小鼠感染模型； 雪貂感染模型； 猴感染模型； 其它模型，猪、兔感染模型。
18
品系（ ICR Swiss、 SwissWebster 和 BALB/c ） 性别无差异， 常用雌性
肺部实变，肺组织重 量 ，动脉血氧饱和 度 ，肺组织匀浆中 进行病毒检测
临床症状， 48-96 小时出现症状，呼 吸频率加快，体温 下降

8
疾病动物模型分类
动物模型分类方式较多，产生原因、系统、 病理、中医药体系等。 按产生原因分类：自发性动物模型和诱发性 动物模型。

9
自发性疾病动物模型

动物自然发生的疾病或由于基因突变的异 常表现通过遗传育种定向培育保留下来的 动物模型。
10
优点：人为因素少，更接近人类自然发病， 应用价值高，广泛应用于遗传性疾病、免 疫缺陷病、肿瘤等。 缺点：发现的种类有限，发病的因素复杂， 发病的条件要求高，可复制性差，尚不能 普遍应用。
33
H5N1病毒感染小鼠组织中的病毒的增殖结果 Replication of virus in infected H5N1 mouse tissues Virus titera（log10 EID50/g） Lung Heart Liver Spleen Kidney Brain 肺 心 肝 脾 肾 脑
感染小鼠细胞因子变化

非特异性免疫因子IL-18出 现明显上升，感染第5天达 到最高3133.5 pg/mL；IL10出现明显上升，TNF-α出 现缓慢下降趋势。
小鼠血清TNF-α 动态变化
500
血清TNF- α 浓度 (pg/ml)
小鼠血清IL-18动态变化 3500
血清IL-18浓度 （pg/ml)
动物选择原则，实验动物、经济动物、野生 动物； 病原选择原则，标准株、模式株、代表株等。 疾病最大化原则，最大程度拟疾病临床表现、 疾病过程、病理生理特征、免疫特征等。 标准化、规范化原则，可控性、可重复性。 生物安全原则。

17
感染性疾病动物模型 流感病毒感染动物模型


3000 2500 2000 1500 1000 500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 时间（天） 尿囊液组 空白对照组 实验组
小鼠血清IL-10动态变化
45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 空白对照组
26
接种途径
鼻腔接种，禽流感模型常用的接种方法； 静脉接种，能引起死亡，死亡率低于鼻腔接种，
肺能形成弥散性肺泡损伤及渗出性炎症，不能检 测到病毒载量。 脑内接种，不引起动物死亡，注射部位出现小胶 质细胞浸润。
静脉腔接种肺部2d病变
脑内接种第3天脑
27
模型指标
临床症状：接
毒组小鼠出现 呼吸急促，饮 食量下降，精 神不振，弓背、 蜷缩、竖毛、 颤抖，反应性 差，活动减少， 爱扎堆。

怎么去评价一个动物模型的成功建立？ 相似性 一致性 实用性 可控性 可重复性 易行性 可靠性 经济性
6
人类疾病动物模型的类型
完全疾病表现的模型，最理想的疾病模型； 部分疾病表现的模型； 同类疾病的模型或参比疾病的模型； 疾病病理的模型； 病原免疫的模型； 基因工程疾病的模型； 复合疾病的模型； 群体动物的模型； 特殊疾病的模型；
潜伏期的小鼠
极度衰竭小鼠
恢复期的小鼠
恢复后的小鼠
28
H5N1感染小鼠的死亡分布，感染第2d出现死亡，
第3-7d死亡高峰，死亡率达86.7%，ST50在 5.25d。
1.2 1.0
.8
生存率
.6
.4
.2
动物分组
对照组
0.0 0 2 4 6 8 10 12
模型组
生存时间（天）
29
病理特征：感染小鼠的临床特征出现早期、进展
13
14
诱发性疾病动物模型

诱发性动物模型：应用各种物理、化学、 生物或复合致病 因素作用于动物后认为诱 发动物产生某些类似人类疾病的模型。
15
优点：短时间内复制出大量疾病模型，实 验条件易控制，重复性好。 缺点：与自然发生的人类疾病在某些方面 存在一定差异，存在一定的局限性。

