中国中西医结合肾病杂志２０１８年３月第ｌ９卷第３期ＣＪＩＴＷＮ，Ｍａｒｃｈ　２０１８，Ｖｏ１．１９，Ｎｏ．３　自发ＩｇＡ肾病的ｄｄＹ小鼠模型研究进展　刘伟伟①　万　强①　吴燕升①　史丽强①　黄　迪①　高建东①　Ｘｇａ肾病（Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ｔｇＡＮ）是全球最　常见的原发性。肾小球疾病，占原发性肾小球肾炎的２５％～　５０％　，以血尿和蛋白尿为主要临床表现　，主要病理特征是　肾小球系膜细胞增生和基质增多，并伴有以ＩｇＡ为主的免疫复　合物的沉积。目前ＩｇＡＮ的发病机制仍未明确，基于不同发病　机制已经建立了多种动物模型，其中自发类动物模型一ｄｄＹ　（Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ，Ｄｅｎｋｅｎ，Ｙｏｋｅｎ）小鼠在疾病发生、发展等方面与　人类ＩｇＡＮ极为相似，引起了科研工作者的关注。本文拟对可　自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠动物模型的研究进展作一综述。　１　ｄｄＹ小鼠简介　ｄｄＹ小鼠起源于非近交系小鼠，１９２０年以前从德国引进日　本，作为封闭群繁衍　。在日本ｄｄＹ小鼠是普通小鼠，携带有　乳腺肿瘤的逆转录基因，Ｃｈｉｎｏ等人发现其可自发肺癌、恶性淋　巴瘤、乳腺癌、卵巢癌　Ｊ。１９８５年Ｉｍａｉ等　首次报道ｄｄＹ小鼠　可自发ＩｇＡＮ，现自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠分为三种：ｄｄＹ小鼠，高　血清ＩｇＡ小鼠（ｈｉｇｈ　ｓｅｌ＇ｔｌｍ　ＩｓＡ　ｍｉｃｅ，ＨＩＧＡ小鼠），ｇｄｄＹ小鼠　（ｇｒｏｕｐｅｄ　ｄｄＹ　ｍｉｃｅ）。２００５年Ｓｕｚｕｋｉ等　通过全基因组扫描技　术发现ｄｄＹ小鼠存在四个易感基因位点（Ｄ１０Ｍｉｔ８６、Ｄ１Ｍｉｄｌ６、　Ｄ１Ｍｉｔｌ６、Ｄ９Ｍｉｄ５２）与小鼠ＩｇＡＮ发病有关，极大推进了自发　ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠动物模型的研究。　２　自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠研究进展　２．１　ｄｄＹ小鼠１９８５年Ｉｍａｉ等　首次报道ｄｄＹ小鼠可　自发ＩｇＡＮ：蛋白尿（＋～＋＋）在小鼠２８周龄时出现，且随年　龄增长而增多；肾脏病理表现，１６周龄小鼠肾脏出现系膜细胞　增生，进一步发展为系膜增生性肾小球肾炎（ｍｅｓａｎｇｉａｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒ—　ａｔｉｖｅ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ＭｓＰＧＮ），到５９周龄系膜基质增多，肾　小球硬化很少见；免疫荧光发现，１６周龄小鼠系膜区出现ＩｇＡ、　ＩｇＧ、ＩｇＭ、Ｃ３沉积，在２８周龄以ＩｇＧ或ＩｇＭ沉积为主，从４Ｏ周　龄开始ＩｇＡ沉积增多，到５９周龄占主导地位；电镜结果进一步　证实了系膜细胞的增殖和系膜基质中电子致密沉积物的存在。　研究中排除了狼疮、血管炎等继发性病变，且小鼠未自发　肿瘤，出现了蛋白尿和符合人类ＩｇＡＮ临床病理的改变　，证实　了ｄｄＹ小鼠可自发ＩｇＡＮ，为１ｇｉＮ的研究提供了有力的工具。　２．２　ＨＩＧＡ小鼠ｄｄＹ小鼠的遗传异质性导致其ＩｇＡＮ发　病率不高，限制了模型的应用。Ｍｉｙａｗａｋｉ等　将高血清ＩｇＡ的　ｄｄＹ小鼠杂交，繁育出了早发病、高发病率的ＨＩＧＡ小鼠。在　１０周龄，１０％ＨＩＧＡ小鼠出现蛋白尿（＞１００　ｒａｇ／ｄ１）；在　４０周龄，３０％ＨＩＧＡ小鼠出现中度蛋白尿（１００～３００　ｍｇ／ｄ１）。　