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温泉县部分奶牛的新孢子虫病和布氏杆菌病血清学调查

2实验方法 2.1 新孢子虫病rELISA检测f应用农大巴音查汗 等课题组研制的试剂盒) 2.1.1 检测试剂 lOmmol PBS(pH 7.4);抗原包被液:0.05tool/1的 NazCO3一NaHCO3溶液(pH 9.6);洗涤液(PBST溶液 pH 7.4):l 000 mlPBS中加0.5mlTween一20;封闭液: PBST+6%BSA;抗体稀释液:PBST+1%BSA;TMB显 色液。 2.1.2操作步骤省略(参考杨帆[81文献) 2.1.3全自动酶标仪结果分析 微量板加入终止液后立即用全自动酶标仪在 450nm波长处测定OD值,当设立的标准阳性OD 值>0.170、标准阳性OD值<0.120时,说明实验数据 可靠,可用于判定样品的阴阳性结果。 结果判定:OD值>0.170的血清样品为阳性;0D 值<0.120的血清样品为阴性;0.121≤OD≤0.170时 判定为阳性町疑,需重新检测。 将微量板置于白色背景』一,直接用肉眼观察结 果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为 无色或极浅。 2.2布鲁氏菌病诊断一虎红平板试验和试管凝集试 验(按照国标检测) 3结果与分析 按照不同条件分析博州温泉县地区流产奶牛血 清新孢子虫和布氏杆菌抗体的检测结果。 3.1 新孢子虫病rELISA检测结果 应用新孢子虫重组抗原对8l份血清样进行 ELISA检测,被检81份血清样品中8份血清新孢子 虫抗体呈阳性,被检奶牛的血清抗体阳性率为 9.88%。其中,安格里格乡16份样品中3份阳性,阳 性率为18.75%;哈13布呼镇28份样品中2份阳性, 阳性率为7.14%;蒙进14份样品中0份阳性,阳性 率为0%;塔秀乡23份样品中3份阳性,阳性率为 13.4%。根据采样地点与采样血清数的差异,得出在 不同的地区新孢子虫病的感染率不同,新孢子虫引 起的流产呈散发性和地方性流行,详见表1。 表1 温泉县4个不同地区的81份血清样分别进行新孢子虫病和布氏杆菌病检测 

3.2布氏杆菌病检测结果 俭出布氏杆菌抗体阳性0份,布氏杆菌病检测 结果全部为阴性。 3.3分析和讨论 3.3.1 据报道,虽然没有调查过温泉县的奶牛新孢 子虫病和布氏杆菌病的感染情况,但是杨帆等对博 乐市周边的奶牛场进行过新孢子虫和布氏杆菌病 的流行病学调查,即:2010年奶牛新孢子虫病的感 染率为25%_7J,此次研究所得结果却小于25%,分析 原因可能有…下几点:采样地点的不同,新孢子虫 病不同的区域感染率不同;本次所采的样不全是有 流产史的奶牛,故新孢子虫感染率降低;感染率降 低也可说明当地的兽医工作者尽职尽责,加强防疫 工作,科学管理,降低r新孢子虫的感染率。 3.3_2新孢子虫是一种拥有J一泛宿主的有核细胞 寄生虫。新孢子虫的生活史有3个典型的感染阶 段:速殖子、组织包囊和卯囊。通过摄入感染有速殖 子或组织包囊的组织或食入被孢子囊污染的食物 和水进行发生传播,卵囊发现于犬粪便中,家畜与 犬生活在同一个环境中(因为终末宿主是犬科动 物),家畜感染新孢子虫的概率越大。新疆大多数养 牛的地区都养有牧犬,故成为该病传播的一个条 件。 3.3.3布氏杆菌病是全世界范围重要的动物源性 人畜共患传染病,1994年赵辉 等应用试管凝集试 验检测博州绵羊血清布氏杆菌平均阳性率为 9.69%。据调查,新疆各地州畜牧t作者每年都会进 行该病的检测,并在疫病可能发生前期接注疫苗, 此次检测样品为布氏杆菌抗体阴性,与畜牧工作者 加强该病的检测有关。

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