蛋白质溶解度PPT课件
蛋白质溶解度
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在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白 质质量占试样中总蛋白质量的百分数。 通常采用氮溶解指数(NSI)和蛋白 质分散指数((PDI)来表示。
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原理
用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可 溶性蛋白质,在催化剂作用下用浓硫酸将提 取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加 入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后, 再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量; 同时,测定原始试样中粗蛋白质含量,计算 出试样的蛋白溶解度。
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分析步骤
1 0.042 M氢氧化钾溶液 称取2.360 g氢氧化钾,加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定 容至刻度。 2 混合催化剂 称取6 g硫酸钾和0.4 g硫酸铜,磨碎混匀。 3 氢氧化钠溶液 称取400 g氢氧化钠,加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定容 至刻度。 4 硼酸溶液 称取20 g硼酸,加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定容至刻 度。 5 0.1M盐酸标准溶液 量取8.3 mL浓盐酸,注入1000 mL水中混匀,按GB 601-88要求进行 标定即可。 6 混合指示剂 称取1 g甲基红和5 g溴甲酚绿,加入乙醇溶解后,转移至1000 mL容量 瓶中,用乙醇定容至刻度。
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试剂
a) 氢氧化钾(分析纯),无水硫酸钾、五 水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲 酚绿、硫酸铵; b) 浓硫酸、盐酸(分析纯)、95%乙醇、 蒸馏水。
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仪器和设备
a) 感量为0.0001 g分析天平; b) 磁力搅拌器; c) 离心机; d) 样品粉碎机; e) 60目分析筛; f) 电炉; g) 100 mL或250 mL凯氏烧瓶; h) 凯氏蒸馏装置; i) 250 mL锥形瓶; j) 1000 mL容量瓶; k) 微量滴定管。
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分析结果计算
15/75=x/1.5g=0.3gx ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋 白含量×100%
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注意事项
不同样品的粒度应相同。 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应
一致 。
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Over 谢谢观看
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个人观点供参考,欢迎讨论!
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试样处理
称取试样1.5 g(准确至0.0002 g)置于 250 mL烧杯中,准确移入 0.042 M氢氧化 钾溶液75 mL,磁力搅拌20 min,然后将 试样转移至离心管中,以2700 r/min的速 度离心10 min。
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测定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中 可溶性蛋白质的含量。同时,按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白 质的含量。