在２５周龄，６４％（９／１４）的ＨＩＧＡ小鼠肾脏出现了中到重度的　ＩｇＡ沉积，Ｉｍａｉ等　的ｄｄＹ小鼠在４０周龄才出现；在４０周龄，　·２７３·　７６％的ＨＩＧＡ小鼠（１６／２１）肾脏出现中到重度的系膜增生，　７１％的ＨＩＧＡ小鼠（１５／２１）可见明显的系膜基质扩张。　Ｍｉｙａｗａｋｉ等人成功建立了早发病、高发病率的自发ＩｇＡＮ　的动物模型一ＨＩＧＡ小鼠，为研究血清ＩｇＡ和ＩｇＡＮ发病之间关　系提供了有力的工具。研究还发现将高血清ｄｄＹ小鼠进行杂　交，从第二代开始是近亲繁殖，暗示我们高血清ＩｇＡ小鼠可能　存在某些未知的基因与血清ＩｇＡ有关。后来被证实１２号染色　体上的Ｄ１２Ｍｉ￣０与血清ＩｇＸ水平有关　。但是该模型仅少数　的ＨＩＧＡ小鼠出现了蛋白尿（１００～３００　ｍｇ／ｄ１），全程未见血尿，　与人类ＩｇＡＮ临床表现　不符。　２．３　ｇｄｄＹ小鼠ｄｄＹ小鼠属于远交系　，因此导致发　病不稳定，为克服其基因背景和临床表现的异质性，Ｙａｓｕｈｉｋｏ　等　将早发型ｄｄＹ小鼠（出现蛋白尿，系膜区ＩｇＡ沉积，肾小　球损伤的ｄｄＹ小鼠）近亲杂交２Ｏ代以上建立了８周１００％发病　的　ｄＹ小鼠。所有小鼠在８周龄出现蛋白尿，２４周龄血清肌　酐水平升高，肾功能衰竭。肾脏病理表现：８周龄ｇｄｄＹ小鼠出　现了系膜增生伴严重的肾小球和肾小管间质的损伤，　肾小球系　膜扩张，肾间质浸润；在８周龄和２４周龄，ｇｄｄＹ小鼠肾小球细　胞数目和肾小球硬化得分都明显高于对照组；电镜下电子致密　物主要沉积在系膜区，与人类ＩｇＡＮ表现类似。免疫荧光显示　肾小球有ＩｇＡ、ＩｇＧ及ｃ３的沉积。对照组ＨＩＧＡ小鼠ＩｇＡ水平　明显高于　ｄＹ小鼠，但与蛋白尿和血肌酐水平无关。同时发　现ｇｏｕｐｅｄ　ｄｄＹ小鼠遗传了Ｄ１０Ｍｉｔ８６、Ｄ１Ｍｉｔ２１６、Ｄ１Ｍｉｔｌ６、　Ｄ９Ｍｉｔ２５２四个易感基因位点，分别定义为Ｉｇａｎｌ、Ｉｇａｒｒ２、Ｉｇａｎ３、　Ｉｇａｎ４。研究发现ｇｄｄＹ小鼠在生存率、蛋白尿、血肌酐、。肾脏病　理等方面出现了性别差异，雄性明显差于雌性，与报道的ＩｇＡＮ　的男性患者预后差，性别是ＩｇＡＮ的危险因素　一致。基于　Ｄ１２Ｍｉｔ２０位点将　ｄＹ小鼠分为ＡＡ型、ＢＢ型、ＡＢ型，其中ＡＡ　和ＢＢ型分别对应ＩｇＡ同种异型的Ｉｇｈ一２ｂ、Ｉｇｈ一２ａ。小鼠ＩｇＡ　—Ｉ　一２ａ重链区皆存在０聚糖　，ＢＢ型小鼠的Ｉ　一２ａ铰链　区存在一个潜在的０一糖基化的受体位点　，ＡＡ型不具有，　２４周龄时ＢＢ型小鼠（４０％）生存率明显低于ＡＡ型小鼠　（８６％），ＩｇＡ分子的糖基化水平更低，暗示ＩｇＡ的异常糖基化可　以加速小鼠ＩｇＡＮ的进展。　相关研究　表明ＩｇＡＮ是自身免疫疾病，异常糖基化的　ＩｇＡ１是自身抗原；另有研究　提出自身免疫病的发病率和性　别影响的病程进展与性染色体或性激素有关，ｇｄｄＹ小鼠模型　体现了性别差异和ＩｇＡ的异常糖基化，有可能成为探索性别对　人类ＩｇＡＮ影响和研究人类ＩｇＡＮ发病的分子机制的有力工具。　该实验室下一步计划建立只携带四种易感基因中的一种或者　多种相结合的ｄｄＹ小鼠模型。　２．４与ｄｄＹ小鼠ＩｇＡＮ发病有关的易感基因人ＩｇＡＮ存　本课题为上海市中医药事业发展三年行动计划项目（Ｎｏ．ＺＹＳＮＸＤ—ＣＣ—ＹＪＸＹＹ）　①上海中医药大学附属曙光医院肾病科，上海中医药大学中医肾病研究所，上海市中医临床重点实验室（１４ＤＺ２２７３２００）　（上海２０１２０３）　△

