实验五染色体Ag-染色法
❖ (3)玻片标本细胞面朝上平放其上,加4滴50 %AgNO3溶液和2滴明胶显影液,
复以盖片(或擦镜纸)直到玻片标本呈金褐色为 止,一般为3 min。
❖ (4)移ห้องสมุดไป่ตู้盖片,并用蒸馏水快速漂洗,晾干。
❖ (5)用Giemsa染色液(磷酸缓冲液:Giemsa原 液=10:1)染色8~10 min,用自来水冲洗。
实验五 染色体Ag-染色法
❖ 1、实验原理 ❖ 应用银染色技术,哺乳动物的核仁组织者
(NOR)特异性染为黑色, ❖ 这种银染色阳性的NOR称为Ag-NOR ❖ 即18S+28S核糖体基因的分布区,
图15-1
❖ 银染色的是与rDNA转录有关的一种酸性蛋白。 因此,银染的是有转录活性的NOR。
❖ 一般NOR位于次缢痕的位置。
❖ (6)蒸馏水冲洗后,空气干燥,镜检。
5、实验结果与分析讨论
❖ 仔细观察.Ag-NOR分布, ❖ 并计数10个细胞分裂相Ag-NOR数目
2、实验材料
❖ 水浴锅、试剂瓶、镊子、滤纸、擦镜纸等 ❖ 硝酸银溶液、明胶显影液、Giemsa原液
3、实验方法
❖ (1)按常规方法制备染色体标本片(见实验一)
❖ (2)在培养皿底部放一用蒸馏水润湿的滤纸, 上放2根玻棒(或火柴棒),置水浴锅保温至 56~60℃(一般采用60℃)。
此过程可不放在水浴锅内,直接将常规染色体标 本片放在56~60℃的电热板上亦可。