陕西农业科学　黑木耳液体菌种生产技术研究及应用　王玲，李含毅，党芳志。陈朝阳　（商洛市农业科学研究所，陕西商洛７２６０００）　提　要：对黑木耳液体茵种生产技术研究．并将液体茵种应用于生产中，结果表明黑木耳液体茵种具有一定的　优势。生产工艺条件是：ｌ　ｏｏｏ　ｍｌ三角摇瓶装液体量６００　ｍｌ，转速１５０　ｒ／ｒａｉｎ，培养周期９６　ｈ，经深层发酵罐培　养９６　ｈ，所获得的黑木耳液体菌种活力强、茵龄一致，将其应用接入栽培袋，茵丝萌发、吃料快。生长整齐。较固　体菌种增产１６．７　。　关键词：黑木耳；液体菌种；生产技术；栽培应用　黑木耳是我市的传统优势产业，是我市农民　增收的一个短、平、快项目。长期以来，我市食用　菌生产一直推广应用的是固体菌种，这种固体菌　种的制种与菌丝培养阶段要经受生产时间长、运　行成本高、劳动力投人多、化学用药多和经受的风　险高等弊端，严重制约黑木耳产业化的开发。为　了提升黑木耳产业，实现黑木耳菌种的一次革命，　特开展黑木耳液体菌种技术研究及应用试验，为　黑木耳液体菌种生产与应用提供依据。　１　材料与方法　１．１供试菌株及来源　黑木耳品种：８８８，引自陕西省食用菌菌种场。　ｉ．２培养基配方　１．２．１　液体菌种摇瓶培养基配方　土豆２Ｏ　、　麦麸３　、蛋白胨３‰、葡萄糖２　、磷酸二氢钾　２‰、硫酸镁１‰、维生素Ｂ　１片。　１．２．２　液体菌种发酵灌培养基配方　土豆　２０　、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２　、磷酸二　氢钾１‰、硫酸镁０．５％ｏ、石膏０．５‰、琼脂２—３ｇ、　酵母膏０．５‰、消泡剂１‰。　１．２．３栽培袋配方木屑７７％、麸皮１８　、红糖　收稿日期：２００９—０８—０６　作者简介：王玲（Ｉ９６４一），女，高级农艺师，主要从事食用菌试验研究。　１　、石膏１　９，６、生石灰１　，含水量６Ｏ　９／５。　１．３　液体菌种生产培养方法　１．３．１　摇瓶液体菌种生产培养方法　按照摇瓶　液体菌种培养基的配方，ｌ　０００　ｍｌ三角摇瓶装液　量６００　ｍｌ培养基。先称取１２０　ｇ麦麸，开水煮沸　２０　ｍｉｎ，捞出，再放人土豆蒸煮至土豆熟，双层纱　布过滤定容，加入其余的原料至溶解，冷却后放人　摇瓶中，将瓶口和胶皮管口用棉塞塞紧，放入高压　锅常规灭菌４０　ｒａｉｎ，待培养基冷却后接种。２００８　年７月６日在接种箱中接摇瓶种，常规消毒后在　液面上接６块０．５　ｃｍ。大小的菌种块，菌种块必　须漂浮在液面上，接种后放人恒温箱中在２６℃的　环境中培养，待接种块长到１　ｃｍ（单个）时停止培　养（７月９日），木耳菌种需７２　ｈ。然后开动电动　摇床，在摇床上放一个小不锈钢盆子，将摇瓶和温　度感应器放入其中，开动电磁摇床，设定温度２７　℃，转速１５０ｒ／ｒａｉｎ，以液体中有一分钱硬币大小　的漩涡为标准，摇４０　ｒａｉｎ，停ｉ０　ｍｉｎ，自动控制，　恒温培养７２　ｈ，至７月１２日培养好。检验标准　是：摇瓶摇动后有菌丝挂壁，培养液浑浊度达　９Ｏ　以上。　１．３．２发酵罐液体菌种的生产培养方法发酵　５　结论　（ｉ）红叶石楠在夏秋季扦插为最佳季节。　（２）扦插基质可根据当地实际选择细沙或珍　珠岩。　（３）春初和秋末用珍珠岩作为基质也可进行　扦插育苗生产。　（４）条件允许的情况下尽可能的在设施条件　扦插育苗。　参考文献：　［１］　周艳，陈宝玉，红叶石楠扦插繁殖技术［Ｊ］．．农家致　富．２００７，（１Ｏ）：３７．　Ｅ２３　陈贵斌，红叶石楠扦插繁育技术研究ＥＪ３．林业勘察　设计．２００８．（０２）：１９８—１９９．　Ｅ３３陈翕兰，毛丽．不同基质与ＡＢＴ生根剂组合对红叶　石楠扦插繁殖的影响［Ｊ］．安徽农业科学，２００５．　（３２）：ｌＯ３３９．