通讯作者　·２７４·　中国中西医结合。肾病杂志２ｏ１８年３月第１９卷第３期ＣＪＩＴＷＮ，Ｍａｒｃｈ　２０１８，Ｖｏ１．１９，Ｎｏ．３　在种族差异　和家族聚集现象　…，遗传因素参与了发病。ｓｕ—　ｚｕｋｉ等　通过全基因组扫描技术发现ｄｄＹ小鼠在１、９和１０号　染色体上存在四个基因位点（Ｄ１Ｍｉｔｌ６，Ｄ１Ｍｉｔ２１６，Ｄ９Ｍｉｔ２５２，　ＤｌＯＭｉｔ８６），与。肾小球损伤密切相关。其中１０号染色体上的　ＤｌＯＭｉｔ８６位点相当于人类６ｑ２２—２３的ＩＧＡＮ１区段，与家族性　ＩｇＡＮ有关　。１号染色体上的Ｄ１Ｍｉｔｌ６位点与人类ＩｇＡＮ的　候选基因　ＳＥＬＥ极为接近。此外，１２号染色体上的Ｄ１２Ｍｉｔ２０　位点位于Ｉｇ重链基因编码区，与血清ＩｇＡ水平有关。Ｓｕｚｕｋｉ等　将３６１只ｄｄＹ小鼠根据出现肾小球病理损伤的时间划分为三　组：早发型（２０周，３１．９％），晚发型（４Ｏ周，３７．９％）和静止型　（６０周，３０．２％）。在早发型和晚发型小鼠中发现肾小球的损　伤与蛋白尿、肾小球内ＩｇＡ的沉积有关，与血清ＩｇＡ水平无关。　与静止型相比，早发型和晚发型皆存在Ｄ１Ｍｉｔｌ６，Ｄ１Ｍｉｌｌ６，　Ｄ９Ｍｉ￣５２，ＤｌＯＭｉｔ８６四种易感基因，但是早发型ｄｄＹ小鼠与晚　发型相比易感基因表达更强。　与ｄｄＹ小鼠ＩｇＡＮ发病有关的易感基因的确定，为未来探　索具有遗传背景且稳定发病的自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠动物模型　开辟了新的道路。　３　自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠模型的应用　自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠模型成功建立后，被广泛用于ＩｇＡＮ　发病机制和治疗手段的研究　。　３．１　有关发病机制的研究　已知异常糖基化ＩｇＡ１是人　ＩｇＡＮ重要发病机制，Ａｚｕｓａ等　发现异常糖基化的ＩｇＡ可以影　响ＩｇＡ—ＩｇＧ免疫复合物的形成，随后激活补体，导致ＩｇＡＮ的　发生。ｄｄＹ小鼠模型发现骨髓细胞、粘膜等与ＩｇＡＮ发病有　关　，日后研究证实当骨髓产生的ＩｇＡ１过多形成大量抗原　可刺激粘膜产生ＩｇＡ１，ＩｇＡ１分泌增多和清除异常可能是ＩｇＡＮ　发病的原因，黏膜免疫系统的失常是ＩｇＡＮ的发病机制中的关　键因素　。Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞极化改变在ＩｇＡＮ发病机制中起重要　作用　，Ｓｕｚｕｋｉ等　将发病的ｄｄＹ小鼠骨髓移植给不发病小　鼠，出现向Ｔｈｌ亚群转化，不发病的骨髓移植给发病小鼠肾脏　损伤减轻，提示Ｔｈｌ参与了ＩｇＡＮ的。肾脏损伤。Ｈｉｔｏｓｈｉ等　发　现外源性细菌或病毒类抗原激活ＴＬＲ９／ＭｙＤ８８通路可能导致　血尿、蛋白尿。实验证明，环境中的微生物可以加重ＩｇＡＮ或增　加对ＩｇＡＮ的易感性　。Ｙｅ等　发现ＴＧＦ—Ｂ】和ＴＧＦ—ｐ２　在自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠中过表达，其中ＴＧＦ—Ｂ：可能是系膜　基质扩增的重要参与者。有研究报道，ＴＧＦ—Ｂ基因变异会提　升ＩｇＡＮ的易感性，ＴＧＦ—Ｂ基因可能是未来研究ＩｇＡＮ的重要　基因。　３．２有关治疗手段的研究２０１２年全球肾脏病预后组织　（ＫＤＩＧＯ）提出了一整套ＩｇＡＮ的治疗指南　，重点介绍了ＲＡＳ　阻断剂、糖皮质激素及免疫抑制剂的应用。科研工作者以自发　ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠为动物模型，探索ＩｇＡＮ的治疗手段。Ｏｈｍｕｒｏ　等　发现低蛋白饮食可逆转ｄｄＹ小鼠的肾小球损伤。Ｌｉａｏ　等　发现泼尼松磷酸盐脂质体可以有效地减轻ＩｇＡ、Ｃ３在’肾　小球的沉积和肾小球增殖，且副作用小。与抗ＣＩＭ单克隆抗体　相比，抗ＣＤ８单克隆抗体可以减轻系膜增生延缓ＩｇＡＮ进　展　；给予ＣＤ４分子单克隆抗体（ｍＡＢＣＤ４）治疗的ｄｄＹ小鼠　ＩｇＡ沉积和系膜增殖减轻　．