DNA测序仪的日常维护
故障现象:电泳电流低于正常值许多 处理方法:此种现象可以在status窗口中观察 到,也可以在下图所示的图标中找到 气泡,灌胶不充分或根本没有胶灌进毛细管 都会导致该结果 Buffer的缓冲能力降低
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故障6:3100/3130连接失败, 黄灯固定
故障现象:
处理方法:1,检查网线的连接;2,检查电脑 的IP地址的设置:192.168.0.1;
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故障8:3130 windows XP sp2
故障现象:3130安装后,操作系统的service pack为1.0,当补丁升级到service pack2.0后, 如不进行适当的设置,仪器和电脑之间的连 接就会被当做病毒而被block,导致机器连接 不上 处理方法:请暂时不要进行升级,如要升级 请电话通知相关工程师,在其的指导下进行 电脑相关的设置
更换毛细管或根据需要更换。 更换注射器 根据需要(如spatial信号变低等)可联系工程师对机器 进行保养 峰的左右不对称,后拖
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机器长时间停机的注意事项
毛细管:
流水不腐,户枢不蠹
经常注意毛细管两端是否浸泡在液体中;每周进行1到 2次的手动灌胶或运行一次空样品以保证毛细管内壁不 会有结晶产生而将毛细管堵塞。
电话:8008100497-456分机
谢谢!
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故障12:出峰延迟
故障现象:第一个峰出现的时间比正常时间 晚,由于电流过低、温度过低或有气泡造成 处理方法:从左下图可得提示
电流是否平稳:放电、 气泡 过高、过低:缓冲液、 气温
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故障13:污染现象
故障现象:荧光物质污染;有机物质污染; 灰尘、颗粒污染 处理方法:不戴有滑石粉的手套;定期清洗 注射器、block;注意一定要使用合格的水。
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310开机与关机
310每隔半年或遇故障时,经常进行另外一种 开关机方法:total reset 开机时同时按住仪器正面的tray和gel pump两 个按钮5秒钟 打开数据收集软件进行firmware的传送 Manual control中输入仪器左前门内侧的四个 数值,并“执行” 进行autosampler的校正和注射器位置的校正
开机顺序:先开电脑,再开测序仪,等 到测序仪绿灯亮,最后打开数据收集软 件。 关机顺序:先退出应用程序(data collection、sequence analysis、 genemapper),再关测序仪,最后关掉 电脑。 请严格按照此顺序进行开关机!-好的 开头等于成功了一半
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3100开机与关机
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故障7:3100用户密码过期
Hale Waihona Puke 故障现象:该故障存在win2k和xp操作系统中, 当账户3100user的password never expire没有被 选中时,一段时间后,仪器和电脑失去连接, 但网线和IP地址均正确 处理方法:1,对于3100avant,3104User: 3104User;2,对于3100,DNA:dna;3,对 3130/xl,3130User:3130User
故障现象:310电脑无法控制测序仪 处理方法:1,检查连线;2,检查general setting中的 communication的设置
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故障2:310电极变弯
故障现象:电极由于位 置校正不准确,或仪器 长时间不用导致firmware 丢失或混乱,而被撞弯 处理方法:1,撞弯的电 极可以弄直后继续使用; 2,如由电极过长导致变 弯,可以适当剪短后使 用;3,注意校正 autosampler的位置; 4,total reset后重新校正位 置
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故障9:仪器漏胶,闪红灯
故障现象:错误提示
“Leak Detect”并不意 味着一定是漏胶,请 检查针筒里有无气泡
处理方法:排除气泡
When the Gel Pump is pumping it will compress the air bubble. The software will count these steps as pumping steps. It will assume there is a leak if it sees 15 counts in a given time. It will then pause the instrument and give the operator an error message.
