甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒说明书Elecsys Anti-HAVElecsys 2010/MODULAR ANALYTICS E17011820605 100人份【名称】通用名：甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒英文名：Elecsys Anti-HAV汉语拼音：Jia xing gan yan bing du kang ti dian hua xue fa guang jian ce shi ji he【使用目的】用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的甲型肝炎病毒总抗体。

甲型肝炎病毒抗体检测有助于检测过去或现在的甲肝病毒感染，观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010和MODULAR ANALYTICS E170免疫测定分析仪。

【概述】甲肝病毒是一种没有胞膜的RNA病毒。

它属于细小的核糖核酸病毒家族。

至今，仅1种人血清型和7种基因型被记述。

病毒衣壳由三种蛋白 (VP1-VP3) 组成，在病毒颗粒表面形成一个免疫决定簇结构，它被高度表达在所有基因型。

在注射疫苗后或正常感染后这个结构诱发免疫反应1。

甲型肝炎是最普通的急性病毒性肝炎，通过消化道传播。

这种肝炎不会发展成慢性肝炎，病毒也不会持续存在组织中2。

甲型肝炎病毒是引起病毒性肝炎爆发流行的最常见原因(10-20%)3。

甲型肝炎感染发作时总的甲型肝炎抗体呈阳性。

在自然感染后，抗HAV-IgG抗体能够终生存在，如果组织再次感染会对机体起到保护作用4。

现在已经有甲肝病毒疫苗和甲肝和乙肝混合疫苗5。

在注射甲肝疫苗后, 抗HAV-IgG抗体两周后就可以检测到。

在完全免疫过程中，这种保护作用可以持续很多年6。

免疫保护作用对于抗体值没有限定，但是抗HAV浓度在10-20IU/L以上对机体有保护作用。

抗HAV抗体检测用于检查甲型肝炎病毒存在或过去感染过。

同时也用于观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。

【原理】竞争法：总检测时间18分钟。

·第1步孵育：50µl标本；标本中的抗-HAV与HAV抗原结合。

·第2步孵育：加入生物素化的和钌标记的抗HAV抗体以及链霉亲和素包被的微粒，HAV抗原上仍然游离的位点被占据。

形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

·反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

【试剂主要成份】M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml：链霉亲和素包被的微粒：0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg微粒。

含防腐剂。

R1：HAV抗原（灰盖），1瓶，10ml：HAV抗原(人)：40U/ml（罗氏单位），HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐剂。

R2：生物素化的抗HAVAg抗体；Ru(bpy) 32+标记的抗HAV Ag－Ab（黑盖），1瓶，10ml：生物素化的抗HAVAg单克隆抗体(鼠)：0.25ug/ml；Ru(bpy) 32+标记的抗HAVAg单克隆抗体(鼠)：0.15ug/ml；HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐剂。

Cal 1 定标液1（白盖），2瓶，1.0ml/瓶：抗HAV阴性人血清, 含防腐剂。

Cal 2 定标液2（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶, 抗HAV（人）浓度约46IU/L在人血清中,含防腐剂。