３　。Ｓｈｉｍｉｚｕ等　发现咪唑立宾可　以通过影响Ｂ细胞，尤其是ＩｇＡ分泌型Ｂ细胞的功能来发挥保　护肾脏的作用。Ｈｙｕｎ等　发现脂肪干细胞（Ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ＡＳＣｓ）可以通过旁分泌调节Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子发挥　对肾脏的保护作用。Ｇｙｕｎ等　发现ｇｄｄＹ小鼠接受了抗增殖　诱导配体（Ａ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ—ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｌｉｇａｎｄ，ＡＰＲＩＬ）单克隆抗体　治疗后血清ＩｇＡ降低，肾小球ＩｇＡ沉积减少，减轻了由单核细　胞介导的炎性过程，延缓了ＩｇＡＮ的进展。紫苏提取物可以减　少蛋白尿，通过降低血清ＩｇＡ减少系膜区ＩｇＡ的沉积　。内皮　素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）可诱导系膜细胞增殖和系膜基质增生等机　制促进肾小球疾病恶化，Ｎａｋａｍｕｒａ等　发现ＥＴ一１受体Ａ特　异性拮抗剂（ＦＲｔ３９３１７）可以减少尿蛋白和。肾脏的损伤。此　外，还有ＴＪＮ一２５９　、紫苏籽油　、（Ｅ）一Ｎ＿［（３，４一二甲氧　基苯）］一Ｎ一甲基一３一（３一吡啶）一２一丙烯酰胺（ＴＪＮ一　３３１）　等用于自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠模型研究发现，具有抗肾　炎的作用。　与之前的动物模型相比，自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ小鼠在临床表　现和基因位点上与人类ＩｇＡＮ高度相似，特别是８周１００％稳定　发病的ｇｄｄＹ小鼠的成功建立，大大缩短了造模时间，减少了模　型制作的工艺步骤，为研究人类ＩｇＡＮ的发病机制和治疗提供　了有力的保障，受到了全球肾病界科研工作者的广泛关注。但　人和动物模型之间还有许多不同：此系列动物模型中，一直未　见血尿，与人类ＩｇＡＮ临床表现不符；小鼠ＩｇＡ的分子结构与人　的不同；小鼠ＩｇＡ只有一种形式，而人ＩｇＡ分子有ＩｇＡ１和ＩｇＡ２　两个亚型，其中ＩｇＡ１分子的异常糖基化及免疫复合物的形成　在ＩｇＡＮ的发病机制中起重要作用；人类ＩｇＡ有Ｏ一和Ｎ一糖　链，而小鼠ＩｇＡ只有Ｎ一糖链；小鼠缺乏作为ＩｇＡ受体的ＣＤ８９　或其类似物，目前认为ＣＤ８９或转铁蛋白受体（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｒｅｃｅｐ—　ｔｏｒ，ＴｆＲ１）参与了ＩｇＡＮ的发病；ｇｄｄＹ小鼠模型中的ＡＡ型与ＢＢ　型小鼠都不含有Ｎ一乙酰半乳糖胺（Ｎ—ａｃｅｔｙｌｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ，　ＧａｌＮＡｃ），在ＩｇＡＮ发病机制中Ｏ一糖基化首先通过ＧａＩＮＡｃ转　移酶作用将丝氨酸或苏氨酸端连接。阅读与自发ＩｇＡＮ的ｄｄＹ　小鼠相关文献发现，日本研究较多；国内相关资料匮乏，无购买　途径，价格昂贵，因此在国内应用此系列模型研究ＩｇＡＮ受到　限制。　参考文献　１．Ｓｕｚｕｋｉ　Ｈ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｙ，Ｎｏｖａｋ　Ｊ。