菌
大小相同的试管内加入8.8mL肉
活 性
汤培养基，同时接种试验菌液 0.2mL。取上述已稀释好的标准 稀释液1mL加入肉汤菌液试管中。
试
此时的稀释倍数为
验
1:100,1:150,1:200,1:300,1:400
三、比浊法
体
外
2. 步骤 将பைடு நூலகம்品液也稀释成1~3种不同浓度，
抗
加入肉汤菌液培养基中。
体 一、稀释法
外 （一）液体稀释法
抗 试管液体二倍稀释法
菌
活
1.1菌液的制备
性
试
将原菌液稀释，使之含菌数为 105个/mL。
验
液
1.2 药液的制备
体
准确称取各药用双蒸水溶
稀
解于10mL容量瓶内定容，使终
释
浓度为1280μg/mL，分装，贴 签，密封，4℃保存备用。
法
1.3 培养基的制备 营养肉汤、营养琼脂
菌
将全部试管移至37℃恒温水浴箱 中约3~4h，待细菌充分生长后取
活
出，用光电比色计测定其透光度，
性
根据同浓度的读数求出平均值， 然后绘出标准曲线。
试 将检品管同样求出平均值，根据
验
标准曲线即可求出被检品的效价。
菌液，混匀盖塞后，37℃培养16~18h，
观察。相同过程重复三次。
附：琼脂平板为无菌检查；14管为培养
物对照（接种同数量的细菌，不加药 液）；15管为培养基对照（不加菌，不 加药）。
一、稀释法
稀 (二)固体稀释法
释 2. 平皿稀释法
取平皿13只,加入不同浓度的药液
法
各1mL,第1~12平皿各加融化的普
性
要做到“满而不溢”。盖上陶瓦 盖放入托盘中，小心地移至培养
试
箱，37℃培养24h。用游标卡尺精
验
确测量各个抑菌圈直径（精确到 0.01mm）。
体 二、扩散法
外
抗
结果判定
菌
抑菌圈直径均值：
活
＞20mm为高敏药物
性
19mm～15mm为中敏药物
试
15mm～10mm为轻敏药物
验
＜10mm为抗药（不敏感）
活
药敏纸片按一定间隔均匀贴到琼 脂表面，每个平板放5张药敏纸片，
性
37℃培养24h。观察结果，用游标
试
卡尺测定抑菌圈直径。
验
体 外
二、扩散法
(二)杯碟法
在已配好的含菌平板上用钢管放
抗
置器均匀分布灭菌不锈钢牛津杯，
菌
用无菌胶头滴管往每个牛律杯中 分别加入稀释为50倍和100倍的
活
1280µg/mL待检药品溶液，注意
通琼脂培养基9.0mL，第13平皿作
为对照不加药，加入10mL培养基，
均匀摇动使其与药液合一。待琼
脂凝固、表面干燥后接种试验菌。 置37 ℃培养24~48h，观察结果，求出
MIC。
体 外
二、扩散法 (一)纸片法
用灭菌棉签（弯玻棒）将菌液均
抗
匀涂抹于普通琼脂平板。待琼脂
菌
表面干燥后，用灭菌镊子取各种
液
1.4 试验方法
体
取灭菌带塞小试管15支，标号，向 第1支试管中加入0.9ml营养肉汤，其余
稀 释
各管加入0.5ml；然后，向第1支试管内 加入0.1ml药液，混匀后，取出0.5ml加 入第2管内，依次类推至13管，混匀后
法
吸出0.4ml弃之，另取0.1ml涂于营养琼 脂平板上；然后向1~14管内加入0.5ml
体 三、比浊法
外 1. 原理
抗 细菌生长的浑浊度可以用透光度
菌
表示，则log透光度与一定范围内 的抗菌药的剂量呈直线关系，可
活
以制得标准曲线。
性 同样，被测药物所引起的抑制细
试
菌生长程度也可以用log透光度表
验
示。带入曲线方程可得对应的 MIC。
体
三、比浊法
外
2. 步骤
抗
将标准药液稀释成不同稀释度 1:10,1:15,1:20,1:30,1:40。然后于