【预防措施和警告】仅用于体外诊断。

采用正确的预防措施，遵照实验室试剂使用规定。

所有废物的丢弃应遵循当地法规的要求。

定标液（Cal 1和Cal 2）制备使用的献血者血清经FDA批准的方法检定HB S Ag、HCV 抗体、HIV1＋2 抗体均为阴性。

含有Anti-HAV(定标液2)和HAV-Ag(人,R1)的血清使用β-丙稀内酯和UV射线低温消毒。

但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人标本一样仔细处理。

一旦泄漏，应遵循权威机构的指令7，8。

超过保质期后，不能再使用。

【试剂使用】试剂盒为即用型,提供的试剂瓶与分析系统是相容的。

Elecsys2010：定标物Cal 1和Cal 2只有在定标过程中才被放在分析仪上(在20-25︒C)。

定标物用完后,应立即盖好瓶盖并储存在2-8︒C。

确保在打开盖子后没有定标物粘在盖子上。

因为可能会挥发，每瓶定标液定标次数不宜超过5次。

E170：除非在E170上定标需要全部容量，否则将部分准备使用的定标液装入空的带标签的有盖小瓶（CALSET），并将提供的标签贴在分装的其余小瓶上。

储存在2－8︒C。

每瓶分装物只用作一次定标。

所有必要的操作信息,可分别通过试剂的二维条码读取。

【储存和稳定性】存放在2－8℃。

为了确保使用前自动混匀期间有足够量的磁性微粒, Anti-HAV试剂盒（M,R1, R2）储存,切莫倒置。

2－8℃下未开封，可稳定至标明的保质期。

M，R1 ，R2试剂开封后： 2－8 ℃, 8周；在E170和 Elecsys2010上： 20－25℃，8周；Cal 1和Cal 2开封后：2－8 ℃, 8周；在Elecsys2010上（20－25℃）：最多5小时在E170上：一次性使用注意：定标液要垂直保存。

确保定标液不污染瓶盖。

【标本采集和准备】标本只有按照下列方法收集、检测才能被接受。

血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。

血浆：肝素(Li-,Na-)、K3－EDTA或枸橼酸钠抗凝。

关于使用含分离胶试管的血清的稳定性的资料,要注意试管制造商提供的资料。

（标准:血清值的批内回收率 90-110%或斜率 0.9-1.1 + 相关系数>0.95 + 批内干扰±2×分析灵敏度(LDL)）。

标本在2－8℃可稳定7天，-20℃可稳定3个月。

标本可冻融6次9。

冻融样本和含沉淀的标本使用前需离心。

不要加热灭活标本。

标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。

确保病人样本、定标物、质控物在测试前温度达到室温20-25℃.因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在两小时内测试完。

【检测步骤】提供的材料：货号：11820605，100人份的Elecsys 抗HAV试剂盒包含：· M 链霉亲和素包被的微粒· R1 HAV Ag· R2 生物素化的抗HAV Ag抗体，三联吡啶钌标记的抗HAV Ag抗体· Cal 1 定标液1· Cal 2 定标液2· 2×6 小瓶标签需要的材料（未提供）：· Elecsys 抗HAV质控品1和2，每个8×1.0ml, 货号11876350· Elecsys 甲型肝炎稀释液，2×15ml样本稀释液，货号11361252· Elecsys 定标液小瓶，2×56带盖空瓶，货号 11776576·常用实验室设备· Elecsys 2010或MODULAR ANALYTICS E170Elecsys2010分析仪需要:· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）,6×380ml，货号11662988· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），6×380ml，货号11662970· Elecsys 添加剂液（SysWash），1×500ml，货号11930346· Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean），货号11933159· Elecsys 2010反应杯（Assay Cup），60×60，货号11706802· Elecsys 2010吸样头（Assay Tip），30×120，货号11706799MODULAR ANALYSIS E170分析仪需要:· Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,1×2L,货号12135019· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）,1×2L,货号12135027· Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货号03023141· Elecsys 清洗液（ProbeWash M），12×70ml，用于最终清洗和试剂转换试剂针清洗反应管/滴头，货号03005712· Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),48×84，货号12102137· Elecsys 废物盒(wasteliner)，货号03023150· Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M)，货号03027651各种分析仪均适用的材料· Elecsys 系统清洗液（SysClean），5×100ml，货号11298500【方法】按仪器操作说明进行操作。

检查试剂与消耗品是否充足。

使用前需混匀微粒。

仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。

如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。

E170/Elecsys2010：将冷藏试剂预温到20℃后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。

系统自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。

将定标液1和定标液2放在分析仪的标本测试区。

只在标定时打开瓶盖。

条形码自动提供定标所需的数据资料。

定标完成后，将定标液1和定标液2放回2－8℃保存或丢弃(E170)。

【定标】Elecsys Anti-HAV 以NIBSC(National institute for Biological Standard and control)的甲肝抗体(人,免疫球蛋白)、NIBSC编码:97/646 第二个国际标准作为标准定标。

定标频率：每批试剂盒必须用新鲜试剂和抗HAV Cal 1,Cal 2定标一次（如：试剂包在仪器上登记后不超过24小时）。

另外，以下情况需要再次定标：·同一批号试剂一个月后（28天）· 7天后（放置仪器上的同一试剂盒）·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时·根据规定进行多次标定。

定标确认:不需要。

分析仪的软件会自动检查定标曲线的有效性及偏离。

【质控】Elecsys Anti-HAV质控品。