ｅｔ　ａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄ—　ｅｌｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｄｒｕｇ　Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　Ｔｏｄａｙ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｍｏｄｅｌｓ．２０１３．１１：５—１１．　２．Ｒｏｂｅｒｔ　Ｔ，Ｂｅｒｔｈｅｌｏｔ　Ｌ，Ｃａｍｂｉｅｒ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｉｎｓｉｇｈｔｓ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　ＩｇＡ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｍｅｄｉ—　ｃｉｎｅ．２０１５，２１（１２）：７６２．　３．Ｉｍａｉ　Ｈ，Ｄｒ　Ｙ　Ｎ，Ａｓａｋｕｒａ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ　ＩｇＡ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｄＹ　ｍｉｃｅ：Ａｎ　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．Ｋｉｄ—　ｎｅｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１９８５，２７（５）：７５６．　４．Ｃｈｉｎｏ　Ｆ，Ｓａｔｏ　Ｆ，Ｓａｓａｋｉ　Ｓ．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ　ｐａｒｔｉｃｌｅｓ　ｉｎ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ　ａｎｄ　ｒａｄｉａｔｉｏｎ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｔｕｍｏｒｓ　ｉｎ　ｄｄＹ　ｍｉｃｅ，１９８１，３１　（２）：２３３—２４７．　５．Ｓｕｚｕｋｉ　Ｈ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｙ，Ｙａｍａｎａｋａ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ—ｗｉｄｅ　ｓｃａｎ　ｉｎ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ　ｍｏｄｅｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ　ａ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｌｏｃｕｓ　ｏｎ　ｍｕｒｉｎｅ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　１０．ｉｎ　ａ　ｒｅｇｉｏｎ　ｓｙｎｔｅｎｉｃ　ｔｏ　ｈｕｍａｎ　ＩＧＡＮ１　ｏｎ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　６ｑ２２—２３．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｏｆ　Ｎｅｐｈ—　ｒｏｌｏｇｙ　Ｊａｓｎ，２００５，１６（５）：１２８９．　６．Ｎａｋａｍｏｔｏ　Ｙ，Ａｓａｎｏ　Ｙ，Ｄｏｈｉ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｉｍａｒｙ　ＩｇＡ　ｇｌｏｍｅｒｎｌｏｎｅ—