酸的分类
• 根据有机酸的物理化 学性质： 易挥发性酸
不挥发性酸
• 举例
C1一C6的小分子酸 C7 ～C12 的饱和脂肪酸不 饱和脂肪酸、苯环酸等
热不稳定性酸
琥珀酸、草酸、柠檬酸、 苹果酸等多元酸
测定方法：
一、易挥 发性酸的 测定方法
1.1、直接进样法 1.2、酯化处理间接进样法 以上为气相色谱法
测定条件
分析柱：AS11-HC+AG11-HC（4mm）阴离子 分析柱和保护柱 进样体积：10ul • 淋洗液流速：1.5ml/min • 检测器温度：30℃ 洗淋液 E1 去离子水 • 压力：2200psi E2 5mM NaOH （15.15Mpa） E3 10mM NaOH
E4 100% 甲醇
1.3、顶空一固相微萃取 (HS—SPME)法
易挥发性酸的测定以 气相色谱居多。由于 它们挥发性较强，为 保证定量的准确性， 一般不进行前处理。
测定方法
二、不挥 发性酸的 测定
2.1旋蒸浓缩一直接进样法 2.2固相萃取(SPE)法 2.3衍生法 2.4比色法
由于它们沸点较高不 易挥发，可以通过前 处理浓缩富集测定
己酸
30~50
Y=0.010x+0.020
3.63
99.9734
注：y-测定峰面积
x-浓度
结果表明乳酸、乙酸、丁酸、己酸的线性关系良好
• 4 样品测定 有机酸定性根据保留时间对照标准样品 确定有机酸的出峰顺序为乳酸、乙酸、 丁酸、己酸。 定量采用标准曲线法 根据样品的峰面 积，通过标准曲线得出各种有机酸的浓度。
淋洗液配制
称50g优级醇NaOH加50ml去离子水定溶100ml； 吸取0.26ml饱和NaOH定溶至1000ml，配制成 5mMNaOH。 吸取5.23 ml饱和NaOH定溶至1000ml，配制成 100mMNaOH。
淋洗液梯度
• 时间（min） • 平衡 • -7.0 0 • 分析 • 0 • 8.0 • 18.0 • 28.0 • 29.0 • 45 %E1 80 80 80 80 85 70 40 40 %E2 20 20 20 20 0 0 0 0 %E3 0 %E4 0 0 0 0 0 0 0 0 备注 5mMNaOH平衡7分钟
白酒中酸的测定方法
• • •
李建兵 生工10级4班 学号 ： 100604012
白酒中酸的测定方法
• 白酒中的酸：乙酸、乳酸、丁酸、己酸和高级
脂肪酸等有机酸类
• 存在形式:大部分以游离状态存在，小部分以盐
类形式存在
• 总酸计算形式：计算白酒总酸时，以有机酸为
主，折算为乙酸的含量
• 酸类影响白酒的口感和后味，是影响口味的主要 因素，酸不足是造成后味寡淡的主要原因。
测定方法
三、热不稳 定酸的测定
3.1酶法 3.2高效液相色谱法(HPLC)
3.3毛细管电泳法 3.4气相色谱-质谱联用
离子色谱法
优点：离子色谱法同时测定蒸馏白酒中七 种有机酸，具有简便快捷、灵敏度高、干扰少 等优点。目前气相色谱法通过运用白酒专用大 口径毛细管柱能定量测定的白酒中的主要酸有 乙酸，已酸和丁酸，而含量较多的乳酸却测不 出来。在阴离子交换为主要分离机理的色谱柱 AS11-HC上醇类可以与有机酸较好实现分离 机理：白酒样品经超纯水稀释后可直接进样检测， 待测的甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸 和乳酸在阴离子交换机理为主的分析柱上分离， 再经抑制型电导检测器直接检测。
0 0 15 30 60 60
进样 等度梯度
CD_1.AcqOff
操作步骤
• 1、样品预处理 白酒溶液清洁后用0.22um水相过滤头过 滤，直接进样（10ul） • 2、标准样的制备 将无水乙醇用去离子水稀释至50%vol待用 按一定浓度配置酸的混合酸标样 用50%vol的乙醇溶液定溶到100ml容量瓶中
四种有机酸的线性方程、相关系数 和相对标准偏差
项目名称 浓度范围 Mg/100ml 回归方程 RSD/%
r
99.9755
99.9257 99.9211
乳酸
乙酸 丁酸
15~35
25~45 5~25
Y=0.019x+0.027
Y=0.023x+0.107 Y=0.013x+0.074
1.37
2.54 0.53
各有机酸标准溶液浓度
Байду номын сангаас
样品编号 单位 乳酸 乙酸 丁酸 己酸 mg/100m l 15
1 20 30 10 35
2 25 35 15 40
3 30 40 20 45
4 35 45 25 50
5
mg/100m 25 l mg/100m 5 l mg/100m 30 l
3、标准曲线 分别吸取上述标准溶液，进样分析。以 峰面积为横坐标，质量浓度为纵坐标分别 绘制个有机酸的标准曲线，所测得有机酸 回归方程
阴离子色谱法
主要仪器
ICS3000型高效离子色谱仪（美国Dionex公司），配 有：AS11-HC+AG11-HC（4mm）阴离子分析柱和 保护柱、CD3000-ASRS（4mm）阴离子抑制器、电 导检测器；MILLIPORE超纯水系统， Chromeleon6.8色谱工作站
试剂和样品
• 标准试剂：色谱纯的己酸、乙酸、丁酸、 乳酸试剂 • 溶剂：优级纯的无水乙醇