1. 习惯命名法：根据酶所催化的底物、反应 的性质以及酶的来源等进行命名。
2. 系统命名法：规定每一种酶均有一个系统 名称，它标明酶的底物与反应性质，底物 之间以“：”分隔开。
3. 应用：为应用方便，对每一个酶同时推荐 一个习惯命名。
(四) 酶的分类与编号 氧化还原酶类（oxidoreductases） 转移酶类（transfereases） 水解酶类（hydrolases） 裂解酶类（lyases） 异构酶类（isomerases） 合成酶类（synthetase）
5.鉴定酶的种类
Km值是酶的特征常数，在反应条件一定时，只 与酶的种类和底物的性质有关，与酶的浓度无关。 不同种类的酶其Km值不同，对于一种未知的酶，可 在规定的条件下测定其Km值加以鉴定。
某些酶的Km值
酶
底物
Km(mmol/L)
乳酸脱氢酶 己糖激酶
-半乳糖苷酶 碳酸酐酶 过氧化氢酶 蔗糖酶 糜蛋白酶
丙酮酸
0.017
D-葡萄糖
0.05
D-果糖
1.5
D-乳糖
4.0
H2CO3
9.0
H2O2
25
蔗糖
28
甘氨酰酪氨酰甘氨酸 108
6.分别测定正逆方向反应的Km值及底物浓 度，可推断该酶在体内的反应方向和催化 效率。
7.根据Km值可帮助寻找酶反应体系的限速 酶。 酶反应体系中， Km大的酶可能为限速酶。
节性。
（二）酶的催化作用机制
酶底物复合物
E + S ES E + P
*诱导契合假说(induced-fit hypothesis) 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、
相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过 程称为酶-底物结合的诱导契合假说 。
【酶促反应动力学】
概念 研究各种因素对酶促反应速度影响的学科--酶促反应动力学。
第五章 诊断酶学
Diagnostic Enzymology
目的： 学习并掌握血清酶的基本知识及其在 临床检验诊断中的应用。 学习内容：
第一节 概述 第二节 酶测定技术 第三节 常用酶及同工酶测定的临床应用
第一节 概 述
与酶催化反应有关的名词
酶促反应：酶催化的反应； 酶活性(activity)：酶催化反应的能力； 底物(substrate，S)：酶所作用的物质； 产物(product，P)：酶促反应的生成物； 酶的激活剂(activator）：加速酶促反应
酶促反应速度：用单位时间内底物的消耗量 或产物的生成量表示
V=Vmax[S]/Km+[S]
米-曼氏方程（michaelis menten equation)
【Km】 Km的定义
由米-曼氏方程可以导出：
（Vmax-v）〔S〕 Km = ———————
v
当v = 1/2Vmax时，Km =〔S〕。因此Km值为反应速度 相当于最大反应速度一半时的底物浓度。Km值是酶的 特征常数，具有重要的应用价值。 大多数酶Km在10-6~10-2mmol/L之间
临床常用酶的名称与编号
习惯用名 乳酸脱氢酶 异柠檬酸脱氢酶 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 谷氨酸脱氢酶 单胺氧化酶 -谷氨酰转移酶 糖原磷酸化酶 谷胱甘肽转移酶 门冬氨酸氨基转移酶 丙氨酸氨基转移酶 肌酸激酶 脂肪酶 胆碱酯酶 碱性磷酸酶 酸性磷酸酶 5‘-核苷酸酶 -淀粉酶
英文缩写
EC 编号
LD(LDH)
酶活性浓度测定就是要使酶促反应的初速度 (v)达到最大速度Vmax，即在过量底物存在 下的零级反应期的速度。
【酶促反应的影响因素和反应条件的选择】
影响酶促反应的因素： –酶浓度 –底物浓度 –pH –温度 –电解质 –辅酶 –激活剂 –抑制剂
酶促反应的最适条件：
我国检验学会文件提出的最适条件为
1.1.1.1.42
G6PD(G6PDH) 1.1.1.49
GLD(GLDH)
1.4..1.3
MAO
1.4.3.4
3.计算不同底物浓度时酶促反应速度和相当于最 大反应速度的比率
根据米-曼氏方程可以计算
4.设计适宜的底物浓度，可通过米-曼氏方程来 推算工具酶的用量。
酶促反应进程曲线表明，只有初速度才能真正代 表酶活性，一般要求初速度达到最大速度的90%～ 95%、底物消耗率为1%～5%。这样既可以近似地 表示酶活性，又不致于使底物浓度过高而造成浪费。
【酶促反应进程】
酶活性浓度即酶的催化活性浓度，用酶促反应 速度表示，指在规定条件下单位时间内底物的减 少量或产物的生成量。
v =-d〔S〕/dt 或 v =d〔P〕/dt。
底物浓度为〔S〕,产物浓度为〔P〕,时间为t，反应速度为v
注：在实际测定酶促反应速度时，以测定单位时间内产物的 生成量为好。
酶促反应中基质[S]、产物[P]和反应速率V在不同 时间变化的模式图
Km值的应用
1.反映酶与底物的亲合力
Km值越大，酶与底物亲合力越小， Km值越小，酶与底物亲合力越大。
2.选择酶的最适底物 Km值取决于酶的种类和底物的性质，在酶一定时， 不同底物有不同的Km值, Km值最小的底物为酶的最 适底物。 酶活力测定时，应优先选择酶的最适底物，使酶促 反应容易进行，并节省底物用量。
的物质； 酶的抑制剂(inhibitor ）：减慢或终止酶
促反应的物质
(一)酶的组成、结构与功能
组成 单纯酶(simple enzyme)： 仅由氨基酸残基构成的酶
结合酶（conjugated enzyme)： 由蛋白质部分和非蛋白质部分（辅
助因子）构成的酶。
结构
*单体酶： 具有一、二、三级结构
1. 选合适的底物、辅因子、活化剂、变构剂的 种类和浓度。
2. 指示酶和辅助酶的种类和浓度。 3. 反应混合液的最适pH，缓冲液种类和浓度。
其它影响酶活性的因素，如去除各种抑制剂。 4. 在某些情况下，为了获得更好的测定重复性
或更大的临床价值，可考虑对上述“最适条 件”作适度的修改。
(三) 酶的命名
*寡聚酶： 具有一、二、三、四级结构
每一种酶分子内具有与催化功能密切相关的空间结 构区域---活性中心（active center）
活性中心以外 的必需基团
结合基团
底物
催化基团
活性中心
目录
酶的功能及其特性
功能： 对生物体内的化学反应起催化作用。
酶催化作用的特性： 高度催化效率、高度特异性及高度可调