组织灭活苗的制备过程
1、 病料采集
2、 病料处理
3、 配苗
4、 灭活
一、 材料:脾脏、淋巴结等组织、甲醛、硫柳汞、恒温箱、剪刀、漏斗、镊子、三角烧瓶、烧杯、移液器、匀浆机、纱布
二、 步骤:
1、 无菌处理:去除被膜、大血管、脂肪、筋膜,称重。剪成1平方厘米大小的小块,匀浆。
2、 无菌检验,测定病毒效价
3、 生理盐水4-6倍稀释,搅拌均匀
4、 过滤。纱布4-8层进行过滤,取上清液
5、 灭活剂配制:计算甲醛用量,使甲醛最终浓度达到0.5%。(用甲醛的目的是使蛋白变性)。
6、 缓慢加入甲醛,边加边搅拌。用三角烧瓶盛装。
7、 牛皮纸扎好三角烧瓶,放入恒温箱内,38摄氏度下放置24小时。(病毒苗24小时,细菌苗48小时。)
8、 分装灭菌瓶,每瓶100毫升。
9、 成品检验:要求无菌、达到一定的效价、安全等。
10、 保存:4摄氏度冰箱保存,用时摇匀。
注:若长久保存,需加入硫柳汞(防腐剂)。固体硫柳汞配制成1%浓度的水剂,加入到灭活苗中的终浓度为万分之一;也可加入有治疗作用的双抗(如青链霉素)。