痰标本的处理
培养基：血琼脂、麦康凯琼脂、嗜血杆菌巧克 力琼脂和沙保弱琼脂。
划线方法：分四区划线，每次划下一区前都要 烧灼接种环，待冷却后再划。下一区与上一区 要相交4-6次。
35℃5%-10%二氧化碳中培养24-48h。
咽拭子及口腔拭子
采集前患者应用冷开水反复漱口， 拭子的选择：要求无菌、不含抑制剂； 预先沾湿拭子（非常重要）； 由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉
霍乱弧菌培养：
记录收到标本时间和病人电话 碱性蛋白胨水35℃培养 6-8小时后转种4号平板（四区划线） 继续35 ℃培养
生殖道、尿道标本采集
男性患者:
尿道标本:
2h不排尿 清洗龟头后,用碘伏等消毒后,挤出分泌物或以专用细拭子
插入尿道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。
前列腺液标本: 应由医师按摩前列腺,以无菌操做自尿道
隔不少于60分钟。
采血方法
采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血 液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒针 头。
血培养瓶口也要消毒，并待酒精挥发后（建议 用酒精灯烧灼瓶口）再注入血样, 。
采血量
每次采血量成人5～10ml，婴幼儿1～2ml， 培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液 中的抗生素。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采 血为宜。
多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内采血。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取
血标本。
采血次数与间隔
急性感染患者： 从两臂分别采2份血样。 感染性心内膜炎患者: 24h内采血3次, 每次间
隔不少于30分钟。 发热原因不明患者: 24-48h后可再采血2次,间
细菌培养标本的 采集、运送与处理（需氧）
内容简介
细菌培养基本原则 常见临床标本的采集、运送与处理
细菌检验从正确取材开始
正确的采集、运送与处理细菌培养标本是临床 细菌检验成功的关键。没有好质量的标本，实 验室采取任何先进的分离、鉴定和药敏技术都 是无济于事的,并有可能误导临床医生。
微生物学检验的标准化首先应从标本采取,运 送和处理的规范化开始。
口采取前列腺液放在无菌杯内送检。
生殖道、尿道标本采集
女性患者:
成年患者: 应在扩阴器的支持下,以无菌棉拭子擦去 分泌物，再用新的无菌拭子紧贴宫颈内道采样送检。
未成年患者: 不应使用扩阴器, 应以无菌拭子在阴道 口处采取分泌物送检。
尿道：2h不排尿，拭去尿道口渗出物，再插入尿 道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。
痰液的均质化：向痰液内加等量约pH7.6的10g/L 胰酶溶液，放置35℃90min，即能使痰液均质化， 而对细菌培养无明显影响。
痰标本的处理
判断标本是否合格
洗过的痰液革兰染色后用低倍镜检鳞状上皮细胞数 量
鳞状上皮细胞数>10/lp，则要求重新留取标本， 不宜做培养；
证实标本来自下呼吸道后，用油镜观察细菌的 着色、形态及排列，做出初步病原学诊断。发 现任何白细胞内的细菌，均须报告。
标本留取不当会导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的 出现。
标本采集时间
痰液：以晨痰为好。多数患者晨痰较多，即使 对痰量少的患者，也以清晨采集最为容易。对 支气管扩张症或与支气管相通的肺空洞患者， 清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液。 最好在应用抗菌药物之前或停药1天后采集标 本。
鼻咽拭子 ： 应于抗菌药物治疗前采集为好。 咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后 采集为宜。
在安全性问题的容器内。
标本转运的原则
所有标本必须立即送交实验室，最好不要超过 2小时，如标本处理不得不延迟，应在合适的 条件下储存，但不超过24小时。
对环境敏感的微生物包括志贺氏菌（应立即处 理）、淋球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌 （对低温敏感）。脑脊液、生殖器、眼或内耳 标本不要冷冻。
哪些情况需要使用运送培养基?
生殖道、尿道标本处理
立即送检 普通培养和淋球菌培养：室温 支原体、衣原体：4℃保存
生殖道标本处理
普通培养：
血琼脂 三区划线 35℃培养
淋球菌培养
淋球菌巧克力平板预温后立即接种三区划线 35℃ 5-10%CO2培养
杜克雷嗜血杆菌培养
嗜血杆菌巧克力平板 立即接种三区划线 35℃ 5-10%CO2培养
尿液标本
标本采集时间:
应在用药前或停药5天后留取标本 以晨起第一次尿为宜 使尿液在膀胱内停留6-8h以上(给细菌足够的繁殖
时间)。
尿液标本采集方法
中段尿：
女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口。 男性须翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干。 弃前段尿，无菌杯收集中段尿。
运送: 若床边没有接种，用带盖的无菌容器送检。
血液和无菌体液的处理
血液或无菌体液抽取后应立即放入血培养瓶,立即送检 或室温保存,不能放冰箱!