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测序仪的日常维护与保养
相关耗材的使用
Hi-Di:分装以避免反复冻 融 胶:4ºC保存,用之前2小时从 冰箱中取出回温,并且不同种 类的胶不能混用:310pop4, 310pop6,3100pop4、pop6、 pop7,更换胶时请使用相关的 wizard 水:请使用电导率为18.2兆欧 的水 Buffer:请新鲜配制 毛细管:未使用过的毛细管请 置于干燥的地方保存;用过的 毛细管两端一定不能离开水
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电脑的保养
电脑的维护和保养
每周进行一次重新启动 碎片整理 不装第三方软件 注意防病毒 定期备份数据,清理硬盘空间 清理数据库文件:cleanupDB.bat,cleanup processed plate DELL维修电话:8008580950,8008582437
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常见故障及处理方法
故障1:310连接失败
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故障10:w2k,xp硬盘空间满
故障现象:当运行仪器时,被告知已经没有 足够的磁盘空间,因为C盘中生成了一个很大 的数据:EPFdata 处理方法:1,在C盘下找到该文件直接删除即 可;2,产生这种文件的原因是没有按正常的 顺序开、关机。
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故障11:某些毛细管信号不稳定
故障现象:某些毛细管有时可以做出很好的 结果,有时却没有信号,或结果较差 处理方法:1,耗材;2,水;3,autosampler需要 校正;4,样品纯度问题
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钉子峰
原因
样品或毛细管内有气泡或灰尘、结晶等固体小颗粒, 反射激光,所以信号很高,而且所有波长(4色)都有
解决办法
灌胶时不要产生气泡 使用过的毛细管在取下一段时间后,重新安装前要清 洗;要经常擦去灰尘;从原包装里取出的新毛细管没 有灰尘问题 样品纯化干净
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Any questions?
怎样联系我们
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Spatial校正
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Spectral的校正
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每天要做的事情
运行前检查block 有无气泡 检查buffer及水 的高度 注意机器的环境 卫生 检查激光风扇出 口是否被堵住
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每二天要做的事情
更换水、buffer,且buffer要新鲜配制
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每周要做的事情
更换新鲜的胶 清洗大小注射器 更换3130测序仪 PDP water seal trap中的水 重新启动电脑和测序仪
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故障3:310放电现象
故障现象:电流值>20,可见明显电火花 处理方法: 310电极与样品架之间放电或电极与毛
细管之间放电,用水擦,切勿用酒精擦
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故障4:310信号过低
故障现象:换过毛细管后信号突然变低 处理方法:毛细管拧得过紧,适当放松后继 续实验一般都可以解决该问题
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故障5:310、3100电流值过低
开机之前请先检查oven的门和测序仪的门是 否已经关闭 开机时灯的状态:
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3100开机与关机
3100开机成功的标 志:仪器绿灯亮; 可以成功打开数据 收集软件 对NT系统,有四个 运行的窗口 对2000或XP,有两 个运行的窗口 运行过程中,每个 窗口都不能关闭
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310开机与关机
310开机时请注意毛细管的位置,如毛细管浸 泡在buffer中,请先取出放回正确的位置后再 开机。 310关机时,请同时用手托住自动进样器 (autosampler)缓慢下放,以免自动进样器 的损坏。 请将毛细管两端浸没在液体中,以保护毛细 管。
DNA测序仪的日常维护
吕 亮 方国洪 胡 明
8008100497(北京服务中心) 8008203939(上海) 8008302001(广州)
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提
要
1. DNA测序仪的开机与关机顺序 2. 测序仪的日常维护和保养 3. 测序仪所配电脑的日常维护和保养 4. 测序仪常见故障及其处理方法
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开机与关机
开机与关机
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每月要做的事情
清洗上下胶引导块 清洗毛细管的扫描窗口 并做spatial 对于3130,清洗pump block,请使用water wash wizard 对电脑进行碎片整理并 备份相关数据 数据库整理: cleanupDB.bat,cleanup processed plate
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每半年或一年要做的事情
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荧光物质污染
序列图谱
原始图谱
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荧光物质污染
迁移率与400 bp片段相当,所以出现在400 bp处 激光照射下产生荧光,所以出现杂峰 因为其波长与BigDye碱基不同,所以“透明” 在通风橱里吹一段时间,污染物质蒸发后,信号变干净
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有机物质污染
Waterfall effect
毛细管里存在有机物质 换水、缓冲液、甲酰胺 清洗胶引导块、更换胶引导块、更换针筒