You Know, The More Powerful You Will Be
谢谢你的到来
学习并没有结束，希望大家继续努力
Learning Is Not Over. I Hope You Will Continue To Work Hard
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
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2、无菌操作要注意：每次操作前， 将双手用酒精棉球擦拭消毒；镊 子、解剖剪刀等金属工具用火焰 烧过灭菌，冷却后方可使用；尽 量减少无菌三角瓶或培养皿在空 气中的暴露时间；所有无菌操作 尽量快速完成，并要求在酒精灯 附近进行。
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3、请先在自然条件下练习外植体解剖， 分割成0.5cm2左右的小块（段），经操 作熟练，检查无误后，再进行无菌解 剖分割及接种，以减少植物材料染菌 或失水死亡的机率。
欢迎同学们进入奇幻的植物组织培养实验世界
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植物组织培养实验Ⅱ——— 外植体取材﹑表面消毒与接种
实验目的 实验原理、基本知识 实验用品、材料 实验要求 实验内容 、方法 实验报告——作业 下一次实验预告
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一、实验目的
1、掌握无菌操作技术，加深对无菌操作的了
解；
2、掌握常规的植物细胞组织培养技术，达到 能独立操作的能力
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7、打开三角瓶——铝箔纸的拿法
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8、瓶口在火焰上烧过
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9、铝箔纸的放法
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10、镊出黄瓜苗
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11、镊出黄瓜苗
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12、放入培养皿中
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13 、
黄 瓜
幼 苗 形 态
生 长 点
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——
14、剪取茎段
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15、剪好的外植体
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16、黄瓜切块的接种
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17、接种好的培养材料
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石竹的胚性细胞再分化进行快繁
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石 斛 植 物 的 芽 培 养
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长 春 花 的 胚 性 细 胞 培 养
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黄 芪 的 发 状 根 固 体 培 养
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黄 芪 发 状 根 的 液 体 培 养
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5、植物组织培养中的重要概念 愈伤组织：指由植物的一种组织或器官
经历脱分化形成的原始胚样组织，它具 有再分化成为完整植物体的潜能； 外植体：植物组织培养中用来进行无菌 培养的离体材料，可以是器官、组织、 细胞和原生质体等；
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二、实验原理、基本知识
1、植物细胞的全能性：早在1902年,德国著名植物生理学 家G.Haberlandt根据细胞学说理论曾大胆预言：植物体 的任何一个细胞在适宜的条件下都具有生长分化成为一 个 完 整 植 株 的 能 力 ， 被 称 为 植 物 的 全 能 性 。 1958 年,Steward和Shantz用胡萝卜根韧皮部细胞悬浮培养, 从中诱导出体细胞胚(somatic embryo)，并使其发育 成完整小植株,第一次证实了G.Haberlandt提出的细胞 全能性学说， 60年代以来许多植物的离体细胞，在人工 合成的培养基上,通过细胞的分裂、增殖分化、发育,最终 长成了完整的再生植株。
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2、植物组织培养的发展 1904年，德国植物胚胎学家Haning用萝
卜和辣根的胚进行培养，首次获得组 培的成功。 1922年，豌豆、玉米和棉花的茎尖培育 获得成功 1933年，我国李继侗等进行银杏离体胚 培养获得成功。
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3、植物组织培养的应用 在作物育种上的应用（单倍体植株、
种间杂交、细胞融合、细胞突变、种 质保存和基因工程） 在作物脱毒和快速繁殖上的应用 在遗传、生理生化和病理研究上的应 用
18、重新封好瓶口
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19、重新封好瓶口
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20、写好日期、班级和接种者代号
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最后把接好的外植体培养瓶置于培养室中 培养架上，26℃左右光照下培养一段时 间，可诱导脱分化及再分化试管苗。
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写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
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4、植物组织培养的内容
植物组织培养包括以植物和它的离 体器官、组织、细胞和原生质体为外植 体的离体无菌培养，拥有几种不同水平 的培养技术，即整体的、器官的、组织 的、细胞和原生质的培养技术。（植株 培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、 细胞培养、原生质体培养 ）
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石竹的胚性细胞再分化进行快繁
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五．实验内容（六人1台工作台每人２课苗） １、黄瓜无菌苗的分割组培快繁培养
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组培实验用品
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一、无菌苗的分割接种方法
1、点着酒精灯，双手擦拭消毒，打开长有无菌苗的三 角瓶，三角瓶瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过 灭菌。
2、用灭菌的镊子轻轻捏出幼苗，放在无菌的培养皿中， 用灭菌的剪刀将茎或叶片剪成若干0.5-1cm2的小段 （块） ，茎尖带着生长点，然后，接入盛有MS培养 基的三角瓶中，每一个切段必须直接接触培养基， 三角瓶口重新烧过灭菌，并重新封好。
3、在光照培养下，25℃左右，12小时光照条件下培养 3-6周，可发生脱分化或再分化现象（有的长成完整 植株）。23Leabharlann 1、点着酒精灯24
2、双手擦拭消毒
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3、酒精中浸泡灭菌解剖工具
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4、酒精灯火焰烧透灭菌剪刀、镊子
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5、消毒好的工具放置在无菌培养皿中
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6、打开三角瓶——牛皮纸的拿法
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烟草愈伤组织
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三、实验材料
黄瓜无菌苗。黄瓜是重要的蔬菜，是各地 区种植最广泛的经济作物。
紫背天葵为菊科土三七属宿根多年生直立 草本植物，具有较高的营养价值和保健功 能。
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四． 实验要求：
1、实验开始前，请将所有同学将自己的实验台擦 洗一遍，打开超净工作台电源，开机并用紫外灯 照射消毒20分钟，两组十二位同学在一台超净台 上接种，请先排好顺序，明确合作和分工，以加 快实验速度，减少染菌机会，实验开始后，请尽 量不要走动。