解质有清晰的界面。电泳开始后，带电粒子向另一极
（正极）移动，泳动速度最快的离子走在最前面，其
他离子依电极速度快慢顺序排列，形成不同的区带。
只有第一个区带的界面是清晰的，达到完全分离，其
中含有电泳速度最快的离子，其他大部分区带重叠。
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电泳技术
电泳种类II ：


区带电泳
是在一定的支持物上，于均一的载体电解质 中，将样品加在中部位置，在电场作用下，样品 中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速 度移动，分离成一个个彼此隔开的区带。区带电
丙烯酰胺凝胶电泳;

(4)丝线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳 。
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电泳技术
区带电泳2

按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为: (1) 平板式电泳:支持物水平放置,是最常用的 电泳方式;

(2) 垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直
板式电泳.

(3) 柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适
当的电泳管中做成管状电泳.
电荷移动规律

电泳技术
利用电泳可以确定胶体微粒的电性质，向阳极移动的 胶粒带负电荷，向阴极移动的胶粒带正电荷。

一般来讲，金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸 附阳离子，带正电荷；

非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子， 带负电荷。

因此，在电泳实验中，氢氧化铁胶体微粒向阴极移动， 三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。利用电泳可以分离 带不同电荷的溶胶。
电泳技术
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电泳技术
前 言

1937年，瑞典科学家Tiselius设计了世界上第一台电泳 仪，建立了移界电泳法，并于1948年荣获诺贝尔奖。70
年以来，电泳技术围绕制胶、电泳、染色三个技术环节，
不断改进，以实现下列目标： 1、提高分辨率及灵敏度。 2、简化操作，缩短电泳时间。 3、扩大应用范围。

各类电泳技术已广泛应用于生命科学各个领域。
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电泳技术
区带电泳3

按pH的连续性不同,区带电泳可分为: (1)连续pH电泳:电泳的全部过程中缓冲液pH保 持不变。如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;

(2)非连续pH电泳:缓冲液和支持物间有不同的
pH，如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳;
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电泳技术
电泳的基本原理

生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离 子和阴离子基团,称为两性离子.常以颗粒分散在 溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与 其他大分子的相互作用.在电场中,带电颗粒向阴 极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符
电泳技术
电泳特点

在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作 用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为 常数，是该带电粒子的物化特征性常数。

不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷 相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一 定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分
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开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。
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Arne Wilhelm Kaurin Tiselius
电泳技术 阿恩· 威廉· 考林· 提塞留斯 提塞留斯是瑞典著名生化学家 和物理化学家。1902年8月10日 出生在斯德哥尔摩，在乌普沙拉 大学获三个硕士和一个博士学位， 毕业后留校任教。 他改进、设计了电泳仪，成功 地分离了血清中的蛋白质，对氨 基酸和肽也作了分离研究，改进 了色层分离法，他设计的电泳仪 至今还在应用，发展了生物化学 的研究手段，荣获1948年诺贝尔 化学奖。 他还多年担任诺贝尔基金评审 的委员，副会长和会长之职。 1971年10月29日因心脏病突发 而卒于家中，终年69岁。
时，其净电荷为零，泳动速度下降到零，具有不同等
电点的物质最后聚焦在各自等电点位置 ，形成一个个
清晰的区带，分辨率极高。
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电泳技术
区带电泳1

按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为: (1)滤纸为支持物的纸电泳; (2)粉末电泳: 如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;

(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚
泳按支持物的物理性状不同，又可分为纸和纤维
膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳等。
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电泳技术
电泳种类III：

等电聚焦电泳 是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽 中，当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷， 向负极移动；若其处在高于其本身等电点的环境中， 则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点
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电泳技术
电泳



定义1： 液体介质中带电的胶体微粒在外电场作用下相对 液体的迁移现象。 定义2： 依据分子或颗粒所带的电荷、形状和大小等不同， 因而在电场介质中移动的速度不同，从而达到分 离的技术。 定义3： 带电物质或细胞在电场中的泳动。根据大分子或 颗粒的电荷、大小和形状不同，使其在通过电场 中的凝胶或介质时发生分离的方法。
使其应用十分广泛。电泳技术除了用于小分子物质的分离分 析外，最主要用于蛋白质、核酸、酶，甚至病毒与细胞的研 究。由于某些电泳法设备简单，操作方便，具有高分辨率及 选择性特点，已成为医学检验中常用的技术。
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电泳技术
电泳种类I ：

移动界面电泳

是将被分离的离子（如阴离子）混合物置于电泳
槽的一端（如负极），在电泳开始前，样品与载体电
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电泳技术
应用领域

1809年俄国物理学家Peнce首先发现了电泳现象，但直到 1937年瑞典的Tiselius建立了分离蛋白质的界面电泳
（boundary electrophoresis）之后，电泳技术才开始应用。

本世纪60-70年代，当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引
入电泳以来，电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式
3电场作用下，向着与其电性相反的 电极移动，称为电泳(electrophoresis, EP)。

利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分
离的技术称为电泳技术。

1937 年瑞典学者 A.W.K.提塞留斯设计制造了
移动界面电泳仪 ，分离了马血清白蛋白的3种
球蛋白，创建了电泳技术。
号.
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电泳技术
影响电泳的因素
1. 电泳介质的pH值 溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质 所带净电荷的多少.对蛋白质,氨基酸等类似两性电解 质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快, 反之越慢.因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩 大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白 质的有效分离.为了保证电泳过程中溶液的pH值恒定,必 须采用缓冲溶液.