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9.4.2 平面层析法
平面层析法(planar chromatography)主要包括薄层层 析法和纸层析法两大类。
薄层层析：将固定相涂布于平面载板上。 纸层析：直接以滤纸作为固定相。 装置简单、操作简便。 常作为一种不挥发高沸点有机物、生物大分子混合物 的有效、快速、简便的分离分析手段而被应用。 平面层析法与其他色谱分离有着相同或相似的分离机 理。
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缺点:
• 缺点： 分离效率较低，不适用挥发性试 样分离。定性定量不便。 • 应用：平板色谱法在染料、农药、医药 、有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基 酸、蛋白质及中草药中有效成分的分离分 析中经常被使用。也可以用于无机离子的 分离。还经常作为高效液相色谱的一种预 试方法。
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2.展开剂
由一种或多种溶剂按一定比例组成。如用纸层析分离 氨基酸时，常用的展开剂组成和配比为：
正丁醇：乙酸：水 = 4：1：1。
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3. 点样
用微量注射器或玻璃毛细管吸取 一定量试样点在原点上。试样点的直 径一般应小于5mm。可并排点多个试 样同时展开。
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平面层析法
纸层析和薄层层析流 动相的移动是依靠毛细作 用。
将试样点在色谱滤纸 或层析板的一端，并将该 端浸在作为流动相的溶剂 （常称之为展开剂）中， 随着溶剂向上的移动，经 过试样点时，带动试样向 上运动。
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操作技术
1.层析纸和层析板
特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形（或筒型）。层 析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝， 200～250目）均匀地涂在长条形玻璃板上（厚度0.15～ 0.5mm）。干燥后即可使用。
第九章
分析测定中常用 的分离方法
9.4.1 柱层析法 9.4.2 平面层析法
第四节 层析分离法
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9.4.1 柱层析
1. 吸附柱层析法
以吸附剂为固定相(硅胶、氧化铝和活性炭等)。 根据试样的性质、吸附剂的活性和流动相的极性这 三种因素来选择适宜的条件。 被分离的组分极性较强，应选择吸附性能较弱的吸 附剂，同时选择极性较强的洗脱剂；或反之。 吸附柱层析法可用于芳香族化合物的分离、倍半萜 类烯物的分离等。
4.显色、检测
有些组份在紫外光照射下产生荧光，可在紫外灯 下用铅笔将组份斑点描绘出来。常用的显色方法有 喷洒显色剂、碘蒸气熏或氨水熏等。
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特点及应用
• 平板色谱简单、方便、及操作费用低， • 可以在一块层析板上同时展开多个试样 及将多条滤纸同时展开。 • 采用方形薄层板还可以方便的进行二维 展开，即按一般方法展开后，改变方向和 展开剂再次展开，进一步改善分离效果。 • 试样一般不需要经过预处理即可分离。

内容选择：
9.1 沉淀分离法 9.2 溶剂萃取分离法 9.3 离子交换分离法 9.4 层析分离法 9. 5 膜分离法 9.6 激光分离法
结束
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2. 凝胶柱层析法
凝胶或其它具有分子筛性质的多孔性物质做固定相。 对具有不同分子量的溶质或不同大小的分子进行分离 纯化的一种方法。 凝胶：葡萄糖凝胶、聚丙烯酰凝胶、琼脂糖凝胶、聚 苯乙烯凝胶和多孔硅胶等。 分离原理：当被分离的物质通过柱子时,小分子可以自 由进入凝胶孔道(kd1),在柱内停留时间最长；大分子因不 能进入孔道(kd0),在柱内停留时间最短；居中分子(kd0-1), 它们将按照顺序被洗脱. 应用：生化领域,如蛋白质、氨基酸、核酸、肽类等生 物物质的分离和制备，抗菌素的分离、纯化，肝炎病毒的 分离等；高聚物的分子量和分子量分布测定。