炎;8.反复发生的败血
荧光定量PCR:比常规PCR多一个寡聚 核苷酸探针(带一个荧光发光分子 和一个荧光淬灭分子)
应用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR 查血浆中的病毒RNA
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分子生物学检测(2)
淋巴细胞HIV RNA检测——
Northern印迹杂交(Northern blot)
原理: RNA片段经电泳分 离,从凝胶中转移到硝酸 纤维素滤膜,再用探针杂 交
➢ 并发的机会性感染:
同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高; 合并丙型肝炎者预后差
➢ 抗逆转录病毒治疗:
治疗改变了艾滋病进程
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