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改良方法
• 对于有机杂酸：可以通过调节溶 氧水平来消除； • 对于非目的氨基酸：可以采取筛 选营养缺陷型或适当添加相应氨 基酸的方法来减弱。
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2.3.1 葡萄糖浓度 Gln的转化随着葡萄糖的加入量的增加而提高， 但从能量偶联效率来讲，葡萄糖的利用率却随 葡萄糖的加入量的增加在降低。因此，从经济 方面讲，提高葡萄糖的添加量并不是提高Gln 转化量的有效途径。 2.3.2谷氨酸浓度 补加Cl-能影响细胞膜的透性，使谷氨酸不易 渗出，而转化为谷氨酰胺分泌出来
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2.1.1谷氨酰胺合成酶（GS）的效能的调节 硫氨酸亚砜(MsO)是谷氨酰胺的结构类似物，很 容易被GS误认而与其变构部位结合抑制其活性。
针对这一现像，我们可以使用甲硫氨酸亚砜 (MsO)作为筛选剂选育突变株。从代谢角度解除 了因谷氨酰胺的积累而造成的对GS的反馈抑 制．
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GS的存在形式：未修饰、经腺苷共价修饰的。 AMP 共价键 酪氨酸残基 GS(AMP) 腺苷酰基转移酶(Adenylyltransferase，Atase) 腺苷酰化会使GS的活性降低或丧失 铵浓度 铵盐↑ 腺苷酰化程度↑ GS酶活力↓ 因此我们可以利用重叠引物法将GS结构基因的 Tyr405突变为Phe405从而除去GS腺苷酰化位点。
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策划：林骥晗、王蒙、刘一凡 资料：卢霄崎、杨帆 整理：林骥晗 制作：杨瀛、邢桦彬 展示：刘一凡 茶水：王瀚泽、，毛新宇、甘海威 托儿：王蒙
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可以看出Gln转化量随Glu浓 度的增加而有所提高。这可 能是由于谷氨酰胺合成酶的 分子结构所致:Glu进人酶活 性中心部位很困难。而高浓 度的Glu则会增加或加快其进 入到酶活性中心部位，促进 酶催化反应。但从如图4中也 能看到Gln转化率却随着Glu 浓度的增加而下降。
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2.3.3铵盐浓度 NHCI浓度大于4％时对谷氨酰胺的 合成会产生明显的抑制作用，主要 是因为在过量铵盐的培养条件下， GS腺苷酰化程度增强，GS酶活力 下降甚至失活 应对方法：对氮源进行补料发酵， 减少铵盐对谷氨酰胺合成酶合成的 的阻遏作用；
综述 现有的代谢调控方式
一．综述
1. 1.谷氨酰胺简介 1.2.谷氨酰胺代谢途径图解
二．现有的代谢调控途径
2.1.代谢相关酶的控制
2.2.代谢途径的控制 2.3.代谢物质浓度的改变
1.1.谷氨酰胺简介
L一谷氨酰胺(L--Glutamine，简称Gin)是 由L一谷氨酸的羧基酰胺化而来的一种条 件必需氨基酸。它是一种极有发展前途 的新药，在临床上主要用于治疗脑神经 疾病及消化道溃疡。
谷氨酰胺合成酶
NH3 L-精氨酸
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为保证谷氨酰胺的合成，应强化葡 萄糖→丙酮酸→ a-酮戊二酸→谷氨 酰胺的代谢主流，同时减弱向天冬 氨酸、缬氨酸、丙氨酸分枝代谢流 的强度．
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Байду номын сангаас
2.1.1谷氨酰胺合成酶的数量
从谷氨酸棒状杆菌的代谢 工程着眼，加强谷氨酰胺 合成代谢。克隆和表达谷 氨酰胺合成代谢的关键 酶——谷氨酰胺合成酶 (GS)的基因
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1.1.什么是条件必需氨基酸？
条件必需氨基酸
必需氨基酸
非必需氨基酸
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以葡萄糖为原料生物合成L谷氨酰胺，涉及到糖发 酵、磷酸己糖支路、三羧酸循环、乙醛酸循环以及 谷氨酰胺合成水平和分支氨基酸合成水平的调控。 其中从葡萄糖到丙酮酸到a-酮戊二酸再到L谷氨酰 胺是谷氨酰胺合成的代谢主流．
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L-脯氨酸 NADPH α-酮戊二酸 NADP+ L-谷氨酸 NH3 L-谷氨酰胺