一、移液器的使用、校准与维护
8、记录称量值； 9、重复以上步骤10次，取得10次的称量值的平均值作为蒸 馏水的重量，按照蒸馏水Z因子表计算体积：体积=重量/Z 因子； 10、按照校准结果调节移液器。
每年应对移液器进行校准一次，可以送厂家进行校 准（最好），也可以自己简单校准
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※先吸取样品，然后排回样品池或废液槽 ※润洗有助于提高洗头多次相同移液操作的一致 性，一般可以提高0.5%的移液准确性
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一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
• 正向吸液：将移液器按钮按到第一档吸液，释放
按钮。放液时，先按到第一档，打出大部分液体， 再按下第二档，将余液排出。
方式即可；活塞清洁可用双蒸水，晾干即可。如
有必要，有些移液器、移液器的使用、校准与维护
3、移液器的消毒灭菌
● 121℃、1bar下，灭菌20min ● 用灭菌袋或牛皮纸包装灭菌部件
● 每次高温高压灭菌后，应进行性能检查。
每进行10次灭菌后，对活塞或密封件涂油脂 ● 紫外线照射灭菌 对移液器表面进行灭菌， 一般用在细胞培养室里
二、PCR仪的使用与维护
• 清洁反应模块和基座注意几点：
1、清洁散热片 使用软毛刷或湿布清除灰尘，可以保持样品 加热和冷却的精度
2、清洁反应模块孔 及时清除溢出液体以避免其风干，如使
用了清洁剂，应该用水冲洗多次以免残留。避免使用强碱
性溶液清洁模块，也不能使用油性物质清洁。
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4、来回吸吹蒸馏水3次，润湿吸头，用纱布拭干吸头外表； 5、垂直握住移液器，将吸头侵入液面2-3mm处，缓慢吸取 蒸馏水，停留1-3s； 6、提出吸头，靠在管壁，去掉吸头外部的液体； 7、以30角度放入称量烧杯中，缓慢一致放液，先按到第一
档，等1-3s,再按到第二档，使液体完成排出；
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一、移液器的使用、校准与维护
• 校准步骤
1、选定校准体积：A 拟校准体积；B移液器标定体积的中间 体积；C最小可调体积（不小于拟校准体积的1%）；D如
为固定体积移液器，则只有一种校准体积；
2、将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头；
3、调节好电子天平；准备小量杯
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一、移液器的使用、校准与维护
7、自动数据提取和分析
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三、测序仪的使用与维护
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三、测序仪的使用与维护
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三、测序仪的使用与维护
测序仪的维护
何时作光谱校正？
• 使用新的荧光染料
• 激光或CCD被调节或更换后
• 不同颜色的荧光间出现干扰（有拔起或下压峰）
二、PCR仪的使用与维护
3、清洁内盖 使用无毛软布和水清除内盖表面的碎屑和溶 液。不能使用磨擦性和粗糙的材料。 4、清洁外表面 使用湿布清除溢出外壁的液体，如有需
要可使用低浓度的肥皂液，但最后要用湿布擦干净。
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三、测序仪的使用与维护
ABI3130XL
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一、移液器的使用、校准与维护
● 去除DNA的污染
※10X储存液稀释1倍，将移液器
下半部分拆卸部件放入其中， 95℃侵泡30min ※用蒸馏水将部件冲洗干净 ※在60℃下烘干或完全晾干
※待冷却后，重新组装
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一、移液器的使用、校准与维护
一、移液器的使用、校准与维护
手温对聚乙烯和聚丙烯材质的影响
手温对移液误差的影响可以达到0.2%以上
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一、移液器的使用、校准与维护
（4）人为操作
不同使用经验者的比对
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一、移液器的使用、校准与维护
重复过度操作导致精密度下降
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使用厂家 配套的吸 头，更加 精确
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一、移液器的使用、校准与维护
10ul与300ul的吸头比较
在合适的范围量程内，尽量使用小量程的吸头
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一、移液器的使用、校准与维护
（3）温度
不同温度移液器吸液的对比
●移液器、吸头、液体同在室温
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4、移液器的密封性检查
● 绝大部分漏气的原因是，吸头不匹配、吸头质量不
合格、吸头未上紧、二次使用吸头、移液器本身气密 性不佳 ●目测法检查 200ul以下的移液器，先吸上水后，
将吸头侵入液面1-2mm，静待20s，观察是否液面下
降；1000ul及以上的移液器，将吸头朝下悬垂20s，
观察是否有液体下滴。