　陕西农业科学　罐使用前必须进行空灭，然后按照发酵罐液体菌种　培养基的配方称取原料，３Ｏ　ｌ发酵罐做２Ｏ　ｌ培养　基。７月１２日做发酵罐培养基，培养基的熬制同　摇瓶培养基的方法，熬好后加入发酵罐中，再加人　消泡剂消泡，开动气泵搅拌２—３　ｍｉｎ，上好盖子，开　始加热压力达０．０５　ｍｐａ时放掉冷气，在压力达　０．１２　ｍｐａ时维持４０　ｍｉｎ，之后用水冷却３　ｈ降温至　２８℃时接种。接种时在火焰上拔去摇瓶和发酵罐　接种口的棉塞进行接种，接完后关好阀门，打开气　泵搅拌，压力维持在０．Ｏ３一Ｏ．０４　Ｍｐａ之间，温度保　持２７℃培养７２　ｈ，接种培养４８　ｈ后进行菌种抽　检，检测菌种的质量。培养期间，气泵不能停止，压　力也不能超过０．０５　Ｍｐａ，培养好的液体菌种放置５　ｍｉｎ不分层，而且有一股淡淡的香味。　１．４　试验方法　（１）试验以固体菌种为对照，栽培袋采用１５　ｃｍ×３０　ｃｍ聚丙烯折角袋，对照生产成品袋５Ｏ　袋，液体菌种生产栽培袋１５０袋。　（２）栽培袋的生产、接种、培养：７月１４日生　产栽培袋，常规配方，袋型选用１５　ｃｍ×３０ｃｍ的　聚丙烯折角袋，常规拌料、装袋、灭菌至冷却。　７月１６日接种，对照固体菌种在接种箱中常　规接种，液体菌种用接种机接种，之后放培养室常　规培养。　（３）出菇管理：９月Ｉ１日地栽，每处理栽５０袋，每　袋划１２个“Ｖ”形Ｅｌ，每平方米摆２５袋，为防止浇　水时土溅到木耳上，地面铺用遮阳网，栽培方法同　常规地栽方法。　２结果与分析　２．１菌丝定植比较　对照固体菌种需１２０　ｈ菌种块变白吃料，而　液体菌种２４　ｈ菌丝定植，明显看到培养料变白。　２．２茵丝生长速度比较　８月６日各标记菌袋５袋，８月１５目测量菌　丝的日长速度见表１。　由表１可以看出，液体菌种平均日长速０．４６　ｃｍ，固体菌种平均日长速０．４　ＣｌＴＩ，液体菌种较对　照（固体菌种）平均日长速高０．０６　ｃｍ。　表１菌丝生长速度测定　（单位：ｃｍ）　２．３接种成活率比较　在相同条件下，生产固体菌种栽培袋６Ｏ袋，　成品袋５５袋，接种成活率９ｌ　；生产液体菌种栽　培袋１５０袋，接种成活率１００　，液体菌种较固体　菌种成活率明显提高。　２．４菌袋满袋时间比较　在相同条件下，对照固体菌种栽培袋５４　ｄ满　袋，液体菌种栽培袋４５　ｄ满袋，提前ｉ０　ｄ左右菌　丝长满袋，分析其原因接种方法需改进提高。　２．５耳基封口时间比较　在相同条件下，于９月Ｉ１　Ｅｌ划口地栽，液体　菌种栽培袋于９月２１日耳基封口，固体栽培袋于　９月２４日耳基封口，结果液体菌种栽培袋比对照　耳基早封口３　ｄ。　２．６　出耳产量比较　试验于２００８年９月１１日划口地栽，２００８年　ｌ０月２３日采收，去掉耳根，晾晒，各处理产量见　表２。　由表２可以看出，应用液体菌种比固体菌种　平均单袋产量高５　ｇ，增长ｌ６．７　。　表２各处理产量　３　结论　（１）黑木耳液体菌种具有一定的优势，菌丝生　长快、缩短生产周期、发酵所得的菌丝体菌龄一　致、接种成活率高、减少用工、降低成本、提高产量　等诸多优点，是用现代农业改造传统农业的有效　途径，是黑木耳菌种生产技术和应用的创新、突　破，可以实现黑木耳生产的集约化、规模化，达到　提升产业的目的。　（２）液体菌种的生产技术具有可行性和经济　价值，液体菌种栽培应用结果证实，液体菌种应用　于黑木耳栽培生产技术上是完全可行的，并表现　出明显的优势。　（３）本试验研究仅为一年，且生产工艺技术和栽　培生产技术尚为初试阶段，还待在规模生产工艺技　术和规模生产应用技术需进一步研究和应用，并制　定批量生产工艺技术，为生产应用提供科学依据。