当前位置:文档之家› 层析柱装柱流程

层析柱装柱流程

层析柱装柱流程标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]
层析柱装柱流程
装柱材料
层析柱:BXK层析柱装柱仪器:?KTA 装柱器
装柱溶液
20%乙醇
匀浆的准备
精确计算所需介质的量(这对固定柱高的层析柱尤其重要)。

1L填充柱所需的介质量大约是1.15L自然沉淀匀浆的量,于干净烧杯中,取 100%沉降胶(静止放置一天以上,倾去20%乙醇后的胶为100%沉降胶)与等体积20%乙醇混合备用。

安装层析柱
1.?检测层析柱的各个部件,确保干净、完整,拧上下端堵头,拧紧膨胀圈,然后
将层析柱垂直固定在铁架台上。

2.?将装柱器安装在层析柱上端。

3.?往层析柱中加入适量的20%乙醇,打开下端口,重力流,排除下筛网中滞留的气
泡,在液面低至1-2cm高度时关闭层析柱下端出口。

装柱
1.?用玻璃棒紧靠柱子内壁引流,将摇匀的介质加入到层析柱中,这可以减少气泡
的产生。

迅速用20%乙醇填满柱子和装柱器,装上装柱器盖子,连接到?KTA 上。

2.?打开层析柱下端,开始以30cm/h流速装柱,直至柱床界面平稳。

停止装柱。

3.?打开装柱器盖子,用虹吸法去除界面上端的液体,去掉装柱器,然后小心的用
20%乙醇封满柱子剩余部分。

4.?将上端转接头一端连上?KTA,打开机器,以装柱流速用装柱液排出转接头管路
中及筛板中残留的气泡,然后将转接头另一端装到层析柱上,使转接头下端刚好接触胶界面。

(装柱流速约为70-100%的最大流速)
5.?拧紧膨胀圈,继续用装柱流速压柱,至少保持3个柱体积,以界面不变为主,
在界面处做上记号。

6.?关闭泵,并关闭柱子下端出口,使层析柱上端和泵断开(转接器上接口是打开
的),略拧松膨胀圈,缓慢向下转动调节杆,到记号处停止,然后再拧紧膨胀圈,关闭上接口。

7. 检测柱效。

相关主题