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④提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入 0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37℃搅拌 1.5h，30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4，压 滤，滤液加入2倍体积的丙酮，放置3～4h过滤， 收集沉淀，自然风干，得干粗酶。
取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节pH8.8搅拌 1.5h离心，上清液60℃30min热处理。上清液 加 2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶 沉淀，0.01mol/L，pH8磷酸缓冲液溶解，离 心得上清酶溶液。
常见的酶类药物及治疗作用
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常见酶类药物
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1、L-天门冬酰胺酶工艺路线
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L-天门冬酰胺酶工艺说明
①菌种培养 大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉培养 基;
②种子培养 16％玉米浆，接种量 1～ 1.5％，37℃， 通气搅拌培养 4～8h;
③发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8％，37℃ 通气搅拌培养 6～ 8h，离心分离发酵液，得菌体， 加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干成 菌体干粉;
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⑤精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀， 清液再调 pH7.7加入50％聚乙二醇，浓度达 到 16％。2～ 5℃放置 4～ 5天，离心得沉 淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀，同法 反复 1次，pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液溶 解，50％聚乙二醇处理 1次，即得无热原的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸缓冲 液，在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤，分 装，冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸胺 酶成品，每I支 1万或 2万单位。
②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋白， 吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石，搅拌吸 附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞色素 C的 人造沸石，用蒸馏水和精品氯医学化ppt 钠溶液反复洗涤，然9 后装
③盐析、浓缩、透析 洗脱液加入固体硫 酸镀达到 45％饱和度，使杂蛋白析出， 过滤。收集透明滤液，缓缓加入 20％ 三氯醋酸，边加边搅拌使细胞色素 C 沉淀析出，离心收集沉淀。再将沉淀 溶于蒸馏水，装入透析袋中，透析至 无硫酸根为止，过滤得细胞色素C粗品 溶液。
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二、细胞色素C生产工艺
临床上主要用于组织缺氧的急救和辅助治疗药物， 适用于治疗脑、心肌缺氧和其它因缺氧引起的一切 症状。
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工艺过程
①绞碎、提取、压滤
取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌健等，绞肉机 中绞碎。称取心肌碎肉，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀， 用硫酸调pH4左右，常温搅拌提取压滤，滤液用氨水调 节pH6.2，离心得提取液。心渣再加等量蒸馏水同上法 重复提取1次，合并两次提取液。
氢钠，搅拌溶解再加双甘肽1.5g混合均匀，用氢氧化钠
调节pH6.4左右，加注射用水100ml，过滤除热原，6号
垂溶漏斗过滤，测含量，灌注，冷冻干燥，即得每支含
15mg细胞色素C的制剂。
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④吸附、洗脱、透析
粗品溶液通过处理好的 Amberite IRC－50（NH4＋）树 脂柱吸附，然后将树脂移入大烧杯中，水洗至澄清为止，
再分别上柱，用0·6mol/L磷酸氢二钠与0.4mol /L氯化钠 混合液洗脱，洗脱液用蒸馏水透析去氯离子，得细胞色
素C精品溶液。
⑤制剂
取含相当于1.5g的细胞色素C精品液，加200mg亚硫酸