实验室接到标本应立即放入血培养仪。中夜班收到标 本放置室温,不用放置35℃温箱 。
对急诊室送来或室温久置的标本，应先检查瓶底有无 变化，如变黄，应先涂片并盲传，以防漏检。
采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
膀胱穿刺法: 是收集尿液的最好方法, 尤其对厌氧菌检查,但由于是 侵入损伤性操作,临床常少用,收集的标本可直接注 入血培养瓶中。
肾盂尿采集法:
应请泌尿科医生采取, 左右侧的标本要标明,收集的标 本可直接注入血培养瓶中。
尿液标本运送和保存
无菌杯立即送检
室温下尿标本担搁稍久可导致尿内细菌数量明 显增加而影响病原菌与污染菌的区分和细菌定 量。
粪便培养
社区感染标本：社区感染性腹泻，多由志贺菌、沙门菌、弧
菌、耶尔森菌等肠道致病菌感染所引起。将标本接种在相应的选 择性分离培养基上即可，弧菌、耶尔森菌应先增菌后培养以提高 检出率。
住院患者腹泻标本：
多为大量使用广谱抗生素后导致菌群失调引起。 住院超过3天或入院诊断不是肠胃炎的不做常规粪便培养。应考虑梭
手术创口、烧伤创面与脓液处理
无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深 部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。采2个拭 子，一个培养，一个涂片。
开放性脓肿：尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤 口前沿取样。从脓肿底部或脓肿壁取样最好。
封闭性脓肿：宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，无菌注射 器抽取脓液送检，最好做厌氧培养。
痰标本运送和保存
从病人留痰后应在1h内送至实验室 不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下担搁数小时定植于口
咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血 杆菌检出率明显降低 未用运送培养基的标本送到实验室后应在30分钟内接种到相应培 养基
痰标本的处理
培养前的处理：
痰液的洗净：痰液含有许多正常菌群而影响病原菌 检出。可用10-20ml无菌生理盐水洗两三次，最后 将剩余的脓痰继续处理。
每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。
抗凝剂
0.025-0.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate, SPS) 。
SPS具有抗凝抗吞噬抗补体及拮抗某些抗生素 的作用。
培养条件
视患者的感染、用药情况选用不同的培养瓶。真菌培 养可和普通培养共用一需氧瓶。
及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才 能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高 治愈率和降低医疗费用。
采血时机
在出现临床症状后应尽快抽血作培养，最好在 发热初期和高峰或寒战时。
原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用 药物而病情不允许停药的患者也应在下一次用 药前采血。
采血部位
通常采血部位为肘静脉。
细菌室工作人员、临床医生和护士必须明白保 证标本质量的重要性。
标本采集的普遍原则
避免自身菌群的污染，只要可能的话，应该确定一个代表感染过 程的标本。
选择正确的解剖部位，采用适当的技术和设备采集标本。 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的标本。 收集标本量要足够，量少可能导致假阴性结果。 每份标本上注明姓名，标本来源，采集部位，时间和日期。 将标本放在设计用于提高可能病原体的生存、无漏、无菌、无潜
痰标本采集方法
自然咳痰：清水反复漱口后用力咳痰，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于 无菌容器送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。
气管穿刺法: 适用于昏迷和咳嗽乏力患者。 纤维支气管镜抽取法: 适用于纤维支气管镜检查或治疗的患者。用纤维
支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避 免咽喉部正常菌群感染。 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿因压舌 刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，从而获得标本。 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经 人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
问题标本的处理
与送检医生或护士联系。对非损伤方法取得的 标本，再送新标本。对经损伤程序取得的标本， 和临床联系后可以处理，但要在申请单上注明 问题。
特殊情况下，即使标本质量有损害，也必须处 理。
疑难病症 罕见病例 传染性疾病的会诊
血液细菌培养
临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染 的患者，需做血液细菌培养以明确病原。
状芽胞杆菌培养或毒素测定。 常见病原菌有艰难梭菌、弯曲菌、葡萄球菌、肠球菌、念珠菌等。
选择培养基应根据涂ห้องสมุดไป่ตู้结果而定。
粪便标本采集
应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集。 排便后，挑取有脓血、黏液部分的粪便（液状粪便则
取絮状物），稀便不少于1ml，固体便不少于1克，无 便患者可用直肠拭子。 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肛拭采集。将拭子 前端用无菌甘油水湿润。然后插入肛门约4～5cm （幼儿约2～3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液 后退出，置运送培养基内送检。 除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做 常规病源检查。