胃蛋白酶原详解
洗涤机:洗去其它的物质和未结合的铕标抗体。
时间分辨荧光免疫分析仪:微孔表面免疫复合物中的荧光鳌合物,在 时间分辨荧光分析仪上测定相应发光强度。
最后根据PG浓度的系列参考标准品的相应发光强度的得到标准曲线, 通过双对数数学模型回归处理得到回归直线,未知样品的PG浓度 可以通过其相应发光强度从回归直线上反算出来。
的研究与应用在肿瘤学中已成为一个引人注目的新领域。
选择一些特异性较高的肿瘤标志物联合测定某一肿瘤优 于单一指标,有利于提高检出的阳性率。而且,合理选用 肿瘤标志物,常可在临床症状出现之前数月鉴别出复发和
转移。因此多种肿瘤标志物的联合检测是研究的一个发 展方向。
三、临床意义
参考值:PGI 60-240ng/ml; PGII 0-27 ng/ml;PGI/PGII>3。
建议
可能原因
PGI>240
胃粘膜有破损,建 浅表性胃炎、糜烂性胃炎、胃溃疡、 议进一步胃镜检查 十二指肠溃疡、胃癌等可能造成胃 或禁酒等两周后复 粘膜破损,以溃疡居多。 查。
胃蛋白酶只在酸性环境中发挥作用, pH>6即失去活 性;在pH=2时优先作用于天然蛋白质;pH=4时能消化 某些特异性的肽。在体外,胃蛋白酶的持续作用可使蛋白 分子的肽键约有30%分裂,形成脙、胨和一些氨基酸。胃 蛋白酶不作用于角蛋白和黏蛋白,亦不作用于低相对分子
质量的蛋白衍生物。在复合维生素与蛋白质结合和释放 上,胃蛋白酶亦起主要作用。近年来, PG作为肿瘤标志物
胃蛋白酶原(PG)检测(时间分辨荧光免疫分析法)的优势、 试剂盒主要组成及其原理。
血清PG的检测方法包括放射免疫测定法(RIA)、酶免疫测定法 (EIA)、时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)等。RIA法早年在日本应 用较多,但因有放射性,应用受到限制。EIA法所需样本量少,具 有较高的特异性和灵敏度。铕标记TRFIA法检测是一种灵敏、简便 的检测方法,克服了RIA法、酶联免疫分析法(ELISA)只能分别测 定PGⅠ、PGⅡ后再计算PGR而带来的误差积累,特别是对提高 PGR参数检测准确性具有突出的优势。检出时间应进一步缩短,获 得较高的灵敏度及特异度,并认为该法检测方便,设备易获得,试 剂易保存,无放射性,更适合于发展中国家大规模胃癌筛查。
血清胃蛋白酶原结果
PG阳性度结果判断
PGI≥60ng/ml或I/II>3
阴性(-)
PGI<60ng/ml并且I/II<3
阳性(+),轻度萎缩
PGI<50ng/ml并且I/II<3
中度阳性(2+),中度萎缩
PGI<30ng/ml并且 I/II<2
强阳性(3+),高度Fra bibliotek缩若只作PGI,结果分析如下:
检测结果
离心机:利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,分离出血清, 作为测定抗原。
水平摇匀仪:当检测样品加入后,试剂盒可以捕获血清中的PG,另一 株加入到96微孔板内的孔里,标记了铕离子的特异性抗体结合到 PG上,形成抗体PG-铕标记抗体的多层免疫复合物,在水平摇匀仪 上充分摇匀,使抗体PG-铕标记抗体的多层免疫复合物更加充分的 结合。
时间分辨荧光免疫分析,一株特异性抗体预先包被在微 孔板的孔里,当检测样品加入后,它可以捕获血清中的 PG,另一株加入到96微孔板内的孔里,标记了铕离子 的特异性抗体也可以结合到PG上,这样在微孔板的孔 里就形成了抗体PG-铕标记抗体的多层免疫复合物,其 它的物质和未结合的铕标抗体被洗涤液洗去,加入增强 液,微孔表面免疫复合物中的铕离子被荧光增强液解离 并形成稳定的荧光鳌合物,在时间分辨荧光分析仪上测 定相应发光强度。根据PG浓度的系列参考标准品的相 应发光强度的得到标准曲线,通过双对数数学模型回归 处理得到回归直线,未知样品的PG浓度可以通过其相 应发光强度从回归直线上反算出来。
试剂盒主要组成:1.PG参考标准品:六瓶;2.Eu标记抗PG单 克隆抗体一瓶;3.缓冲液:一瓶,50ml;4.增强液:一瓶,30ml; 5.浓缩洗板液:一瓶,40ml;6.抗PG单克隆抗体包被板:一块, 96孔。产品有效期:保存于2-8℃,有效期6个月。
检验原理:该试剂盒基于微孔板双抗体夹心原理的
胃蛋白酶原对胃部疾病的发展历程,一般可表述为: 浅表性胃炎——胃粘膜糜烂溃疡——萎缩性胃炎——胃 癌,及其它疾病具有良好的诊断和筛选作用。检测血清 或者血浆中的胃蛋白酶原I、II的含量及I/II,具有简便、 快速的优势,避免了X-射线对人体的侵害和胃镜的不便。
二、相关领域国内外技术现状、发展趋势及现有工作基础
胃蛋白酶原
咸阳市中心医院消化内科 贾泽博
一、概述
胃蛋白酶原(Pepsinogens,PG)为胃蛋白酶的前身,是胃 主细胞的产物,属于门冬氨酸蛋白酶家族。血清胃蛋白酶原分胃蛋 白酶原I(Pepsinogens I,PG I)和胃蛋白酶原II(Pepsinogens II,PG II),其水平可反映胃蛋白酶分泌及胃粘膜状态和功能。通 常情况下,约有1%的PG透过胃黏膜毛细血管进入血液循环,进入 血液循环的PG在血液中非常稳定。血清PG I和PG II反映胃黏膜腺 体和细胞的数量,也间接反映胃黏膜不同部位的分泌功能。当胃黏 膜发生病理变化时,血清PG含量也随之改变。PGI是检测胃泌酸腺 细胞功能的指针,胃酸分泌增多PGI升高,分泌减少或胃粘膜腺体 萎缩PGI降低;PGII与胃底粘膜病变的相关性较大(相对于胃窦粘 膜),其升高与胃底腺管萎缩、胃上皮化生或假幽门腺化生、异型 增值有关;PGI/II比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关。因此, 联合测定PGI和PGII比值可起到胃底腺粘膜“血清学活检”的作用。
本项目使用的胃蛋白酶原试剂盒由无锡市江源实业
技贸公司自主研发的产品,辅助测定机器有离心机、洗 涤机、水平摇匀仪、时间分辨荧光免疫分析仪。2009年 10月正式准予临床应用。
试剂盒主要组成:1.PG参考标准品:六瓶;2.Eu标记抗PG单克隆抗 体一瓶;3.缓冲液:一瓶,50ml;4.增强液:一瓶,30ml;5.浓缩 洗板液:一瓶,40ml;6.抗PG单克隆抗体包被板:一块,96孔。 产品有效期:保存于2-8℃,有效期6个月。