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一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
1、移液器的构造
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一、移液器的使用、校准与维护
2、移液器量程的设定
（1）选择合适量程 （2）旋转到所需量程 （3）所设量程在移液器量程范围内 （4）量程数字要清楚显示 （5）旋转要慢、匀速 大体积→小体积，逆时针旋转 小体积→大体积，顺时针超过预定刻 度，再回调
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一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
3、选择合适的吸头，最好是带滤芯的 4、样品的准备，室温放置平衡
液体温度＞吸头，移取的液体体积偏大
液体温度＜吸头，移取的液体体积偏小
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一、移液器的使用、校准与维护
5、装吸头
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一、移液器的使用、校准与维护
6、正确吸放液
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●吸头要侵入一定深度，因移取体积而定 ●慢吸慢放，控制好弹簧 ●停留一会
一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
●润洗洗头
※用同一样品对洗头进行润洗
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1、扩增前，开机预热30 min； 2、加样后离心，放置于热模块中；
3、合盖后，进行项目扩增程序编辑（一般都是预先编辑
好）； 4、设定编辑样本及荧光通道的选择； 5、分析结果。
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二、PCR仪的使用与维护
• 分析结果有手动模式、也有自动模式。有些品牌的 PCR仪还有其他的分析软件功能，比如在科学研究 中的基因表达。
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二、PCR仪的使用与维护
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二、PCR仪的使用与维护
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二、PCR仪的使用与维护
PCR仪的维护与保养
• 在仪器运行时，不能移动仪器、不能敞开或松动封盖 • 不能使用挥发性试剂，可能会导致爆炸并污染反应模块 • 不能再样本盖敞开或泄漏时运行程序，试剂可能会溢出， 造成模块、内盖、光学头的模糊和污染。
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二、PCR仪的使用与维护
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二、PCR仪的使用与维护
BIO-RAD CFX96
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二、PCR仪的使用与维护
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Lightcylce 480
二、PCR仪的使用与维护
PCR仪的使用
一、移液器的使用、校准与维护
（5）移液技术
甘油的移液
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反向比正向移液好， 电动多次移液比机械的好
一、移液器的使用、校准与维护
预润湿与未润湿的比较
预润湿3-5次效果较好
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一、移液器的使用、校准与维护
移液角度的比较
垂直吸液效果好
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二、PCR仪的使用与维护
• 勿清洁或触摸内盖中加热器板孔后面的光学系统 • 定期清洁反应模块和内盖，防止积累污垢、危险生物 材料或荧光溶液 • 定期清洁外盖和C1000基座 • 定期清理磁盘，备份数据
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二、PCR仪的使用与维护
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移液器常见故障及解决方案
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一、移液器的使用、校准与维护
移液器的校准
※室温20-25℃，波动范围不大于±0.5℃ ※电子天平：放于无震动无尘的台面，天平内相对湿度
60-90%
※测定液体：20-25℃的双蒸水
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三、测序仪的使用与维护
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三、测序仪的使用与维护
3、软件设置 标记方法、毛细管长度、电泳胶的种类等 4、开始运行 不同的DNA片段从负极向正极移动
5、激发和检测 当标记有荧光素的DNA片段移动到检测窗， 就受到激发而产生信号 6、数据采集和处理
一、移液器的使用、校准与维护
误差的可能原因
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