碳青霉烯酶基因检测
KPC-2 IMP VIM NDM-1
碳青霉烯酶基因检测
DNA 提取 PCR扩增 琼脂糖凝胶电泳 测序
碳青霉烯酶基因检测
14株肺炎克雷伯菌 4株大肠埃希菌 2株阴沟肠杆菌 1株产气肠杆菌
碳青霉烯酶基因检测结果
13株肺炎克雷伯菌都携带KPC-2基因 （6株同时含有VIM基因，2株同时含 有IMP基因），2株大肠埃希菌携带 KPC-2基因，2株阴沟杆菌携带NDM1和KPC-2基因，其余4株未检测到上 述耐药基因
产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失
大肠埃希菌 OmpC OmpF
肺炎克雷伯菌 OmpK35 OmpK36和OmpK37
产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失
外膜蛋白缺失仅仅使碳青霉烯类 药物的MIC升高，一般并不能达到 耐药折点，但合并产酶的情况就能 对碳青霉烯类产生高水平耐药
外排泵
敏感和耐药的菌株中均存在外排泵 基因，但只有当外排泵诱导表达增加 时才会产生耐药
≥16 ≥16
8
≥8
KPC-2
≥8
KPC-2，NDM-1
≥8
KPC-2，NDM-1
eae941
4
≥8
-
THANK YOU FOR YOUR ATTENTION
三、碳青霉烯酶基因检测
收集菌株
2011年3月-2012年4月我院临床标本 分离的碳青霉烯类抗生素耐药或敏感性 降低（K-B法）肠杆菌科细菌
收集菌株
菌株使用Vitek 2 Compact鉴定菌种 并测定厄他培南和亚胺培南的MIC值， 依据2010年CLSI怀疑产碳青霉烯酶 肠杆菌科菌株的初筛试验筛选菌株： 厄他培南MIC≥2ug/ml或 亚胺培南MIC≥2ug/ml
亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值 及耐药基因检测结果
菌株编号 亚胺培南MIC 厄他培南MIC 耐药基因
kpn134 ≥16
≥8
KPC-2
kpn151
8
≥8
KPC-2，VIM
kpn457 ≥16
≥8
-
kpn989
4
≥8
KPC-2
kpn014 ≥16
≥8
KPC-2
kpn297 ≥16
≥8
KPC-2
肠杆菌科细菌 碳青霉烯类药物耐药现状
一、碳青霉烯类药物
所有β-内酰胺类抗生素中 具有最广泛的抗菌活性
碳青霉烯类药物
对超广谱β-内酰胺酶表现出的稳定性 使其一直作为产酶株临床治疗的首选 药物，但随着碳青霉烯类药物的大量 使用，碳青霉烯类药物耐药的肠杆菌 科细菌也不断出现
二、 肠杆菌科细菌对 碳青霉烯类药物的耐药机制
kpn006 ≥16
≥8
KPC-2，VIM
亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值 及耐药基因检测结果
菌株编号 亚胺培南MIC 厄他培南MIC 耐药基因
kpn019
2
4
KPC-2，IMP
kpn315 ≥16
≥8
KPC-2，VIM
kpn326 ≥16
≥8
KPC-2，VIM
kpn648 ≥16
≥8
KPC-2，VIM
kpn677 ≥16
≥8
KPC-2
kpn294 ≥16
≥8
KPC-2，IMP
kpn802 ≥16
≥8
ห้องสมุดไป่ตู้
KPC-2，VIM
亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值 及耐药基因检测结果
菌株编号 亚胺培南MIC 厄他培南MIC 耐药基因
eco961
2
4
-
eco801
8
4
KPC-2
eco358
2
4
-
eco515 ecl 702 ecl 012
产碳青霉烯酶 产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失 外排泵
碳青霉烯酶
水解底物覆盖包括碳青霉烯类在内 几乎所有的β-内酰胺类抗菌药物
碳青霉烯酶
A组 B组 D组
KPC GES IMP VIM NDM-1 OXA
碳青霉烯酶检测
改良 Hodge试验 EDTA抑制试验检测金属酶 碳青霉烯酶基因检测