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动物实验基本操作技术


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二、豚鼠的抓取固定法
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三、家兔的抓取固定法
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第二节 性别鉴定
一、大、小鼠的性别鉴定
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二、兔的性别鉴定
Female
Male
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第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄(大、小情况基本一样)
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动物编号: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字:78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41 组 别:乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 甲 乙 乙 甲 甲 现在以随机数字的奇数代表甲组,偶数代表乙 组,则编号为 3 、 4 、 5 、 7 、 8 、 11 、 12 号分入甲 组,而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字 不等,继续用随机方法将甲组多余的一只调整给 乙组,从上面最后一随机数字41,接下去抄一个 数为62,以7除之(因甲组原分配7只)得6,即把原 分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。
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如果甲组多两个,则接下去抄两个数。分别 以8,7除之,余数即指要调入乙组的第几个甲, 余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后 各组鼠的编号为: 组别 鼠的编号 甲组 3 4 5 7 8 12 乙组 1 2 6 9 10 11
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(二)当分为三组时 例:设有雄性的 SD 大鼠 12 只,按体重大小依次 编为 1 , 2 , 3 , … , 12 号,试用完全随机的方法, 分为A、B、C三组。 分组方法:假设所定的点是随机数字表第 40行17 列的08,则从08开始,自左到右抄12个随机数字: 动物编号: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字:08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除 3 余数: 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 组 别: B C A B C B C C A A C A 调整组别:B
e.腹壁静脉
青蛙、蟾蜍
f.冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅
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2.取中量血
部位 a.后肢外侧皮下小隐静脉 b.前肢内侧皮下头静脉 动物种类 狗、猴、猫 狗、猴、猫
c.耳中央动脉
d.颈静脉

狗、猫、兔
e.心脏
f.断头 g.翼下静脉
豚鼠、大鼠、小鼠
大鼠、小鼠 鸡、鸭、鸽、鹅
h.颈动脉
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第四节 妊娠检查
雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为 了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊 娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况,采用临 床和实验室的方法进行检查,称为妊娠检查,又 称妊娠诊断 (pregnancy diagnosis) 。通过妊娠检查, 可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种,以 保护母体和胎儿的正常发育,避免胎儿早期死亡 和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要 求准确,且及早确诊更为重要。
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随机数字 33 46 9 52 68 7 除 数 6 5 4 3 2 1 余 数 3 1 1 1 2 1 随机排列 C A B D F E 上列第一个随机数字余数为3,意即将6个字母中 列在第三位的字母 C写在该数下,第二个数宇的余 数为1,即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该 数字下面,余此类推。
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2. 根据体重鉴定日龄 ⑴ 小鼠日龄与体重的对应
日龄/d 体重/g 初生 1.8 5 4.0 10 6.0 15 11.0 20 15.0 25 21.0 30 21.0
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三、家兔的采血方法 1.心脏采血 2.耳中央动脉采血 3.耳静脉采血
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四、狗、猫的采血方法 1 .后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧 皮下头静脉采血 2.股动脉采血 3. 心脏采血同大、小鼠心脏采血 4.耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血
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以3除各随机数字,若余数为l,即该鼠归A组;余 数为2,归人B组;余数为3,归入C组。结果A组为4 只, B 组为 3 只, C 组为 5 只。 C 组多一只应调入 B 组。 方法同上。仍采用随机方法;从 10 后面接着抄,为 61。除以5,余数为1,则将第一个C,即第2号鼠调 入B组。调整后各组鼠的编号如下: 组别 鼠的编号 A组 3 9 10 12 B组 l 2 4 6 C组 5 7 8 11 对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致
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第六节 常规采血方法
一、大、小鼠的采血方法 1.颈静脉或颈动脉采血 2.股静脉或股动脉采血 3.心脏采血 4.尾部采血 5.眼眶采血 6.断头取血
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颈静脉或颈动脉采血
尾 部 采 血
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心脏采血
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二、豚鼠的采血方法 1.耳缘剪口采血 2.心脏采血方法同大、小鼠。 3.股动脉采血方法同大、小鼠。 4.后肢背中足静脉采血
第四部分
动物实验基本操作技术
实验动物的抓取与固定 性别鉴定 常规采血方法 年龄的大致判断 给药途径与方法 妊娠检查 麻醉方法 分组与编号 处死方法
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第一节 实验动物的抓取与固定
一、大、小鼠的抓取固定
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小 鼠 固 定 盒 固 定
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大鼠固定盒固定
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⑵ 大鼠日龄与体重的对应 日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g 初生 10 20 30 40
6~7 17~25 35~50 55~90 100~150 50 60 70 80
150~210 170~240 210~270 240~320
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二、豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长,被毛稀疏无光泽, 眼神呆滞,行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白,爪短 软,眼睛圆亮,行动敏捷,被毛有光泽,且紧贴身 体。同样,也可根据体重来推断大致年龄。同日龄 豚鼠,雌性体重略高于雄性。与大鼠一样,其体重 受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时, 必须由卡片记录提供准确年龄。
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五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、 外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天 即开始生出乳齿,2个月以后开始由门齿→犬齿→ 臼齿顺序逐渐更换为恒齿,8~l0个月齿换齐。但 犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品 种犬,可以根据记录,明确了解年龄,而收购的 杂种犬就无法知道确切年龄。实际中,可根据犬 齿更换和磨损情况,估计犬的年龄。
日龄/d 1 3 4 5 外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落 能翻身
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能爬行
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日龄/d 10 9~11
外观形态特征 能听到声音 全身被白毛,门齿长出
13~15
18以后
眼皮张开,能跳跃,能抓取东西
能自行采食,独立生活
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鸡、鸭、鸽、鹅
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3.取大量血
部位 a.股动脉、颈动脉 b.心脏 动物种类 狗、猴、猫、兔 狗、猴、猫、兔
c.颈静脉
d.摘眼球
马、牛、山羊、绵羊
大鼠、小鼠
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4. 最大安全采血量与最小致死采血量 动物种类
小鼠 最大安全采 血量 (ml) 0.2 最小致死采 血量 (ml) 0.3
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妊娠检查方法有
① 外部检查法
② 摸胎法
③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法
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第五节 分组与编号
动物实验之前,必须对实验动物进行随机分组 和编号标记,这是做好实验和实验记录的前提。 一、随机分组 (一) 当分为二组时 例:设有雄性 Wistar 大鼠 12 只,按体重大小依 次编为1,2,3,…,12号,试用完全随机的方法, 分为甲、乙两组。 分组方法:假设所产生的点是随机数字表上第 21行第31 列的78,则从78开始,由上向下抄12 个 随机数字,如下:
大鼠
豚鼠 兔 狼狗 猎狗
1
5 10 100 50
2
10 40 500 200

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第七节 给药途径与方法
在动物实验过程中,应根据不同的实验目的、 动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方 法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两 种,不பைடு நூலகம்方法按给药途径又分为很多具体类型。 注射法分为:皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、 脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注 射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法 可分为:鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、 气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主 要给药途径和方法做一介绍。
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采血方法的选择,决定于实验目的所需血量以及 动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、 血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法 等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时 可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自 远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。 而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐 代谢紊乱,需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳 分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度,必须 采取动脉血液。
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