16
诱发性动物模型制作原则
胞占淋巴细胞的百分比由14％下降到9.4％。
图4.7 血液中T细胞数量的变化
70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
36
时间（天）
占淋巴细胞的百分比（％）
实验血CD3+T 实验血CD4+T 实验血CD8+T 空白血CD3+T 空白血CD4+T 空白血CD8+T 尿囊液血CD3+T 尿囊液血CD4+T 尿囊液血CD8+T
死亡率 16.7% 50%
熟之前的小鼠 比较敏感，死 刚离乳组 亡率高于其它 组的小鼠。 离乳至性 成熟组 性成熟组
16-18g
18-20g
50%
30%
25
病毒株影响
A/Goose/Guangdong/NH/2003(H5N1)，经过对其HA，
NA，NP，NS，PA，PB1，PB2，M蛋白的测序分析， 该病毒HA、NA分别与2001年、2003年福建分离的猪 流感病毒的同源性较高。 经鸡胚尿囊液增殖，鸡胚半数致死量（EID50）为 107.31/0.1 mL，鼻腔接种小鼠。 不需要小鼠适应。 禽流感感染小鼠早期典型毒株HK_483_97（小鼠急 性死亡，肺外器官感染）, HK_486_97（小鼠不死 亡）, HK_156_97（介于两者之间）；我们使用的 毒株对小鼠的毒力类似于HK_156_97株。
肺泡中纤维素性及浆液性渗出， 有透明膜形成。
终末细支气管的上皮肿胀、脱落， 上皮细胞脱落，并进入肺泡腔。 脱落的上皮细胞进入肺泡中。 — 肺泡扩张；胸膜炎；肺泡上皮细 胞和白细胞凋亡。
32
H5N1病毒感染小鼠体内病毒检测

RT-PCR检测接毒小鼠（BALB/c）肺病毒在第1天至第九天 均能检出，心、肝、脾、肾、脑、胸腺均未能检出。
Route
Intranasal 2.78 （100 μL）
－
－
－
－
－
a：The tissues were collected on day 3; -: H5N1 virus was not detected。
34
感染小鼠抗体变化趋势
ELISA检测感染小鼠（ICR）抗体的OD值变化情况 1.5
OD值
年龄，刚 断奶小鼠 易感，适 应株5-8周 小鼠
毒株，鼠适应株 A/ PR/ 8/ 34 ( H1N1) 和A/ FM/ 1/ 47 ( H1N1)
鼻腔接种，气 溶胶接种
19
最易感动物， 病毒不需要 适应
病毒滴度测定、 病理诊断等
鼻孔接种 临床症状，体温升高、流涕、张口呼 吸、活动迟缓
20
猴、猿等灵长类动物与人具有相似的生理、
期和死亡高峰期和恢复期，表现呼吸困难，甚至 死亡；组织病理变化显示弥散性肺泡损伤及渗出 性炎症。
感染第2天，肺泡出血
感染第2天，肺间质增生， 肺泡隔增宽，肺泡萎缩
感染第8天，大量纤维素 性及浆液性渗出，有透明 30 膜形成
小鼠感染H5N1禽流感病毒与人感染的临床特征比较
潜伏期 人 一般为13天， 通常 在7天 之内 临床特征 发病年龄以儿 童和青壮 年为主； 女性病人 略多于男 性；病死 率高 对离乳后，性 成熟之前 小鼠更易 感 症状与体征 病程
50％ 70% 40％ 25％ 10％
22
不同品系小鼠感染体温变化
图2.6 不同品系小鼠接毒后体温的变化
39 38 37
体温（℃）
36 35 34 33 32 31 30 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 时间（天）
BABL/C小鼠 ICR小鼠 NIH小鼠 C57BL小鼠 昆明小鼠

7
疾病动物模型研究、应用规范
动物规范要求，实验动物、经济动物和野生 动物。 病原规范化要求，标准株、模式株、代表株。 研究规范要求，接种方式、模型指标等。 模型研制途径要求。 剂量要求，疾病的最大化原则。 模型指标要求，临床研究、疾病病原学要求， 免疫学要求，病理生理。 药物疫苗研究规范。
23
不同品系小鼠感染肺病理变化

肺脏充血和水 肿； 器官和支气管 内有血性分泌 物； 粘膜下层有灶 性出血、水肿 和细胞浸润； 肺泡腔内含有 纤维蛋白和渗 出液，呈现浆 液性出血性支 气管肺炎。
正常小鼠
BABL/C小鼠
ICR小鼠
昆明小鼠
24
不同日龄小鼠易感性
刚离乳至性成
组别
体重 11-13g 14-16g
生化特征，其作为实验动物有着其它动物 不可替代的优势。 但由于动物珍贵，实验成本高及受伦理学 方面的限制，很少用于流感的研究。
21
实验动物品系影响
实验动物
不同品系 小鼠对 H5N1禽流 感病毒易 死 感性不同。 亡
率
品 ICR BABL/c小 NIH C57 KM 系 小 鼠 小鼠 小鼠 小 鼠 鼠
31
小鼠
0-1天
小鼠感染H5N1禽流感病毒与人感染病理比较
脏器 病变类别 炎症细胞浸润 BALB/c小鼠 人 肺泡中大量巨噬细胞和少量中性 肺泡中主要是巨噬细胞，间质中 粒细胞浸润，肺间质和终末细 主要是T淋巴细胞，肺中可见 支气管有淋巴细胞浸润，感染 散在的具噬红细胞活性的组织 晚期，肺组织中有浆细胞产生。 细胞，感染晚期偶见浆细胞；